Einfluss unterschiedlicher Induktoren und oxidierter Lipoproteine auf die Bildung von Superoxidanionen und Eikosanoiden in prämonozytären MM6-Zellen:
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1.
EINLEITUNG
1
2.
STAND
DER
FORSCHUNG
2.1.
ATHEROGENESE
2.1.1.
PATHOPHYSIOLOGIE
DER
ARTERIOSKLEROTISCHEN
LAESION
2
2.1.2
OXIDIERTE
LIPOPROTEINE
NIEDRIGER
DICHTE
3
2.2.
MONOZYTEN/MAKROPHAGEN
6
2.2.1.
MONOZYTOIDE
ZELLEN
IN
KULTUR
6
2.2.2.
DIFFERENZIERUNG
MONOZYTOIDER
ZELLEN
7
2.2.3.
BILDUNG
VON
SAUERSTOFFRADIKALEN
DURCH
DIE
NADPH-OXIDASE
11
2.3.
EIKOSANOIDSYSTEM
2.3.1.
GRUNDLAGEN
13
2.3.2.
CYCLOOXYGENASEN
15
2.3.3.
5-LIPOXYGENASE
17
2.3.4.
12-LIPOXYGENASE,
1
5-LIPOXYGENASE
UND
CYTOCHROM
P
450-MONO
19
OXYGENASE
2.3.5.
BIOLOGISCHE
FUNKTION
DER
EIKOSANOIDE
20
3.
FRAGESTELLUNG
UND
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
22
4.
MATERIAL
UND
METHODEN
4.1.
MATERIAL
23
4.2.
ZELLKULTUR
23
4.3.
STIMULATION
MIT
14
C-AA
UND
EXTRAKTION
DER
RADIOAKTIVEN
AA-METABOLITE
24
4.4.
ANALYSE
DES
EIKOSANOIDSPEKTRUMS
MIT
REVERSED-PHASE-HOCHDRUCKFLUES
25
SIGKEITS-CHROMATOGRAPHIE
(RP-HPLC)
4.5.
MESSUNG
DER
BILDUNG
VON
SUPEROXIDANIONEN
(O
2
~)
25
4.6.
BESTIMMUNG
VON
LTB
4
MITTELS
RADIO-IMMUN-ASSAY
(RIA)
26
4.7.
ANALYSE
DER
MRNA-AKKUMULATION
FUER
DIE
5-LO,
FLAP
UND
GAPDH
27
MITTELS
NORTHERN
BLOT
II
CO
F
I
O
CO
CO
YY0
CO
CO
4.8.
PRAEPARATION
VON
LDL
AUS
SPENDERPLASMA
UND
OXIDATION
VON
LDL
28
5.
ERGEBNISSE
5.1.
EINFLUSS
DER
DIFFERENZIERUNGSREIZE
AUF
WACHSTUM
UND
MORPHOLOGIE
DER
30
ZELLEN
5.2.
SYNTHESE
VON
SUPEROXIDANIONEN
NACH
STIMULATION
MIT
PMA
5.3.
ANALYSE
[
14
C]-MARKIERTER
EIKOSANOIDE
MIT
RP-HPLC
5.3.1.
EIKOSANOIDSPEKTRUM
DER
MM6-NC-ZELLEN
5.3.2.
EIKOSANOIDSPEKTRUM
DER
MM6-SR-ZELLEN
5.4.
QUANTITATIVE
BESTIMMUNG
DER
LTB
4
-SYNTHESE
MITTELS
RIA
5.4.1.
LTB
4
-SYNTHESE
IN
MM6-NC-ZELLEN
5.4.2.
LTB
4
-SYNTHESE
IN
MM6-SR-ZELLEN
5.5.
ANALYSE
DER
MRNA-AKKUMULATION
DER
GENE
FUER
DIE
5-LIPOXYGENASE
UND
DAS
5-LO-AKTIVIERENDE
PROTEIN
(FLAP)
5.5.1
MM6-NC-ZELLEN
48
5.5.2.
MM6-SR-ZELLEN
49
6.
DISKUSSION
6.1.
EINFLUSS
DER
BEHANDLUNG
MIT
DIFFERENZIERUNGS-INDUKTOREN
UND
OXLDL
AUF
52
DIE
ZELLPROLIFERATION,
ZELLMORPHOLOGIE
UND
BILDUNG
VON
SUPEROXIDANIONEN
6.2.
AUSWIRKUNGEN
DER
BEHANDLUNG
AUF
DAS
EIKOSANOIDSPEKTRUM
6.2.1.
AUSWIRKUNGEN
DER
BEHANDLUNG
AUF
DIE
AKTIVITAET
DER
CYCLOOXYGENASE
54
6.2.2.
AUSWIRKUNGEN
DER
BEHANDLUNG
AUF
DIE
AKTIVITAET
UND
EXPRESSION
DER
57
5-LIPOXYGENASE
SOWIE
DES
5-LO-AKTIVIERENDEN
PROTEINS
7.
ZUSAMMENFASSUNG
61
8.
LITERATURVERZEICHNIS
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