Pharmakologische und immunhistologische Untersuchungen zur Bedeutung striataler Fehlfunktionen des GABAergen Systems in einem genetischen Tiermodell für die primäre paroxysmale Dystonie:
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| adam_text | Titel: Pharmakologische und immunhistologische Untersuchungen zur Bedeutung striataler Fehlfunktionen des G
Autor: Hamann, Melanie
Jahr: 2000
INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 7
2. LITERATURÜBERSICHT 10
2.1. Die Basalganglien - Anatomie und Funktionen zur Motorik 10
2.2. Neuronentypen im Striatum 15
2.2.1. Striatale Projektionsneurone 15
2.2.2. Striatale Interneurone 16
2.3. Das GABAerge System 17
2.3.1, Bedeutung 17
2.3.2. GABA-Stoffwechsel 18
2.3.3. GABA-Rezeptoren 19
2.3.3.1. Der GABAA-Rezeptor 20
2.3.3.1.1. Die GABA-Bindungsstelle 22
2.3.3.1.2. Die Benzodiazepin-Bindungsstelle 22
2.3.3.1.3. Die Pikrotoxin-Bindungsstelle 23
2.3.3.1.4. Die Barbiturat-Bindungsstelle 23
2.3.3.1.5. Weitere Bindungsstellen 23
2.3.3.2. Der GABAb- und der GABAc-Rezeptor 24
2.4. Dystönien 25
2.4.1. Definition und Bedeutung 25
2.4.2. Klassifikation und Genetik der Dystönien 26
2.4.3. Pharmakotherapie primärer Dystönien 30
2.4.4. Pathophysiologie primärer Dystönien 32
2.4.5. Tiermodelle für Dystönien 34
2.4.5.1. Maus-Mutanten 35
2.4.5.2. Die t#-Ratte 36
2.4.5.3. Der df^-Hamster 37
2.4.5.3.1. Klinisches Erscheinungsbild 38
2.4.5.3.2. Neuropathoiogische Untersuchungen 40
2.4.5.3.3. Untersuchungen des HimstoffWechsete und
elektrophysiofogische Studien 40
2.4.5.3.4. Neurochemische und prtarmakotogische Untersuchungen 41
2.5. ¦ Fragestellungen der vorliegenden Arbeit und Auswahl der
verwendeten Substanzen 45
2.5.1. Striatale und systemische Manipulationen des GABAA-Rezeptors 45
2.5.2. Markierung striataler GABAerger Intemeurone 49
3. EIGENE UNTERSUCHUNGEN 52
3.1. Material 52
3.1.1. Versuchstiere 52
3.1.2. Haltung und Fütterung 52
3.1.3. Verwendete Substanzen 53
3.2. Methodik 56
3.2.1. Induktion und Beurteilung der dystonen Bewegungsstörungen 56
3.2.2. Stereotaktische Implantationen der Führungskanülen 58
3.2.3. Phartnakologische Untersuchungen 60
3.2.3.1. Systemische Applikationen 60
3.2.3.2. Striatale Mikroinjektionen 62
3.2.3.2.1. Mikroinjektionstechnik 62
3.2.3.2.2. Histologische Untersuchungen: Lokalisation der Führungskanülen 64
3.2.4. Untersuchung Parvalbumin-reaktiver Interneurone im Striatum 65
3.2.4.1. Vorversuche: Eignung des Antikörpers und
Auswahl der Antikörperkonzentration 65
3.2.4.2. Parvalbumin-Immunhistochemie 66
3.2.4.3. Zählung der Parvalbumin-reaktiven (PVr) Interneurone im Striatum 68
3.2.5. Statistische Versuchsauswertung 71
3.2.5.1. Systemische und lokale striatale Untersuchungen 71
3.2.5.2. Immunhistochemische Untersuchungen 71
4. ERGEBNISSE 73
4.1. Pharmakologische Untersuchungen 73
4.1.1. Manipulationen der GABA-Bindungsstelle des GABAA-Rezeptors 75
4.1.1.1. Muscimol - systemische Applikation 75
4.1.1.2. Muscimol - lokale striatale Applikation 76
4.1.1.3. Bicucullin - systemische Applikation 83
4.1.1.4. Bicucullin - lokale striatale Applikation 83
4.1.2. Manipulationen der Benzodiazepin-Bindungsstelle des
GABAA-Rezeptors 87
4.1.2.1. Flurazepam - systemische Applikation 87
4.1.2.2. Flurazepam - lokale striatale Applikation 88
4.1.2.3. Flumazenil - systemische Applikation 91
4.1.2.4. Flumazenil - lokale striatale Applikation 92
4.1.3. Manipulationen der Barbiturat-Bindungsstelle des
GABAA-Rezeptors 95
4.1.3.1. Phenobarbital - systemische Applikation 95
4.1.3.2. Phenobarbital - lokale striatale Applikation 95
4.1.4. Manipulationen der Pikrotoxin-Bindungsstelle des
GABAA-Rezeptors 99
4.1.4.1. Pentylentetrazol (PTZ) - systemische Applikation 99
4.1.4.2. Pentylentetrazol - lokale striatale Applikation 99
4.1.5. Manipulationen durch y-Aminobuttersäure (GABA) 102
4.2. Immunhistochemische Untersuchungen Parvalbumin-reaktiver
Neurone im Striatum 104
4.2.1. Parvalbumin-Immunreaktivität und Morphologie striataler
Parvalbumin-immunreakttver (PVr) Intemeurone 104
4.2.2. Absolute Anzah! der Parvalbumin-immunreaktiven Intemeurone
im Striatum 110
4.2.3. Körpergewicht und Volumina des Striatums der
untersuchten df*- und Kontrollhamster 115
4.2.4. Dichte der Parvalbumin-immunreaktiven Intemeurone im Striatum 117
5. DISKUSSION 120
5.1. Betrachtungen zur Methodik 120
5.1.1. Beurteilung und Induktion der Bewegungsstörungen 120
5.1.2. Striatale Applikationen 121
5.1.3. Immunhistochemische Untersuchungen 122
5.2. Betrachtung der Versuchsergebnisse 124
5.2.1. Pharmakologische Untersuchungen zur Bedeutung
striataler Fehtfunktionen 124
5.2.2. . Anzahl und Dichte Parvalbumin-reaktiver
Intemeurone im Striatum 130
5.3. Schlußbetrachtungen 135
6. ZUSAMMENFASSUNG 137
7. SUMMARY 139
8. LITERATURVERZEICHNIS 141
9. TABELLARISCHER ANHANG
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