Experimentelle Untersuchungen zur Charakterisierung der Aufnahmewege und Transportsysteme von H-3-L-Methionin in Lymphomzellen:
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1999
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INHALTSVERZEICHNIS
1
I
NHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
4
2
MATERIAL
UND
METHODEN
.
15
2.1
MATERIAL
.
15
2.1.1ZELLINIE
.
15
2.1.2
KULTURMEDIEN
UND
ZUSAETZE
.
15
2.1.3
AMINOSAEUREN
.
15
2.1.4
HEMMSUBSTANZEN
.
16
2.1.5
CHEMIKALIEN
.
16
2.1.6
RADIOAKTIVE
SUBSTANZEN
.
16
2.1.7ZYTOSTATIKA
.
16
2.1.8
ZUSAMMENSETZUNG
DER
KULTURMEDIEN
UND
VERWENDETEN
LOESUNGEN
.
17
2.1.9GERAETE
.
18
2.2
METHODEN
.
19
2.2.1
ARBEITEN
MIT
DER
ZELLKULTUR
.
19
2.2.2
ZELLKULTIVIERUNG
.
19
2.2.2.1
AUFTAUEN
VON
ZELLEN
.
19
2.2.2.2
MEDIUMWECHSEL
.
19
2.2.2.3
EINFRIEREN
VON
ZELLEN
.
20
2.2.3
VORBEREITUNG
DER
ZELLEN
FUER
DEN
VERSUCH
.
20
2.2.3.1
ZELLZAHLBESTIMMUNG
.
20
2.2.3.2
ANZUCHT
DER
ZELLEN
FUER
EINEN
VERSUCH
.
21
2.2.4
VERSUCHSDURCHFIIHRUNGEN
.
22
2.2.4.1
VERSUCHSABLAUF
DER
AUFHAHMEVERSUCHE
UNTER
AUFSTEIGENDEN
METHIONIN
KONZENTRATIONEN
IN
STANDARDKULTURMEDIUM
(RPM1
1640)
UND
UNTER
PHYSIOLOGI
SCHEN
BEDINGUNGEN
.
22
2.2.4.2
DURCHFUEHRUNG
DER
HEMMVERSUCHE
.
24
2
INHALTSVERZEICHNIS
2.2.4.2.1
BESTIMMUNG
DER
KONZENTRATIONSABHAENGIGEN
WIRKUNG
SPEZIFISCHER
TRANSPORTINHIBITOREN
AUF
DIE
METHIONINAUFNAHME
UNTER
STANDARDKULTURBE
DINGUNGEN
.
25
2.2.4.2.2
WIRKUNG
SPEZIFISCHER
TRANSPORTINHIBITOREN
AUF
DIE
METHIONIN
AUFNAHME
UNTER
PHYSIOLOGISCHEN
AMINOSAUREKONZENTRATIONEN
.
26
2.2.4.3
BEHANDLUNG
DER
ZELLEN
MIT
VINCRISTIN
.
28
2.2.4.4
AUSWERTUNG.
.
30
3
ERGEBNISSE
.
31
3.1
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
METHIONINTRANSPORT
.
31
3.1.1
METHIONINAUFHAHME
UNTER
STANDARDKULTURBEDINGUNGEN
(RPMI
1640)
.
31
3.1.1.1
AUFNAHME
VON
METHIONIN
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
VERSCHIEDENEN
METHIO
NINKONZENTRATIONEN
.
31
3.1.1.2
LINEWEAVER-BURK-DIAGRAMM
.
39
3.
1.2METHIONINAUFIIAHME
UNTER
KULTURBEDINGUNGEN
MIT
PHYSIOLOGISCHEN
AMINO
SAEUREKONZENTRATIONEN
.
42
3.1.2.1
AUFNAHME
VON
METHIONIN
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
VERSCHIEDENEN
METHIO
NINKONZENTRATIONEN.
BESTIMMUNG
DES
ANTEILS
DER
SAETTIGBAREN
AUFNAHME
AN
DER
GESAMTAUFNAHME
.
42
3.1.2.2
LINEWEAVER-BURK-DIAGRAMM
.
47
3.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
TRANSPORTWEGE
VON
METHIONIN
.
51
3.2.1
BESTIMMUNG
DER
KONZENTRATIONSABHAENGIGEN
WIRKUNG
SPEZIFISCHER
TRANS
PORTINHIBITOREN
AUF
DIE
METHIONINAUFHAHME
UNTER
STANDARDKULTURBEDINGUNGEN
(RPMI
1640)
.
51
3.2.1.
1BCH
.
52
3.2.1.2MEAIB
.
56
3.2.1.3
SERIN
+
MEAIB
.
58
3.2.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
TRANSPORTSYSTEME
L,
A
UND
ASC
IN
MEDIUM
MIT
PHY
SIOLOGISCHEN
AMINOSAEUREKONZENTRATIONEN
.
61
INHALTSVERZEICHNIS
3
3.3
EINFLUSS
DER
BEHANDLUNG
MIT
VINCRISTIN
AUF
DIE
METHIONINAUFNAHME
IN
MEDIUM
MIT
PHYSIOLOGISCHEN
AMINOSAEUREKONZENTRATIONEN
.
65
3.3.1
VERGLEICH
DER
AUFOAHMEKAPAZITAET
DER
BEHANDELTEN
ZELLEN
GEGENUEBER
EINER
KONTROLLGRUPPE
.
66
3.3.2LINEWEAVER-BURK-DIAGRAMM
.
73
4
DISKUSSION
.
76
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
86
6
LITERATURVERZEICHNIS
.
89
7
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
104
8
DANKSAGUNG
.
106 |
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