Antigen-unabhängige Suppression der IgE-Immunantwort gegen Phospholipase A2 aus Bienengift durch antigenspezifische monoklonale IgG-Antikörper maternaler Herkunft:
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2000
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
1.1
FRAGESTELLUNG
DER
ARBEIT
.
6
2
MATERIAL
UND
METHODEN
.
7
2.1
MATERIAL
.
7
2.1.1
CHEMIKALIEN
UND
VERBRAUCHSMATERIAL
.
7
2.1.2
PUFFER
.
7
2.1.3
ZELLKULTUR
.
8
2.1.3.1
MURINE
ZELLINIEN
.
8
2
1.3
2
MEDIEN
.
8
2.1.4
VERSUCHSTIERE
.
9
2.1.5
ANTIGEN
.
9
2.1.6
ANTIKOERPER
UND
SUBSTRATE
.
9
2.1.7
GERAETE
.
10
2.1.8
GRAPHISCHE
AUSWERTUNG
.
10
2.2
METHODEN
.
10
2.2
1
HERSTELLUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
GEGEN
PHOSPHOLIPASE
A
2
.
10
2.2.1.1
ZELLINIEN
.
11
2.2.1.2
ZELLKULTUR
.
12
2.2.1
3
IMMUNISIERUNG
ZUR
HYBRIDOMPRODUKTION
.
12
2.2.1.4
PRAEPARATION
DER
MILZZELLEN
.
12
2.2.1.5
ADOPTIVER
MILZTRANSFER
.
13
2.2.1.6
ZELLFUSION
.
13
2.2.1.7
PROPAGIEREN
DER
HYBRIDOME
.
14
2.2.1.8
KLONIEREN
DER
HYBRIDOME
.
15
2
2.1.9
PERITONEALMAKROPHAGENALS
'
/EECFER
"-ZELLEN.
15
2.2.1.10
EINFRIEREN
VON
ZELLEN
.
15
2.2.2
NACHWEIS
VON
ANTIKOERPERN
IN
HYBRIDOMKULTURUEBERSTAENDEN
.
16
2.2.3
ISOTYPISIERUNG
DER
HYBRIDOMANTIKOERPER
.
16
2.2.4
REINIGUNG
UND
KONZENTRATION
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
.
17
2.2.4.1
REINIGUNG
VON
IGGIB
MIT
RPROTEIN-A-SEPHAROSE-SAEULEN
.
17
2.2.4
2
REINIGUNG
VON
IGGI
MIT
RPROTEIN-G-SEPHAROSE-SAEULEN
.
17
2
2.5
MESSUNG
PLA
2
SPEZIFISCHER
ANTIKOERPER
NACH
IMMUNISIERUNG
.
.
18
2.2.5
1
MESSUNG
PLA
2
SPEZIFISCHER
IGE-ANTIKOERPER
.
18
2.2.5.2
MESSUNG
PLA
2
SPEZIFISCHER
IGG
UND
IGM-ANTIKOERPER
.
20
3
ERGEBNISSE
.
21
3.1
IMMUNISIERUNG
VON
CBA/J-MAEUSEN
ZUR
HYBRIDOMHERSTELLUNG
.
21
3.2
HERSTELLUNG
VON
HYBRIDOMEN
DURCH
ZELLFUSION
.
21
3.3
ISOTYPISIERUNG
DER
ANTIKOERPER
GEGEN
PLA
2
.
23
3.4
BESTIMMUNG
DER
PRODUKTIONSLEISTUNG
DER
HYBRIDOME
.
24
3.5
VERGLEICH
DER
IMMUNANTWORT
GEGEN
PHOSPHOLIPASE
A
2
NACH
IMMUNISIERUNG
MIT
MINIMALER
UND
HOHER
DOSIS
.
26
3.6
UEBERTRAGUNG
VON
PHOSPHOLIPASE
A
2
-ANTIKOERPERN
DER
MUTTERTIERE
AUF
IHRE
NACHKOMMEN
.
27
3.7
PERSISTENZ
MATEMALER
ANTIKOERPER
NACH
UEBERTRAGUNG
ALLEIN
MIT
DEM
KOLOSTRUM
NACH
DER
GEBURT
.
28
3.8
EINFLUSS
DER
MATEMALEN
IMMUNISIERUNG
AUF
DIE
IGE-IMMUNANTWORT
GEGEN
PHOSPHOLIPASE
A
2
IN
CBA/J-JUNGTIEREN
.
29
3.9
MODULATION
DER
IMMUNANTWORT
GEGEN
PHOSPHOLIPASE
A
2
DURCH
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
MATEMALER
HERKUNFT
.
32
3.9.1
AUFNAHME
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
IN
DEN
BLUTKREISLAUF
NACH
INTRAPERITONEALER
INJEKTION
.
32
3.9.2
PERSISTENZ
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
IN
CBA/J-MAEUSEN
.
32
3.9.3
UEBERTRAGUNG
VON
PHOSPHOLIPASE
A
2
-SPEZIFISCHEN
MONOKLONALEN
ANTIKOERPERN
VON
CBA/J-MUTTERTIEREN
AUF
DIE
NACHKOMMEN
.
33
3.9.4
MODULATION
DER
IMMUNANTWORT
GEGEN
PHOSPHOLIPASE
A
2
DURCH
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
MATEMALER
HERKUNFT
.
34
3.9.5
KONTROLLE
DER
UEBERTRAGUNG
VON
ANTIGEN
ODER
ANTIGEN-ANTIKOERPERKOMPLEXEN
VOM
MUTTERTIER
AUF
DIE
NACHKOMMEN
.
37
4
DISKUSSION
.
38
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
46
6
LITERATURVERZEICHNIS
.
48
DANKSAGUNG
.
57
LEBENSLAUF
.
58 |
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