Molekulargenetik der Temperaturwahrnehmung und Thermonozizeption im Modellorganismus Caenorhabditis elegans:
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München
Diss.-Verl. NG-Kopierladen
2000
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INHALTSVERZEICHNIS
ZUSAMMENFASSUNG
.
1
1
EINLEITUNG
.
2
1.1
NOZIZEPTION
UND
SCHMERZ
.
2
1.2
TIERMODELLE
IN
DER
SCHMERZFORSCHUNG
.
2
1.3
DER
FADENWURM
C.
ELEGANS
ALS
BIOLOGISCHER
MODELLORGANISMUS
.
3
1.4
DAS
NERVENSYSTEM
VON
C.
ELEGANS
.
6
1.5
TEMPERATURWAHMEHMUNG
IN
C.
ELEGANS
.
8
1.6
PRESENILINE
IN
C.
ELEGANS
.
8
2
MATERIAL
UND
METHODEN
.
10
2.1
CHEMIKALIEN
.
10
2.2
GERAETE
.
10
2.3
HILFSMITTEL
.
11
2.4
C.
ELEGANS
UND
BAKTERIENSTAEMME
UND
PLASMIDE
.
11
2.4.1
VERWENDETE
C.
ELEGANS
STAEMME
.
11
2.4.2
C.
ELEGANS
STAEMME
FUER
LASEROPERATIONEN
.
16
2.4.3
KONSTRUIERTE
C.
ELEGANS
STAEMME
.
16
2.4.4
BAKTERIENSTAEMME
.
17
2.5
VERWENDETE
UND
KONSTRUIERTE
PLASMIDE
.
18
2.6
MEDIEN,
LOESUNGEN
UND
PUFFER
.
18
2.6.1
BAKTERIENNAEHRMEDIEN,
LOESUNGEN
UND
PUFFER
.
18
2.6.2
PUFFER
UND
LOESUNGEN
FUER
DIE GELELEKTROPHORESE
.
19
2.6.3
C.
ELEGANS
MEDIEN,
LOESUNGEN
UND
PUFFER
.
19
2.6.4
ALLGEMEINE,
BESCHRIEBENE
METHODEN
.
19
2.7
KULTIVIERUNG
VON
C.
ELEGANS
.
20
2.7.1
ANZUCHT
VON
C.
ELEGANS
.
20
2.7.2
REINIGUNG
.
20
2.7.3
EINFRIEREN/
AUFTAUEN
.
20
2.7.4
ISOLIERUNG
VON
DAUER
LARVEN
.
21
2.8
GENETISCHE
METHODEN
.
21
2.8.1
KREUZUNGEN
.
21
2.8.2
TRANSFORMATION
VON
C.
ELEGANS
.
21
2.8.3
INTEGRATION
EXTRACHROMOSOMALER
ELEMENTE
DURCH
ROENTGENSTRAHLEN.
22
2.9
PHARMAKOLOGISCHE
ANALYSEN
.
22
2.10
FLUORESZENZFAERBUNG
DER
AMPHID
UND
PHASMIDNEURONEN
.
23
2.11
LASERMIKROOPERATIONEN
.
24
2.12
VERHALTENSANALYSEN
.
25
2.12.1
TAV
ANALYSEN
.
25
2.12.2
THERMOTAXIS
ANALYSE
EINZELNER
TIERE
.
25
2.12.3
MECHANOPERZEPTION
.
26
2.12.4
RUECKZUGSREFLEX
BEI
BERUEHRUNG
DES
ANTERIOREN
KOERPERENDES
.
26
3
ERGEBNISSE
.
27
3.1
UNTERSUCHUNG
DER
HITZEWAHMEHMUNG
IN
C.
ELEGANS
.
27
3.1.1
IDENTIFIKATION
SENSITIVER
KOERPERREGIONEN
.
28
3.1.2
KLASSIFIZIERUNG
DES
VERHALTENS
.
29
3.1.3
ANALYSE
VERSCHIEDENER
LARVENSTADIEN
.
31
3.1.4
ANALYSE
DER
HITZE
INDUZIERTEN
RICHTUNGSUMKEHR
.
31
3.1.5
MUTANTENANALYSE
.
33
3.1.5.1
MUTANTEN
MIT
DEFEKTEN
IN
DER
NEUROTRANSMISSION
.
34
3.1.5.2
MUTANTEN
MIT
DEFEKTEN
IN
SENSORISCHEN
STRUKTUREN
.
36
3.1.5.3
MUTANTEN
MIT
THERMOTAXISDEFEKTEN
.
37
3.1.5.4
MUTANTEN
MIT
DEFEKTEN
IN
DER
BILDUNG
VON
DAUERSTADIEN
.
39
3.1.5.5
MUTANTEN
MIT
VERAENDERUNGEN
DER
KUTIKULA
.
40
3.1.6
MODULATION
DER
HITZEWAHMEHMUNG
DURCH
CAPSAICIN
.
41
3.1.7
IDENTIFIKATION
VON
NEURONEN,
DIE
AN DER
HITZEWAHMEHMUNG
BETEILIGT
SIND
.
43
3.1.7.1
ABLATION
VON
NEURONEN
IM
KOPF.
.
43
3.1.7.2
ABLATION
VON
NEURONEN
IM
SCHWANZ.
46
3.1.7.2.1
IDENTIFIKATION
VON
NEURONEN,
DIE
AN
DER
HITZEWAHR
NEHMUNG
IM
SCHWANZ
BETEILIGT
SIND
.
47
3.2
TEMPERATURWAHMEHMUNGSDEFEKTE
VON
C.
ELEGANS
PRESENILINMUTANTEN
.
50
3.2.1
NEURONALE
GRUNDLAGE
DES
THERMOTAXISDEFEKTS
.
52
3.2.2
BEHEBUNG
DER
SEL-12
DEFEKTE
DURCH
EXPRESSION
DER
SEL-12
CDNA.,53
3.2.3
ZELLSPEZIFISCHE
EXPRESSION
VON
SEL-12
IN
AIY
.
54
3.2.4
ANALYSE
DER
AIY
MORPHOLOGIE
IN
VERSCHIEDENEN
ENTWICKLUNGSSTADIEN
.
55
3.2.5
EINFLUSS
VON
HOP-1
.
57
3.2.6
EINFLUSS
VON
NOTCH
.
58
3.2.7
EXPRESSION
HUMANER
PRESENILINE
IN
SEL-12
MUTANTEN
.
59
3.2.8
ANDERE
VERHALTENSDEFEKTE
IN
SEL-12
MUTANTEN
.
61
3.2.9
ALLGEMEINE
NEURONALE
MORPHOLOGIE
IN
SEL-12
MUTANTEN
.
62
4
DISKUSSION
.
64
4.1
THERMONOZIZEPTION
IN
C.
ELEGANS
.
64
4.1.1
METHODISCHE
ASPEKTE
.
64
4.1.2
UNTERSCHIEDLICHE
PERZEPTION
VON
NOXISCHER
UND
NICHT-NOXISCHER
TEMPERATUR
IN
C.
ELEGANS
.
65
4.1.3
C.
ELEGANS
THERMONOZIZEPTOREN
SIND
CAPSAICIN
SENSITIV
.
65
4.1.4
DAUERSTADIEN
ZEIGEN
KEINE
HITZEAVERSION
.
66
4.1.5
SIGNALTRANSDUKTION
DES
HITZESTIMULUS
.
69
4.1.6
SCHALTPLAN
FLLR
DIE
HITZEWAHMEHMUNG
AM
POSTERIOREN
KOERPERENDE
71
4.1.7
SCHALTPLAN
FUER
DIE
HITZEWAHMEHMUNG
IM
KOPF
.
73
4.2
NEURONALE
AKTIVITAET
DER
C.
ELEGANS
PRESENILINE
.
74
4.2.1
SEL-12
KONTROLLIERT
DIE
NEUROGENESE
ZELLAUTONOM
.
74
4.2.2
LIN-12/NOTCH
AKTIVITAET
IN
POSTMITOTISCHEN
NEURONEN
.
75
4.2.3
EVOLUTIONAERE
KONSERVIERUNG
DER
PRESENILINFUNKTION
.
76
ANHANG
A
.
78
ANHANG
B
.
81
5
LITERATURVERZEICHNIS
.
.
.
88 |
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| title_full_unstemmed | Molekulargenetik der Temperaturwahrnehmung und Thermonozizeption im Modellorganismus Caenorhabditis elegans von Nicole Wittenburg |
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