Massenspektrometrische Primärstrukturbestimmung natürlicher Varianten des Hepatitis-B-Oberflächenantigens:
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INHALTSVERZEICHNIS
DANKSAGUNG
INHALTSVERZEICHNIS
.
I
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
III
ZUSAMMENFASSUNG
.
IV
1
EINFUEHRUNG
.
1
2
GRUNDLAGEN
.
3
2.1
PROBENPRAEPARATION
.
4
2.2
ENZYMATISCHE
VERDAUUNGEN
.
5
2.3
MASSENSPEKTROMETRIE
.
6
2.4
DATENBANKANALYSE
DER
MASSENSPEKTROMETRISCHEN
DATEN
.
8
2.5
DER
HEPATITIS
B-VIRUS
.
9
3
MATERIAL
UND
METHODEN
.
14
3.1
HBSAG-MATERIAL
.
14
3.2
SDS-PAGE-GELELEKTROPHORESE
.
15
3.3
ENZYMATISCHE
VERDAUUNGEN
.
20
3.3.1
PROTEOLYSE
DES
HBSAG
.
20
3.3.2
ENZYMATISCHE
ABSPALTUNG
DER
N-GLYCANE
.
22
3.4
EXTRAKTION DER
LIPIDE
DES
HBSAG
.
23
3.5
MALDI
UND
PSD-MALDI-MASSENSPEKTROMETRIE
.
24
3.6
AUSWERTUNG
DER
MASSENSPEKTREN
.
26
3.7
BENUTZUNG
WEITERER
COMPUTERVERFAHREN
.
28
3.8
PSD-ANALYTIK
.
28
4
ERGEBNISSE
.
30
4.1
GEL
.
30
4.2
MALDI-MESSUNG
NATIVER
UND
REDUZIERTER
HBSAG-PROBEN
.
33
4.3
MALDI
UND
PSD-MALDI
MASSENSPEKTROMETRIE
DER
ENZYMATISCHEN
PROTEIN-VERDAUUNGEN
.
34
4.3.1
BM
HBSAG
SUBTYP
AD
.
34
4.3.1.1
TRYPTISCHER
VERDAU
VON
REDUZIERTEM
BM
HBSAG
SUBTYP
AD
IN
LOESUNG
.
34
4.3.1.1.1
ERGEBNISSE
DER
DATENBANKRECHERCHEN
.
36
4.3.1.1.2
PSD-ANALYSE
DES
MASSENSPEKTROMETRISCHEN
SIGNALS
BEI
M/Z
=
1209.6
U
.
38
4.3.1.2
MALDI-SPEKTRUM
DES
TRYPTISCHEN
IN-GEL-VERDAUS
VON
BM
SUBTYP
AD
.
42
4.3.1.2.1
ERGEBNISSE
DER
DATENBANKRECHERCHEN
DER
IN-GEL-VERDAUUNG
MIT
TRYPSIN
.
44
4.3.1.3
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
DER
TRYPTISCHEN
VERDAUUNGEN
DER
PROBE
BM
HBSAG
SUBTYP
AD
.
44
INHALTSVERZEICHNIS
4.3.2
BM
HBSAG
SUBTYP
AY
.
45
4.3.2.1
TRYPTISCHER
VERDAU
VON
REDUZIERTEM
BM
HBSAG
SUBTYP
AY
IN
LOESUNG
.
45
4.3.2.1.1
ERGEBNISSE
DER
DATENBANKRECHERCHEN
.
46
4.3.2.1.2
PSD-SPEKTRUM
VON
M/Z
=
1165.6
U
.
49
4.3.2.2
IN-GEL-VERDAU
VON
REDUZIERTEM
UND
GESCHUETZTEM
HBSAG
BM
SUBTYP
AY
UND
HPLC-TRENNUNG
DER
SPALTPEPTIDE
.
54
4.3.2.2.1
PSD-MALDI-SPEKTRUM
DES
PRECURSOR-IONS
MIT
M/Z
=
780.4
U
.
57
4.3.2.3
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
DER
TRYPTISCHEN
VERDAUREAKTIONEN
.
60
4.3.2.4
VERDAUUNG
VON
REDUZIERTEM
UND
GESCHUETZTEN
HBSAG
IM
GEL
MIT
CHYMOTRYPSIN
.
61
4.3.3
HBSAG
BTR-AD
.
62
4.3.3.1
TRYPTISCHER
VERDAU
VON
REDUZIERTEM
HBSAG
BTR-AD
IN
LOESUNG
.
62
4.3.3.1.1
ERGEBNISSE
DER
DATENBANKRECHERCHEN
.
63
4.3.3.2
VERDAUUNG
VON
REDUZIERTEM
BTR-AD-HBSAG
MIT
CHYMOTRYPSIN
IN
LOESUNG
.
66
4.3.3.2.1
ERGEBNISSE
DER
DATENBANKRECHERCHEN
.
68
4.3.3.3
CHYMOTRYPTISCHE
VERDAUUNG
VON
NATIVEM,
NICHT
REDUZIERTEM
BTR-AD
.
73
4.3.3.3.
1
ERGEBNISSE
DER
DATENBANKRECHERCHEN
.
75
4.3.3.4
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
DER
CHYMOTRYPTISCHEN
VERDAUREAKTIONEN
.
78
4.3.4
HBSAG
BTR-AY
.
79
4.3.4.1
TRYPTISCHER
VERDAU
VON
REDUZIERTEM
BTR-AY
IN
LOESUNG
.
79
4.3.4.1.2
ERGEBNISSE
DER
DATENBANKRECHERCHEN
.
79
4.3.4.2
VERDAUUNG
VON
REDUZIERTEM
BTR-AD-HBSAG
MIT
CHYMOTRYPSIN
IN
LOESUNG
.
84
4.3.4.2.1
ERGEBNISSE
DER
DATENBANKRECHERCHEN
.
86
4.3.4.3
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
AUS
DEN
ENZYMATISCHEN
VERDAUUNGEN
.
88
4.3.5
YYHOESEL
"
-HBSAG
.
89
4.3.5.1
TRYPTISCHER
VERDAU
VON
REDUZIERTEM
YYHOESEL
"
-HBSAG
IN
LOESUNG
.
89
4.3.5.1.1
ERGEBNISSE
DER
DATENBANKRECHERCHEN
.
91
4.3.5.1.2
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
DES
TRYPTISCHEN
VERDAUS
.
99
4.3.5.2
CHYMOTRYPTISCHER
VERDAU
DES
REDUZIERTEN
YYHOESEL"
-HBSAG
.
100
4.3.5.2.1
ERGEBNISSE
DER
DATENBANKRECHERCHEN
.
102
4.3.5.2.2
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
DES
CHYMOTRYPTISCHEN
VERDAUS
.
106
4.3.5.3
ZUSAMMENFASSUNG
UND
KOINZIDENZPRUEFUNG
ZUM
YYHOESEL"
-HBSAG
.
106
4.3.6
TRYPTISCHE
VERDAUUNG
VON
NATIVEN
HBSAG-PROBEN
.
109
4.3.7
SIGNIFIKANZ
DER
TRYPTISCHEN
SPALTPEPTIDE
DES
HBSAG
.
112
4.4
ANALYTIK
DER
N-GLYCANE
DES
HBSAG
.
119
4.4.1
STRUKTURBESTIMMUNG
DER
OLIGOSACCHARIDE
DES
HBSAG
.
119
4.4.1.1
VERDAU
MIT
N-GLYCOSIDASE
F
IN
LOESUNG
.
119
4.4.1.2
IN-GEL-VERDAU
MIT
N-GLYCOSIDASE
F
.
126
4.4.2
PSD-ANALYTIK
DER
OLIGOSACCHARIDE
DES
HBSAG
.
127
4.4.3
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
DER
OLIGOSACCHARID-ANALYSE
DES
HBSAG
.
135
4.5
LIPIDE
DES
HBSAG
.
138
5.
ZUSAMMENFASSUNG
UND
DISKUSSION
.
140
5.1
METHODENENTWICKLUNG
140
5.2
ANALYTISCHE
ERGEBNISSE
141
5.3
AUSBLICK
150
6.
LITERATURVERZEICHNIS
.
151
LEBENSLAUF.
.
157 |
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