Eigenschaften humaner T-Zell-Linien mit Spezifität für basisches Myelin-Protein im Hinblick auf Pathogenese und Therapie der Multiplen Sklerose:
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Aachen
Shaker
2001
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INHALTSVERZEICHNIS
Seite
1 EINLEITUNG 9
1.1 Symptome und klinischer Verlauf der Multiplen Sklerose 9
1.2 Pathologische Anatomie und Histologie 10
1.3 Epidemiologie 11
1.4 Immungenetische Prädispositionsfaktoren 12
1.5 Pathogenese 13
1.5.1 Eigenschaften encephalitogener T-Zellen bei der experimentellen 14
allergischen Encephalomyelitis (EAE)
1.5.2 Autoreaktive T-Zellen bei MS-Patienten und gesunden 15
Kontrollpersonen
1.5.3 Die Migration aktivierter T-Zellen über die Blut-Hirn-Schranke 17
und ihre Interaktion mit hirneigenen Zellen
1.5.4 Die Bedeutung der Zytokine 19
1.6 Zielsetzung und Fragestellung der Arbeit 21
2 MATERIAL UND METHODEN 22
2.1 Antigene 22
2.2 Mono- und polyklonale Antikörper 22
2.3 Isolierung antigenspezifischer T-Zell Linien 23
2.4 Astrozyten-Linien 24
2.5 Isolierung von Monozyten 25
2.6 FACS-Analyse 25
2.7 Induktion von Membranmolekülen auf Astrozyten und Monozyten 26
7
Seite
2.8 Bestimmung der Antigenspezifität und der Epitopspezifität 26
2.9 Bestimmung der HLA-Restriktion 27
2.10 Bestimmung der Zytotoxizität 27
2.11 Co-Kultur-Experimente 28
2.12 Zytokinmessungen 29
3 ERGEBNISSE 32
3.1 Charakterisierung der T Zellen 32
3.1.1 Isolierung der T-Zellen 32
3.1.2 Oberflächenmarker, TCR-Vß Element, Epitopspezifität und 32
HLA-Restriktion der T-Zell Linien
3.1.3 Zytokinproduktion der T-Zellen 39
3.2 Interaktion der T-Zellen mit Astrozyten und Monozyten 43
3.2.1 Induktion von HLA-Molekülen und Adhäsionsmolekülen 43
auf Astrozyten und Monozyten
3.2.2 Zytotoxizität der T-Zellen gegenüber Astrozyten und Monozyten 44
3.2.2.1 MBP spezifische T-Zell Linien unterschieden sich in 44
ihrer zytotoxischen Aktivität gegenüber Astrozyten, nicht jedoch
gegenüber Monozyten
3.2.2.2 Die zytotoxische Aktivität MBP spezifischer T-Zell Linien korrelierte 45
nicht mit Epitopspezifität, HLA-Restriktion, TCR-Vß Element und
Zytokinprofil
3.2.2.3 Die antigenspezifische Lyse von Astrozyten und Monozyten war 49
HLA-DR restringiert und von Adhäsionsmolekülen abhängig
8
Seite
3.2.3 Inhibition der T-Zell Proliferation in Anwesenheit von Astrozyten 52
3.3 Modulation des Zytokinspektrums von MBP spezifischen 56
T-Zell Linien durch Pharmaka
3.4 Eigenschaften Herpesvirus saimiri transformierter T-Zellen 58
4 DISKUSSION 64
4.1 Phänotyp, Epitopspezifität, HLA-Restriktion und TCR-Vß Element 65
humaner, MBP spezifischer T-Zell Linien
4.2 Interaktion der T-Zell Linien mit Astrozyten und Monozyten 68
4.2.1 Charakteristika der Astrozyten-Kulturen 69
4.2.2 Die Lyse der Astrozyten und Monozyten ist HLA-DR restringiert 70
und von der Expression von Adhäsionsmolekülen abhängig
4.2.3 MBP spezifische T-Zellen zeigen eine unterschiedliche 71
Zytotoxizität gegen Astrozyten, jedoch nicht gegen Monozyten
4.2.4 Immunmodulierende Eigenschaften der Astrozyten 74
4.3 Zytokinproduktion der T-Zellen ^6
4.4 Modulation des Zytokinspektrums MBP spezifischer T-Zell Linien 77
durch Pharmaka
4.5 Eigenschaften Herpesvirus saimiri (HVS) transformierter T-Zellen 80
5 ZUSAMMENFASSUNG 82
6 LITERATURVERZEICHNIS 85
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