Die Rolle von Langerhanszellen bei der Immunregulation der kutanen Leishmaniose: Expression und Funktion von Cytokinrezeptoren
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INHALTSVERZEICHNIS
I. EINLEITUNG
1
I.L. LEISHMANIOSE 1
1.1.2. MAUSMODELL 2
1.1.3. AUFNAHME DER LEISHMANIEN 3
1.1.4. REGULATION DER IMMUNANTWORT GEGEN
L. MAJOR
5
1.2. DENDRITISCHE ZELLEN UND LANGERHANSZELLEN 9
1.2.1. ENTWICKLUNG VON LANGERHANSZELLEN/DENDRITISCHEN ZELLEN 9
1.2.2. CYTOKINE UND CYTOKINREZEPTOREN 11
1.2.3. ROLLE DER LANGERHANSZELLEN/DENDRITISCHEN ZELLEN IN DER KUTANEN
LEISHMANIOSE 14
1.2.4. BEDEUTUNG DER LANGERHANSZELLEN/DENDRITISCHEN ZELLEN BEI ANDEREN
ERKRANKUNGEN IS
I. 3. AUFGABENSTELLUNG 16
II. MATERIAL UND METHODEN 19
II. 1. AUFLISTUNG DER VERWENDETEN ANTIKOERPER UND REKOMBINANTEN CYTOKINE
19
11.2. MAEUSE, PARASITEN, KULTUR UND INFEKTION 21
11.3. PRAEPARATION VON PERITONEALEXSUDAT-MAKROPHAGEN 23
11.4. PRAEPARATION VON EPIDERMALZELLEN 24
11.5. DEPLETION DER DENDRITISCHEN EPIDERMALEN T-ZELLEN (DETZ) 25
11.6. INFEKTION DER LANGERHANSZELLEN UND INKUBATION MIT CYTOKINEN ODER
ANTIKOERPERN 25
11.7. ACRIDINORANGE/ETHIDIUMBROMIDFAERBUNG 26
II. 8. FLUORESZENZ-FAERBUNG 26
II.9. CMFDA-FAERBUNG DER LEISHMANIEN 27
II. 10. THIAZOLORANGE-FAERBUNG 27
II. 11. ELISA 28
II. 11.1. STIMULATION DER ZELLEN ZUR IL-12P40-PRODUKTION 29
11.12. FSDC 29
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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III. ERGEBNISSE 31
IN.L. IDENTIFIKATION VON INFIZIERTEN LANGERHANSZELLEN INNERHALB
EINER EPIDERMALZELLSUSPENSION 31
FFL.2. EXPRESSION VON CYTOKINREZEPTOREN UND ANDEREN OBERFLAECHENMOLEKUELEN
AUF LANGERHANSZELLEN VON BALB/C- UND C57BL/6-MAEUSEN
32
111.2.1. MAUSSTAMMSPEZIFISCHE UNTERSCHIEDE IN DER EXPRESSION BESTIMMTER
OBERFLAECHENMOLEKUELE 35
III.3. EXPRESSION VON CYTOKINREZEPTOREN UND ANDEREN OBERFLAECHENMOLEKUELEN
AUF MAKROPHAGEN VON BALB/C- UND C57BL/6-MAEUSEN
36
M.4. BESTIMMUNG DER IL-12P40-PRODUKTION VON DENDRITISCHEN ZELLEN 38
111.4.1. IL-12P40-PRODUKTION VON LANGERHANSZELLEN 38
111.4.2. IL-12P40-PRODUKTION VON FSDC 39
111.4.3. IL-12-P40-PRODUKTION VON BALB/C-LANGERHANSZELLEN NACH
BEHANDLUNG MIT
EINEM MONOKLONALEN ANTIKOERPER GEGEN IL-4 40
HI.5. BESTIMMUNG DER INFEKTIONSRATE VON LANGERHANSZELLEN NACH
BEHANDLUNG MIT VERSCHIEDENEN CYTOKINEN ODER MONOKLONALEN
ANTIKOERPERN 41
111.5.1. BESTIMMUNG DER INFEKTIONSRATE VON BALB/C- UND
C57BL/6-LANGERHANS
ZELLEN UNTER EINWIRKUNG VON IL-2 41
111.5.1.1. BESTIMMUNG DER INFEKTIONSRATE VON LANGERHANSZELLEN AUS
LL-2-REZEPTOR-
A-KETTEN-DEFIZIENTEN-MAEUSEN (C57BL/6) 46
111.5.1.2. BESTIMMUNG DER EXPRESSION DER DREI KETTEN DES IL-2 REZEPTORS
AUF
BALB/C-LANGERHANSZELLEN 47
II 1.5.1.3. BESTIMMUNG DER INFEKTIONSRATE VON BALB/C-LANGERHANSZELLEN
NACH
INKUBATION MIT EINEM MONOKLONALEN ANTIKOERPER GEGEN DIE SS-KETTE
DES IL-2 REZEPTORS 49
111.5.1.4. UNTERSUCHUNG DER WIRKUNG VON IL-2 UND COINKUBATION MIT
ANDEREN
CYTOKINEN AUF BALB/C-LANGERHANSZELLEN 49
111.5.1.5. BESTIMMUNG DER INFEKTIONSRATE VON BALB/C-LANGERHANSZELLEN IM
DURCHFLUSSCYTOMETER 50
III.5.1.6. BESTIMMUNG DER INFEKTIONSRATE VON BALB/C-LANGERHANSZELLEN
UNTER
EINWIRKUNG VON IL-15 52
III.5.2. BESTIMMUNG DER INFEKTIONSRATE VON BALB/C-LANGERHANSZELLEN
UNTER EINWIRKUNG VON MONOKLONALEN ANTIKOERPERN GEGEN FAS 53
111.5.2.1. BESTIMMUNG DER INFEKTIONSRATE VON C57BL/6-LANGERHANSZELLEN
UNTER
EINWIRKUNG VON MONOKLONALEN ANTIKOERPERN GEGEN FAS 54
111.5.2.2. BESTIMMUNG DER INFEKTIONSRATE VON LANGERHANSZEILEN
FAS-DEFIZIENTER
MAEUSE (C57BL/6) 55
111.5.2.3. BESTIMMUNG DER INFEKTIONSRATE VON LANGERHANSZEILEN
FAS-LIGAND-
DEFIZIENTER MAEUSE (C57BL/6) 55
IV. DISKUSSION 57
V. ZUSAMMENFASSUNG 68
VI. SUMMARY
70
VII. LITERATUR
72
VIII. ANHANG
92 |
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