Sekretion von Interleukin-6 durch primäre Gliazellkulturen neugeborener Ratten unter Hypoxie:
Gespeichert in:
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2000
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INHALT
1
EINLEITUNG
1
1.1
EPIDEMIOLOGIE
DES
SCHLAGANFALLS
1
1.2
PATHOPHYSIOLOGIE
DES
SCHLAGANFALLS
1
13
MODELLE
FUER
DIE
HIRNINTARKTFORSCHUNG
3
1.4
GLIAZELLEN
3
1.4.1
ASTROZYTEN
4
1.4.1.1
PHYSIOLOGISCHE
ASPEKTE
DER
ASTROZYTEN
4
1.4.1.2
ASTROZYTEN
UND
HYPOXIE
5
1.4.2
MIKROGLIA
5
1.4.2.1
PHYSIOLOGISCHE
ASPEKTE
DER
MIKROGLIAZELLEN
5
1.4.2.2
MIKROGLIA
UND
HYPOXIE
6
1.5
INTERLEUKIN-6:
BEDEUTENDER
VERTRETER
IM
NETZWERK
DER
ZYTOKINE
7
1.5.1
BIOLOGISCHE
ASPEKTE
VON
INTERLEUKIN-6
UND
SEINEM
REZEPTOR
7
1.5.2
DIE
PATHOGENETISCHE
BEDEUTUNG
VON
INTERLEUKIN-6
9
1.5.3
DIE
BEDEUTUNG
VON
INTERLEUKIN-6
FUER
DAS
ZENTRALE
NERVENSYSTEM
10
1.5.3.1
BIOLOGISCHE
WIRKUNGEN
VON
IL-6
IM
ZENTRALNERVENSYSTEM
10
1.5.3.2
INTERLEUKIN-6-PRODUKTION
DURCH
GLIAZELLEN
11
1.6
PROBLEMSTELLUNG
UND
ZIEL
DER
VORLIEGENDEN
ARBEIT
12
2
MATERIAL
UND
METHODEN
13
2.1
ZELLKULTURMETHODEN
13
2.1.1
ISOLIERUNG
DES
HIMGEWEBES
13
2.1.2
ANSETZEN
DER
GLIAMISCHKULTUREN
14
2.1.3
HERSTELLUNG
DER
MIKROGLIAZELLKULTUREN
15
2.1.4
HERSTELLUNG
DER
ASTROZYTENKULTUREN
15
2.1.5
IDENTIFIZIERUNG
DER
ZELLARTEN
16
2.2
AUFBAU
UND
DURCHFUEHRUNG
DES
HYPOXIEKAMMERVERSUCHES
17
2.2.1
EXPERIMENTELLE
ANORDNUNG
17
2.2.2
BESCHREIBUNG
DER
SAUERSTOFFINESSSONDE
19
2.2.3
VORBEREITUNG
DES
VERSUCHES
19
2.2.4
ABLAUF
DES
VERSUCHES
20
2.2.5
EINFLUSS
DER
ROTATION
AUF
DIE
ZELLKULTUREN
22
23
LPS-STIMULATION
DER
GLIAZELLKULTNREN
22
2.4
BIOCHEMISCHE
ANALYSEN
DER
HYPOXIEVERSUCHE
23
2.4.1
ABSCHAETZUNG
DES
ZELLTODES
ANHAND
DER
FREISETZUNG
VON
LDH
23
2.4.1.1
PRINZIP
DER
LDH-MESSUNG
23
2.4.1.2
DURCHFUEHRUNG
DER
LDH-MESSUNG
23
2.4.2
BESTIMMUNG
DER
KONZENTRATION
VON
LAKTAT
IM
ZELLUEBERSTAND
23
2.4.2.1
PRINZIP
DER
LAKTATMESSUNG
23
2.4.2.2
DURCHFUEHRUNG
DER
LAKTATMESSUNG
24
2.5
PROLIFERATIONSBIOASSAY
FUER
INTERLEUKIN-6
24
2.5.1
PRINZIP
DES
ASSAYS
24
2.5.2
DURCHFUEHRUNG
DER
IL-6-BESTIMMUNG
25
2.5.3
ZUVERLAESSIGKEIT
DES
B9-PROLIFERATIONSASSAYS
.
26
2.5.3.1
SPEZIFITAET
DES
ASSAYS
26
2.5.3.2
RICHTIGKEIT
27
2.5.3.3
PRAEZISION
27
2.6
STATISTISCHE
ANALYSEN
28
3
ERGEBNISSE
29
3.1
IDENTIFIZIERUNG
UND
REINHEIT
DER
VERWENDETEN
GLIAZELLKULTUREN
29
3.1.1
ASTROZYTENKULTUREN
29
3.1.2
MIKROGLIAZELLKULTUREN
30
3.2
HYPOXIEKAMMERVERSUCHE
31
3.2.1
SAUERSTOFFPARTIALDRUCK
31
3.2.2
TEMPERATURVERLAUF
32
3.2.3
EINFLUSS
DER
ROTATION
33
3.3
VALIDATION
DES
BIOASSAYS
ZUM
NACHWEIS
VON
INTERLEUKIN-6
34
3.3.1
SPEZIFITAET
34
3.3.2
RICHTIGKEIT
36
3.3.3
PRAEZISION
37
3.4
LPS-STIMULATION
DER
GLIAZELLKULTUREN
38
3.4.1
LPS-STIMULATION
VON
ASTROZYTEN
38
3.4.2
LPS-STIMULATION
VON
MIKROGLIAZELLEN
39
3.5
HYPOXIEVERSUCHE
MIT
GLIAZELLKULTUREN
40
3.5.1
HYPOXIEVERSUCHE
MIT
ASTROZYTENKULTUREN
40
3.5.1.1
FREISETZUNG
VON
LDH
IN
DEN
ZELLUEBERSTAND
40
3.5.1.2
FREISETZUNG
VON
LAKTAT
IN
DEN
ZELLUEBERSTAND
41
3.5.1.3
FREISETZUNG
VON
IL-6
IN
DEN
ZELLUEBERSTAND
42
3.5.2
HYPOXIEVERSUCHE
MIT
MIKROGLIAZELLKULTUREN
43
3.5.2.1
FREISETZUNG
VON
LDH
IN
DEN
ZELLUEBERSTAND
43
3.5.2.2
FREISETZUNG
VON
LAKTAT
IN
DEN
ZELLUEBERSTAND
44
3.5.2.3
FREISETZUNG
VON
IL-6
IN
DEN
ZELLUEBERSTAND
45
4
DISKUSSION
46
4.1
ZELLKULTURMETHODIK
46
4.2
HYPOXIEKAMMER
47
4.2.1
LDH-FREISETZUNG
WAEHREND
DER
HYPOXIE 48
4.2.2
LAKTATFREISETZUNG
WAEHREND
DER
HYPOXIE
49
4.3
INTERLEUKIN-6-BIOASSAY
50
4.3.1
SPEZIFITAET
DES
ASSAYS
50
4.3.2
STATISTISCHE
VALIDATION
DES
ASSAYS
51
4.4
LPS-STIMULATION
DER
GLIAZELLKULTUREN
52
4.5
KLINISCHE
RELEVANZ
VON
INTERIEUKIN-6
VOR
DEM
HINTERGRUND
DER
ERZIELTEN
ERGEBNISSE
53
5
ZUSAMMENFASSUNG
56
6
LITERATUR
58
7
DANKSAGUNG
70
8
LEBENSLAUF
71 |
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