Beeinflussung der Stickstoffmonoxid (NO)-Synthese in Endothelzellen durch Hypochlorit-modifizierte LDL:
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2001
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
VERWENDETE ABKUERZUNGEN 4
1. EINLEITUNG
_ 6
1.1. BEDEUTUNG DER ENDOTHELZELLEN 6
1.2. CHARAKTERISIERUNG VON STICKSTOFFINONOXID (NO) 7
1.3. BEDEUTUNG OXIDATIV MODIFIZIERTER LIPOPROTEINE 8
1.4. CHARAKTERISIERUNG HYPOCHLORIT-MODIFIZIERTER LDL 10
2. MATERIAL UND METHODEN
_12
2.1. MATERIAL 12
2.2. PRAEPARATION VON NABELSCHNURVENEN-ENDOTHELZELLEN 14
2.3. KULTIVIERUNG UND AUSSAAT VON ENDOTHELZELLEN 14
2.4. PRAEPARATION, MODIFIZIERUNG UND ZUSATZ DER LIPOPROTEINE ZU HUVEC 15
2.5. MARKIERUNG VON NLDL UND HOC1-LDL MIT 125INA 16
2.6. MARKIERUNG VON NLDL UND HOC1-LDL MIT [3H]-CHOLESTERYL-PALMITAT 17
2.7. BINDUNG, AUFNAHME UND ABBAU VON NLDL UND HOC1-LDL DURCH HUVEC 17
2.8. NACHWEIS VON MONO- UND OLIGONUKLEOSOMEN ALS MASS FUER APOPTOTISCHE
VERAENDERUNGEN IN HUVEC 20
2.9. TUNEL-FAERBUNG 21
2.10. GESAMTPROTEINGEHALT 22
2.11. THYMIDINEINBAU 23
2.12. AMINOSAEUREEINBAU 23
2.13. BESTIMMUNG DER CITRULLINSYNTHESE IN INTAKTEN HUVEC 24
2.14. BESTIMMUNG DER CGMP-SYNTHESE IN INTAKTEN HUVEC 25
2.15. [
14C] ARGININ-AULHAHME IN ENDOTHELZELLEN 26
2.16. BESTIMMUNG DER CITRUILINBILDUNG IM ZELLHOMOGENAT 27
2.17. SDS-GELELEKTROPHORESE UND WESTERN BLOT 28
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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INHALTSVERZEICHNIS
2.18. METABOLISCHE MARKIERUNG UND IMMUNPRAEZIPITATION DER ECNOS 30
2.19. IMMUNHISTOCHEMIE 31
2.20. STATISTIK 32
3, ERGEBNISSE
_34
3.1. BINDUNG, AUFNAHME UND ABBAU VON NLDL UND HOC1-LDL 34
3.2. UNTERSUCHUNGEN ZUR INDUKTION VON APOPTOSE DURCH NLDL UND HOC1-LDL
IN
ENDOTHELZELLEN 39
3.3. BEEINFLUSSUNG VON ZELLWACHSTUM UND PROLIFERATION DURCH NLDL UND
HOC1-LDL 41
3.4. EFFEKTE VON NLDL UND HOC1-LDL AUF DIE AGONIST-STIMULIERTE
CITRULLIN-SYNTHESE
IN ENDOTHELZELLEN 42
3.5. EFFEKTE VON NLDL UND HOC1-LDL AUF DIE AGONIST-STIMULIERTE
CGMP-SYNTHESE
IN ENDOTHELZELLEN 45
3.6. BEEINFLUSSUNG DES ARGININTRANSPORTES IN ENDOTHELZELLEN DURCH NLDL
UND
HOC1-LDL 46
3.7. EFFEKTE VON NLDL UND HOC1-LDL AUF DIE CITRULLINBILDUNG IM
ZELLHOMOGENAT 47
3.8. EFFEKTE VON NLDL UND HOC1-LDL AUF DIE NO-SYNTHASE-EXPRESSION
IN ENDOTHELZELLEN 49
3.9. EFFEKTE VON NLDL UND HOC1-LDL AUF DIE DE-NOVO-SYNTHESE DER
NO-SYNTHASE IN ENDOTHELZELLEN 50
3.10. EFFEKTE VON NLDL UND HOC1-LDL AUF DIE VERTEILUNG DER ECNOS IN
ENDOTHELZELLEN 51
4. DISKUSSION
_ 54
4.1. A
UFNAHME VON HOC1-LDL DURCH ENDOTHELZELLEN 54
4.2. HOCL-LDL-EFIFEKTE AUF APOPTOSE, PROLIFERATION UND
GESAMTPROTEINSYNTHESE
IN ENDOTHELZELLEN 56
4.3. DIE BEEINFLUSSSUNG DER ENDOTHELIALEN NO-BILDUNG DURCH HOC1-LDL 58
4.4. PATHOPHYSIOLOGISCHE BEDEUTUNG DER ECNOS-HEMMUNG DURCH HOC1-LDL 66
INHALTSVERZEICHNIS
70
72
5 ZUSAMMENFASSUNG
6 LITERATUR |
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