Untersuchungen zur regulatorischen Phosphorylierung der Phosphoenolpyruvat Carboxylase in Schließzellen:
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Veröffentlicht: |
1999
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adam_text | A UNTERSUCHUNGEN ZUR REGULATORISCHEN PHOSPHORYLIERUNG DER
PHOSPHOENO/PYRUVAT CARBOXYLASE IN SCHLIESSZELLEN DISSERTATION ZUR
ERLANGUNG DES DOKTORGRADES (DR. RER. NAT) DER
MATHEMATISCH-NATURWISSENSCHAFTLICHEN FAKULTAET DER RHEINISCHEN
FRIEDRICH-WILHELMS-UNIVERSITAET BONN VORGELEGT VON MICHAEL MEINHARD AUS
SIEGEN BONN 1999 INHALTSVERZEICHNIS 1. EINLEITUNG 1.1 SPALTOEFFNUNGEN -
STRUKTUR UND FUNKTION 3 1.2 PHYSIOLOGIE UND REGULATION VON
SPALTOEFFNUNGEN 5 1.2.1 OEFFNUNG DER STOMATA . . 5 1.2.2 STOMASCHLUSS 8
1.2.3 GRUNDZUEGE DER SIGNALTRANSDUKTION 8 1.3 DIE
PHOSPHOENOLPYRUVAT-CARBOXYLASE: STRUKTUR UND FUNKTION 11 1.3.1 C 4 - UND
CAM-METABOLISMUS 12 1.3.2 C 3 -METABOLISMUS 12 1.3.3 SCHLIESSZELLEN 13
1.4 ZIEL DER ARBEIT 14 2. MATERIAL UND METHODEN 2.1 CHEMIKALIEN *. 15
2.2 ANZUCHT DER PFLANZEN 15 2.3 ERNTE DER EPIDEMIEN 15 2.4 AUFSCHLUSS DER
EPIDEMIEN : 16 2.5 *ENTSALZUNG DER EXTRAKTE 17 2.6
PROTOPLASTENISOLATION 17 2.6.1 ISOLATION VON SCHLIESSZELLPROTOPLASTEN AUS
VICIAFABA 17 2.6.2 ISOLATION VON MESOPHYLL-PROTOPLASTEN AUS VICIAFABA 19
2.6.3 ISOLATION VON HYPOKOTYL-PROTOPLASTEN AUS HELIANTHNS ANMIUS 20
2.6.4 VITALITAETSTEST 21 2.7 INKUBATION DER PROTOPLASTEN 22 2.8
PH-MESSUNGEN IN PROTOPLASTEN-SUSPENSION 23 2.9 EXTRAKTION AUS
PROTOPLASTEN 24 2.9.1 METHODE A 24 2.9.2 METHODE B 25 2.10
PROTEINBESTIMMUNG 25 2.11 AKTIVITAETSBESTIMMUNG DER PEPCASE 26 2.12
RADIOAKTIVE MARKIERUNG 29 2.13 IMMUNPRAEZIPITATION DER PEPCASE 29 2.13.1
ANTISEREN 29 2.13.2 REINIGUNG DER ANTISEREN 29 2.13.3 IMMUNPRAEZIPITATION
30 2.14 SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE 32 2.14.1 PROBENAUFBEREITUNG
32 2.14.2 MOLEKULARGEWICHT-STANDARD 33 2.14.3 HERSTELLUNG DER GELE 33
2.14.4 ELEKTROPHORESE 34 2.14.5 PROTEINFAERBUNG DER GELE : 34 2.15
WESTERN BLOTTING 35 2.15.1 ELEKTRO-TRANSFER 35 2.15.2 PROTEINFAERBUNG AUF
NITROCELLULOSE 36 2.15.3 IMMUNOSTAINING 36 2.16 DENSITOMETRISCHE
AUSWERTUNG 38 -1- INHALTSVERZEICHNIS 3. ERGEBNISSE 3.1 EXTRAKTE AUS
ISOLIERTEN EPIDEMIEN 39 3.2 IN VITRO PHOSPHORYLIERUNG, EINFLUSS VON
THIOLREAGENZIEN 40 3.3 ISOLATION UND REINIGUNG VON
SCHLIESSZELLPROTOPLASTEN 41 3.4 STABILITAET DER PEPCASE IN GCPS 42 3.5
STABILITAET DER PEPCASE IN EXTRAKTEN AUS GCPS 42 3.6 VERGLEICH VON
EPIDERMISEXTRAKTEN MIT EXTRAKTEN AUS SCHLIESSZELLPROTOPLASTEN.... 43 3.7
TAGESGAENGE MIT GCPS 47 3.8 TROCKENSTRESS 48 3.9 SCHWELL- UND
SCHRUMPFVERHALTEN DER GCPS 49 3.10 AKTIVIERUNG DER H + -ATPASE DURCH
FUSICOCCIN UND HEMMUNG DURCH ABSCISINSAEURE 50 3.11 FUSICOCCIN UND
ABSCISINSAEURE 52 3.12 DIREKTER AUFSCHLUSS 53 3.12.1 FUSICOCCIN 55 3.12.2
LICHT 61 3.12.3 KALIUM 65 3.12.4 AKTIVIERUNG DER PEPCASE DURCH BUTYRAT
66 3.13 IMMUNPRAEZIPITATION UND IN VIVO PHOSPHORYLIERUNG DER PEPCASE 67
4. DISKUSSION 4.1 CHARAKTERISIERUNG DER PEPCASE IN EXTRAKTEN AUS
EPIDERMIS-GEWEBE UND GCPS 70 4.2 TAGESABHAENGIGKEIT DER
PEPCASE-EIGENSCHAFTEN 73 4.3 AKTIVITAET UND MALATSENSITIVITAET ALS
INDIZIEN FUER EINE REGULATORISCHE PHOSPHORYLIERUNG UND DER DIREKTE
NACHWEIS DER IN VIVO PHOSPHORYLIENMG 73 4.4 FUSICOCCIN (FC) 78 4.5
LICHTAKTIVIERUNG DER PEPCASE 79 4.6 KALIUMABHAENGIGKEIT DER
PEPCASE-AKTIVIERUNG 81 4.7 DIE ROLLE DES CYTOSOLISCHEN PH-WERTES 82 4.8
MODELLVORSTELLUNG ZUR PHOSPHORYLIERUNG DER PEPCASE IN GCPS 83 4.9
ZUSAMMENFASSUNG 86 LITERATUR 87 ANHANG ABKUERZUNGEN 103 CHEMIKALIEN UND
GERAETE 104 DANKSAGUNGEN 106 LEBENSLAUF 107 -2-
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