In-vitro-Kultivierung von vier digenen Trematoden des Nordsylter Wattenmeeres und deren Einfluß auf ihre Zwischenwirte:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
2000
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | 163, XVII S. Ill., graph. Darst. : 21 cm |
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| adam_text | Titel: In-vitro-Kultivierung von vier digenen Trematoden des Nordsylter Wattenmeeres und deren Einfluß auf
Autor: Hauswirth, Susanne
Jahr: 2000
Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung.......................................................................................................... 1
2 Literaturübersicht___.......4
2.1 Microphallus primas JÄGERSKIÖLD, 1909__________________________4
2.1.1 Systematik................................................................................................................................4
2.1.2 Morphologie............................................................................................................................4
2.1.3 Lebenszyklus.........................................................................................................................12
2.1.4 Wirte......................................................................................................................................13
2.2 llimasthla elongata (MEHLIS, 1831) und H. interrupta LOOS-FRANK, 1967-----17
2.2.1 Systematik..............................................................................................................................17
2.2.2 Morphologie..........................................................................................................................20
2.2.3 Lebenszyklus.........................................................................................................................26
2.2.4 Wirte......................................................................................................................................27
2.3 Renkola roscovüa STUNKARD, 1932_________________.____________________31
2.3.1 Systematik..............................................................................................................................31
2.3.2 Morphologie..........................................................................................................................31
2.3.3 Lebenszyklus.........................................................................................................................35
2.3.4 Wirte......................................................................................................................................36
3 Eigene Untersuchungen... 38
3.1 Material_________________38
3.1.1 Arbeitsplatz und Arbeitsgeräte..............................................................................................38
3.1.2 Tierisches Untersuchungsmaterial.........................................................................................40
3.1.2.1 Microphallus primas.....................................................................................................................40
3.1.2.2 Himasthla elongata und//, interrupta..........................................................................................41
3.1.2.3 Rmicola roscovüa.........................................................................................................................42
3.2 Methoden_______________________42
3.2.1 Microphallus primas..............................................................................................................43
3.2.1.1 Auffinden der Metacercarien.........................................................................................................43
3.2.1.2 Exzystation der Metacercarien...............................................................................,......................44
3.2.1.3 Kulturmedien.................................................................................................................................49
3.2.1.4 Kulturzusätze.................................................................................................................................50
3.2.1.5 Kulturbedingungen........................................................................................................................52
3.2.1.6 Hälterung der Zwischenwirte unter Laborbedingungen................................................................52
3.2.1.7 Experimentelle Infektion...............................................................................................................55
3.2.1.8 Vermessung von Hydrobia uhae..................................................................................................55
3.2.1.9 Vermessung von Carcinus maenas...............................................................................................56
3.2.1.10 Vermessung der Parasiten...........................................................................................................56
3.2.2 Himasthla elongata und H. interrupta...................................................................................57
3.2.2.1 Auffindender Metacercarien...........................................,.............................................................57
3.2.2.2 Exzystation der Metacercarien......................................................................................................60
3.2.2.3 Kulturmedien.................................................................................................................................61
3.2.2.4 Kulturzusätze.................................................................................................................................63
3.2.2.5 Kulturbedingungen........................................................................................................................67
3.2.2.6 Hälterung der Zwischenwirte unter Laborbedingungen................................................................67
3.2.3 Renicola roscmita.................................................................................................................67
3.2.3.1 Auffinden der Metacercadenzysten.............................................................„................................67
3.23.2 Exzystation der Metacercarien..................................................................._.................................68
3.2.3.3 Kulturmedien.................................................................................................................................68
3.2.3.4 Kultlirzusätze.................................................................................................................................68
3.2.3.5 Kulturbedingungen........................................................................................................................68
3.2.3.6 Hälterung der Zwischenwirte unter Laborbedingungen................................................................69
3.2.4 Statistische Methoden............................................................................................................69
4 Ergebnisse_________________________________________________70
4.1 Microphallus primas ¦¦—..—~.—~~.—.—¦¦¦¦................¦—............................. 70
4.1.1 Exzystationsfaktoren..............................................................................................................70
4.1.2 Entwicklung der Marita.....................................................................................................—79
4.1.3 Medien und Zusätze.......................................................................................................-.....-84
4.1.4/fydroiiau/vaeunddieCercarien.........................................................................................87
4.1.5 Carcinus maenas und die Metacercarien...............................................................................92
4.2 Himasthla elongata und H. interrupta--------------------------------------------------------102
4.2.1 Exzystationsfaktoren............................................................................................................102
4.2.2 Entwicklung der Marita.......................................................................................................103
4.2.3 Medien und Zusätze.............................................................................................................103
4.3 Renicolo roscovita ..................................................................................................... 110
4.3.1 Exzystationsfaktoren............................................................................................................110
4.3.2 Entwicklung der Marita.......................................................................................................110
4.3.3 Medien und Zusätze.............................................................................................................111
5 Diskussion................................................................................................... 112
5.1 Exzystationsfaktoren—...._...112
5.2 Entwicklung der Marita.......118
5.3 Medien und Zusätze___121
5.3.1 Entwicklung der Marita.......................................................................................................121
5.3.2 Zusätze.................................................................................................................................124
5.3.3 Medien.................................................................................................................................132
5.4 Die Wattschnecken.............................................................^......^.m.........UJ.„........... 135
5.5 Die Strandkrabben____________________138
6 Schlußfolgerung_. 143
7 Zusammenfassung.3.. 144
8 Summary__3 146
9 Literaturverzeichnis.....3..... 148
10 Anhang--------3--------164
Abbildungsverzeichnis
Abb. I: Körperoberfläche von Af. prmas.........................................................................................................5
ABB. 2: KÖRPEROBERFLÄCHE VON M. PRIMAS.........................................................................................................5
Abb. 3: REM-Cirrusaufnahmen von M. primas................................................................................................7
Abb. 4a: AdulterM. primas................................................................................................................................8
Abb. 4b: AdulterA/. prmas nachPrevot(1972b)...........................................................................................8
abb. 5:tochtersporozystevon*f. primas nach prevot (1972 b)...............................................................9
Abb. 6a: Cercarie von M. primas mit vergröbertem Stilett nach Prevot (1972b)...................................11
Abb. 6B: Fortbewegung einer Cercarie nach DEBLOCK ROSE (1965).................................................11
Abb. 7: Reife Metacercarien von M. primas im Mitteldarmgewbbe einer Krabbe..................................12
ABB. 8: ENTV/KKLUNGSZYKLÜS VON MICROPHALLUS PRIMAS SÄGERSK1ÖLD, 1909.........................................12
Abb. 9: Grundbauplan eines Mollusken:.......................................................................................................15
Abb. 10: Stachelbesatz am Kopf von H. elongata nach DIETZ (1910)......................................................18
ABB. llA: Al ULTEtf«M.S7JHjt-SPEZIES NACH BOTSCH (1974)............................................................................20
abb. 1 lb: adulte hlmasthla-sfezses................................................................................................................20
Abb. 12: mkacidium von Himasthla -Spezies................................................................................................20
Abb. 13: Mutterredie von Himasthla sp.........................................................................................................23
Abb. 14: Cercarie von H. interrvpta nach LOOS-FRANK (1967)................................................................24
Abb. 15: Ruhende Cercarie von Himasthla nach LOOS-FRANK (1967).....................................................25
Abb. 16: Metacercarie von H. elongata nach WERDING (1969)................................................................25
ABB. 17:ENTWKKLUNGSZYKLUSVON///MAS7HM£ICWOA7-/1(MEHLIS 1831) UND H. MTERRUPTA LOOS-
FRANK, 1967........................................................................................................................................26
Abb. 18: Bauplan einer Muschel.....................................................................................................................29
Abb. 19: Schlupfstadien einer maturen, echinostomiden Larve...............................................................30
Abb. 20: adulter Rehkola roscovtta, 50 Tage p.i.........................................................................................32
abb.21: Schwimmverhalten einer Cercarie von r. roscovita nach PREVOT BARTOLI (1978)......34
Abb. 22: Metacercarie von ä. roscovita nach WERDING (1969)...............................................................35
Abb. 23: Entwicklungszyklus von Renicola roscovita STUNKARD, 1932...............................................35
Abb. 24: Arbeitsplatz Mrr Binokular und Kaltlichtquelle, 2 Pinzetten, 2 Präpariernadeln, 2
Abdampf schalen und 3 Pipetten......................................................................................................38
Abb. 25: Karte des KöNKSHAFENS bei List auf Sylt, Nordsee....................................................................40
Abb. 26: Karte der Sylt-R0m0-Bucht...........................................................................................................42
Abb. 27: Metacercarien von M. primas im Gewebe des Hepatopancreas von Carcinvs maenas.............43
ABB. 28: ÜBER 5000 ABGESAMMELTE METACERCARffiN VON M. PRIMAS AUS EBJEM CARCINVS...........................44
ABB. 29 UND 30: HÄLTERUNG DER INFIZIERTEN HYDROBIEN...............................................................................53
ABB. 31: HÄLTERUNG DER INFIZIERTEN CARCINI..................................................................................................54
ABB. 32: MESSUNG DES SCHNECKENGEHÄUSES........................_..........................................................................56
Abb. 33: Messung des Carapax von C. maenas...............................................................................................56
Abb. 34: Geöffnete Herzmuschel nach Entfernen der beiden Schalen...................................................58
Abb. 35: Metacercarien von ff. elongata und//, continva.........................................................................59
Abb. 36: Metacercarien von H. interrvpta...........................................................................-.......................59
Abb 37: Variationen der Ansätze zur Kultivierung von Himasthla spp. in Dulbecco........................65
Abb. 38 : Variationen der Ansätze zur Kultivierung von Himasthla spp. m Medium M199.................66
Abb. 39: MrrrLERE Schlupfraten von M. primas bei unterschiedlicher pH-Wert-Einstellung der
Stammlösung......................................................................................................................................72
Abb. 40: Schlupfraten der Metacercarien von M. primas.........................................................................73
abb. 41: aufgefaserte hülle einer vier tage alten metacercarie von m. primas................................75
Abb. 42: Mittlere Schlupf- und Sterberate (Abfall der Kurve) bei Anwendung verschiedener
Typsinarten.........................................................................................................................................76
Abb. 43: Mittlere Schlupf- und Sterberaten von M. prwms-Metacercarien bei Anwendung von
Thermolysin unterschiedlicher Konzentration.........................................................................77
Abb. 44: MnTLERE Schlupf- und Sterberaten von M. w/mas-Metacercarien bei Anwendung von
Thermolysin.........................................................................................................................................77
Abb. 45: Leere Zystenhüllen von M. primas..................................................................................................78
Abb. 46: M. primas nach dem Schlupf.............................................................................................................79
ABB. 47: M. PRIMAS, 5 HALT.................................................................................................................................80
Abb. 4$-.M. maus vor der Eiablage, 45 Stunden alt..................................................................................80
Abb. 49: M. / /MM-S bei der Eiablage, 48 Stunden alt...................................................................................81
ABB. 50: ABGESTORBENEM. PRIMAS IN DER TYPISCHEN „LÖFFELSTELLUNG ......................................................81
ABB. 51AUNDB: MITTLERE LÄNGEN- UND BREITEN VERHÄLTNISSE VON M. PRIMAS..........................................82
Abb. 52: Bauchsaugnapf vom A/. primas zur Darstellung der Mebbegrenzuno......................................83
Abb. 53: Mittlerer Durchmesser von Mund- und Bauchsaugnapf von M. primas).................................83
Abb. 54: Oberlebensspanne adulter M. primas in verschiedenen Zuckerlösungen ohne täglichen
Wasserwechsel...................................................................................................................................84
Abb. 55: Oberlebensspanne adulter M. primas in verschiedenen Zuckerlösungen mit täglichem
Wasserwechsel
Abb. 56:EiGELEGEVON*f. primas.......................................................................................................................86
Abb. 57:CercarjevonM. primas......................................................................................................................92
Abb. 58: Zunahme der durchschnittlichen Carapaxgröbe bei C. maenas.................................................94
Abb. 59: Zunahme der durchschnittlichen Länge der Häutungsintervalle bei C................................94
Abb. 60: Überlebensdauer der Krabben und zugesetzte Cercarenmenge.............................................96
ABB. 61:C4ÄC;WraGRÖßEUNDCERCARIENMENGE...............................................................................................96
Abb. 62: Gröbenzunahme der Metacercarienhüllen..................................................................................97
Abb. 63: Gröbenzunahme des Innendurchmessers in der sich anbildenden Metacercarienzysten. ... 98
Abb. 64: Mesocercarie von M. primas, 8 Tage p.i...........................................................................................99
Abb. 65: Kleine und grobe Mesocercarie von M. primas, 10. Tag p.i..........................................................99
Abb. 66: Beginn der Einkapselung von M hj/ams-Mesocercarien...........................................................100
Abb. 67: Eingekapselte Mesocercarie - Bildausschnitt von Abb. 64,8. Tag p.i...................................100
Abb. 68: Metacercarien von M. primas, 11. Tag p.i......................................................................................101
Abb. 69: Zwei Metacercarien und eine Mesocercarie, 12. Tag p.i...........................................................101
abb. 70: grö8envergleich zwischen einer reifen ( 100 tage alten) und zwei 13 tage alten m.
pr/ams-Metacercarien......................................................................................................................101
Abb. 71: Metacercarien von M. primas am 14. Tag p.i.................................................................................102
Abb. 72: Mittlere pH-Wertveränderungen in den reinen Medien Dl, D2 und D3................................104
Abb. 73: Mittlere pH-Wertveränderungen der Mrr Stammlösung (2 L: 1 M) im Verhältnis 1:1
Gemischten Medien Dl, D2 und D3.................................................................................................104
Abb. 74: Mittlere pH-Wertveränderungen der mit Stammlösung (2 L: 1 M) im Verhältnis 1:4
gembchtenMedienD1,D2undD3..................................................................................................104
Abb. 75: Eiablage innerhalb der Zyste........................................................................................................104
Abb. 76: Entwicklungsstadien von Echinoparyphwm sesratvm in Enten...............................................122
Abb. 77: die im Versuchsteil verwendeten Zucker und ihre chemische Strukturformel.................126
Abb. 78: Darstellung der Larvenstadien von Profiucolus botulus.....................................................142
Tabellenverzeichnis
TAB. 1: KOPFSTACHELMABEVONff. BfTERRUPTA UND H. ELONCATA NACH LOOS-FRANK (1967).....................19
TAB. 2: UMRECHUNGSFAKTOREN FÜR BESTIMMTE MIKROSKOPISCHE VERGRÖßERUNGEN BEI DER ARBEIT MÜ-
dem schrauben-okular-mlkrometer................................................................................................57
Tab. 3: Modifiziertes ExzystationsrezeptnachHOWELL (1968) für Himasthia spp.............................60
Tab. 4: Abkürzungen für Medien zur Kultivierung von Himasthla spp..................................................66
tab. 5: angabe des tages, an dem die maximale, kumulative schlupfrate (%) erreicht wurde........74
tab. 6: mittlere längen- und brertenverhältnlsse von metacercarien in jim.....................................74
tab. 7: infektionswoche und ausscheidungshäufigkerr bei experimentell infizierten h. vlvae........88
Tab. 8: Gesamtmenge an ausgestobenen Cercarien.....................................................................................90
Tab. 9: Temperaturveränderungen zur Aktivierung der ersten Cercarienausscheidung bei H.
vlvae)......................................................................................................................................................91
Tab. 10: Carcinus maenas: Angabe der Menge abgezählter Cercarien und die Anzahl der
wiedergefundenen Metacercaren mit Verhältnisangabe.........................................................95
Tab. 11: p-Werte für den Vergleich zwischen der Anzahl der im Dulbecco-medium überlebenden
Trematoden bei Zugabe verschiedener Zusätze für H. interrupta..........................................106
Tab. 12: p-Werte für den Vergleich zwischen der Anzahl der imDulbecco-Medium überlebenden
Trematoden bei Zugabe verschiedener Zusätze für H. elohgata.............................................106
TAB. 13: P-WERTE FÜR DEN VERGLEICH ZWISCHEN DER ANZAHL DER IM MEDIUM M199 ÜBERLEBENDEN
Trematoden bei Zugabe verschiedener Zusätze für H. uoerrvpta..........................................108
Tab. 14: p-Werte für den Vergleich zwischen der Anzahl der im Medium M199 überlebenden
Trematoden bei Zugabe verschiedener Zusätze für ff. elongata............................................106
Tab. 15: Wandaufbau einer Metacercarie von F. hepatka nach DKON( 1965)...................................115
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