Tierexperimentelle Untersuchungen zur Entwicklung einer Gentherapie für die Behandlung von Knochenerkrankungen:
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Aachen
Shaker
2000
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| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1. Einleitung und Fragestellung 5
1.1. Einleitung S
1.2. Klinische Aspekte 6
1.3. Rekombinante Wachstumsfaktoren als Promotoren der knöchernen 8
Defektheilung
1.4. Prinzipien der Gentherapie 11
1.5. Fragestellung der Arbeit 13
2. Material und Methodik 15
2.1. Auswahl der Versuchstiere 15
2.2. Biochemische Eigenschaften der verwendeten Wachstumsfaktoren und
Zytokin Inhibitoren 17
2.2.1. Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP 2) 17
2.2.2.Transforming Growth Factor beta (TGFß) 18
2.2.3. Interleukin 1 Rezeptor Antagonist (EL IRa / IRAP) 20
2.2.4. Löslicher Tumor Nekrose Faktor a Rezeptor (sTNFaR) 22
2.3. Eigenschaften der verwendeten Matkergene 24
2.3.1. ß Galactosidase (LacZ) 24
2.3.2. Luciferase (Luc) 25
2.4. Die verwendeten Vektoren 26
2.4.1. adenovirale Vektoren 26
2.4.2. retrovirale Vektoren 28
2.5. Meßverfahren zur Erfassung der Wirkung der Transgene 31
2.5.1. klinische Beurteilung 31
2.5.2. Quantitative Messung der IL IRa Expression 31
2.5.3. Immunhistochemische Beurteilung 32
2.5.4. Photometrische Messung der Luciferase Expression 33
2.5.5. Radiologische Beurteilung 34
2.5.6. Histomorphometrie 35
2.5.7. Biomechanik 37
2.6. Experimentelle Voruntersuchungen 39
2.6.1. Transfektionsfahigkeit von humanen osteoblastären Zellen
durch retrovirale Vektoren in vitro 39
2.6.2. Transfektionsfahigkeit von humanen osteoblastären Zellen
durch adenovirale Vektoren in vitro 50
2.7. Datenverarbeitung und Statistik 59 ;
I
1
I
3.Experimenteller Teil 60
3.1. Expression transgener Markerenzyme nach adenoviral vermitteltem
Gentransfer im Modell der Balb/C Maus 60
3.2. Anwendung von adenoviralen, therapeutischen Vektoren zur Beeinflussung
der Östrogen Mangel bedingten Knochenresorption am Modell der Balb/C
Maus 75
3.3. Etablierung des femoralen Defektmodells beim weißen Neuseeland Hasen 88
3.4. Expression transgener Markerenzyme nach Injektion von adenoviralen
Markergenen in die Defekt Kammer beim weißen Neuseeland Hasen 93
3.5. Anwendung von adenoviralen, therapeutischen Vektoren zur Induktion einer
Osteoneogenese am Beispiel des femoralen Defekt Modells beim weißen
Neuseeland Hasen 104
4. Gesamtdiskussion und Ausblick 121
5. Zusammenfassung 130
6. Literaturverzeichnis 135
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