Epigallocatechingallat inhibiert die Platelet derived growth factor-induzierte Signaltransuktion in glatten Gefäßmuskelzellen der Rattenaorta:
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2000
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1
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
3
1
EINLEITUNG
6
1.1
ARTERIOSKLEROSE
AND
DIE
BETEILIGUNG
GLATTER
GEFAEBMUSKELZDLEN
6
1.1.1
ATHEROSKLEROSE
UND
PATHOLOGISCH-ANATOMISCHE
STADIEN
6
1.1.2
DIE
YYRESPONSE-TO-INJURY
"
-HYPOTHESE
DER
ARTERIOSKLEROSE
7
1.2
INTRAZELLULAERE
SIGNALTRANSDUKTION
VON
PDGF,
EGF
UND
ANGIOTENSIN
II
8
1.2
1
DER
YYPLATELED-DENVED
GROWTH
FACTOR
"
(PDGF)
UND
SEIN
REZEPTOR
8
1.2
2
DER
.EPIDERMAL
GROWTH
FACTOR"
(EGF)
UND
SEIN
REZEPTOR
10
1.2.3
ANGIOTENSIN
II
UND
SEIN
REZEPTOR
10
1.2.4
DIE
INTRAZELLULAERE
SIGNALTRANSDUKTION
VON
PDGF, EGF
UND
ANGIOTENSIN
11
11
1.2.5
POSITIVE
STIMULATIONSKONTROLLE
DURCH
FOETALES
KAELBERSERUM
15
1.3
DER
GRUENE
TEE
16
1.3.1
UNTERSCHIEDE
ZWISCHEN
GRUENEM
UND
SCHWARZEM
TEE
16
1.3.2
BIOCHEMISCHE
BESTANDTEILE
VON
GRUENEM
TEE
17
1.3.3
STRUKTUR
UND
PHARMAKOKINETIK
VON
EGCG
17
2
ZIEL
DER
ARBEIT
UND
FRAGESTELLUNGEN
19
3 METHODIK
20
3.1
PRAEPARATION
UND
KULTIVIERUNG
GLATTER
GEFLBMUSKELZELLEN
DER
RATTENAORTA
20
3.2
IDENTIFIZIERUNG
DER
GLATTEN
MUSKELZELLEN
MITTELS
IMMUNFLUORESZENZMIKROSKO|HE
MIT
A-AKTIN
21
3.3
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
BRADFORD
21
3.4
BESTIMMUNG
DER
DNA-SYNTHESERATE
22
3.5
ZELLZAHLBESTIMMUNG
AM
CASY*L-ZELLZAEBLGERAET
23
3.5.1
MESSPRINZIP
DES
CASYI-ZELLZAEHLGERAETES
23
3.5.2
MESSUNG
DER
PROBEN
24
3.6
BESTIMMUNG
DER
FREIEN
INTRAZELLULAEREN
KALZIUMKONZENTRATION
((
CA
,+
]I)
24
3.7
BESTIMMUNG
DER
TYROSINPHOSPHORYLIERTEN
FORM
DER
MAP-KINASE
MITTELS
SDS-PAGE
UND
CHEMILUMINESZENZ
WESTERN
IMMNNOBLOTTING
25
3.7.1
GEWINNUNG
DER
PROBEN
25
3.7.2
SDS-POLYACRYLAMID-ELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
26
3.7.3
WESTERN
BLOTTING
27
3.7.4
INUNUNODETEKTION
27
3.7.5
CHEMILUMINESZENZ
UND
DENSITOMETRISCHE
ANALYSE
27
2
3.8
NACHWEIS
DER
MRNA-ERPRESSION
VON
C-FOS
MITTELS
NORTHERN
BLOTTING
28
3.8
1
ISOLIERUNG
UND
QUANTIFIZIERUNG
DER
GESAMT-RNA
28
3.8.2
RNA-GELELEKTROPHORESE
29
3.8
3
NORTHERN
BLOTTING
(SAMBROOK
ET
AL
,
1989)
29
3.8
4
MARKIERUNG
DER
CDNA-SONDE
MIT
OC-(
K
P]-DEOXYCYTIDINTRIPHOSPHAT
(A-[
32
P]-CTP)
30
3.8
5
HYBRIDISIERUNG
UND
AUTORADIOGRAPHIE
30
3.9
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
31
4
ERGEBNISSE
32
4.1
IDENTIFIZIERUNG
DER
GLATTEN
GEFAESSMUSKELZELLEN
32
4.1.1
MORPHOLOGISCHE
CHARAKTERISIERUNG
GLATTER
GEFAESSMUSKELZELLEN
32
4
1.2
IDENTIFIKATION
VON
GLATTEN
GEFAESSMUSKELZELLEN
MITTELS
IMMUNFLUORESZENZDARSTELLUNG
VON
A-AKTIN
32
4.2
WIRKUNGEN
VON
EGCG
UND
GTE
AUF
DAS
WACHSTUM
GLATTER
GEFAESSMUSKELZELLEN
33
4.2
1
MORPHOLOGISCHE
VERAENDERUNGEN
GLATTER
GEFAESSMUSKELZELLEN
DURCH
EGCG
UND
GTE
33
4.2
2
EINFLUSS
VON
EGCG
UND
GTE
AUF
DIE
PDGF-BB-INDUZIERTE
DNS-SYNTHESE
35
4.2.3
EINFLUESSE
VON
EGCG
UND
GTE
AUF
DIE
ZELLZAHL
36
4.2
4
EINFLUSS
VON
EGCG
AUF
DAS
ZELLWACHSTUM
BEI
STIMULATION
MIT
PDGF-BB,
EGF,
ANG
II
UND
FKS
38
4.3
WIRKUNGEN
VON
EGCG
AUF
DIE
SIGNALTRANSDUKTION
GLATTER
GEFAESSMUSKELZELLEN
41
4
3
1
EINFLUESSE
AUF
DEN
ANG
II-UND
PDGF-BB-INDUZIERTEN
ANSTIEG
DER
INTRAZELLULAEREN
KALZIUMKONZENTRATION
41
4.3.2
EINFLUESSE
AUF
DIE
PDGF-BB-,
EGF-.
ANG
II
UND
FKS-INDUZIERTE
PHOSPHORYLIERUNG
DER
MAP-KINASE
43
4
3.3
EINFLUESSE
AUF
DIE
PDGF-BB-UND
EGF-INDUZIERTE
EXPRESSION
VON C-FOS
UND
EGR-1
45
5
DISKUSSION
46
5.1
WIRKUNGEN
VON
EGCG
UND
GTE
AUF
DAS
WACHSTUMSVERHALTEN
GLATTER
GEFAESSMUSKELZELLEN
46
5.2
WIRKUNGEN
VON
EGCG
UND
GTE
AUF
DIE
SIGNALTRANSDUKTION
GLATTER
GEFAESSMUSKELZELLEN
47
5.3
BISHERIGE
HINWEISE
AUF
DIE
ATHEROPROTEKTIVE
UND
ANTIKARZINOGENE
WIRKUNG
VON
EGCG
50
5.4
INHIBITION
DES
PDGF-BB
SIGNALWEGES
ALS
EIN
MOEGLICHER
WIRKMECHANISMUS
52
5.5
AUSBLICK
52
6
ZUSAMMENFASSUNG
53
7
VERWENDETE
LOESUNGEN
54
VERWENDETE
CHEMIKALIEN
UND
MATERIALIEN
59
9
LITERATURVERZEICHNIS
62
10
DANKSAGUNG
69
11
LEBENSLAUF
70 |
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