Experimente zur Charakterisierung und Isolierung einer neurotrophen Aktivität aus Astrozyten-konditionierten Medien:
Gespeichert in:
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
2000
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Beschreibung: | Kiel, Univ., Diss., 2000 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1
.EINLEITUNG
1.1
FRAGESTELLUNG
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
2.1
VERWENDETE
MEDIEN,
PUFFER
UND
LOESUNGEN
2.1.1
PRAEPARATIONSMEDIUM
2.1.2
KULTURMEDIUM/KONTROLLMEDIUM
2.1.3
FIXIER-ZFAERBELOESUNG
2.1.4
MATERIALIEN
ZUR
AUFARBEITUNG
DES
TESTMEDIUMS
2.2
ASTROZYTENKULTUR,
GEWINNUNG
DES
TESTMEDIUMS
2.3
GEWINNUNG
DER
RETINASTANZEN
UND
HERSTELLUNG
DER
KULTUREN
2.3.1
VERSUCHSTIERE
2.3.2
AUGENPRAEPARATION
2.3.3
RETINAPRAEPARATION
2.3.4
FIBRINMATRIX
2.3.5
HERSTELLUNG
DER
KULTUREN
2.4
AUSWERTUNG
DES
VERSUCHS
2.4.1
FIXATION
UND
FAERBUNG
DER
STANZEN
2.4.2
AUSWERTUNG
DES
NEURITENWACHSTUMS
2.5
AUFARBEITUNG
DES
TESTMEDIUMS
2.5.1
ULTRAFILTRATION
2.5.2
AN
IONENAUSTAUSCHER/KATIONENAUSTAUSCHER
2.5.3.
FPLC(FAST
PROTEIN
LIQUID
CHROMATOGRAPHY)
2.5.4.
REVERSED
PHASE
2.5.5.
HPLC(HIGH
PERFORMANCE
LIQUID
CHROMATOGRAPHY)
2.5.6.
SPEKTROSKOPIE
3.
BEFUNDE
3.1
KONTROLLKULTUREN
3.2
ASTROZYTENKONDITIONIERTES
MEDIUM
3.3
ASTROZYTENKONDITIONIERTES
MEDIUM
(AKM)
NACH
VERSCHIEDENEN
ULTRAFIFTRATIONSCH
RITTEN
3.3.1
AKM
IM
MOLEKULARGEWICHTSBEREICH
10.000
DA
3.3.2
AKM
IM
MOLEKULARGEWICHTSBEREICH
1.000
DA
3.3.3
AKM
IM
MOLEKULARGEWICHTSBEREICH
ZWISCHEN
500
UND
1.000
DA
3.4
LONENAUSTAUSCHERVERFAHREN
3.4.1
ANIONENAUSTAUSCHER
(QMA)
3.4.2
ELUATE
VON
QMA
3.4.3
KATIONENAUSTAUSCHER
(CM)
SEITE
1
4
5
5
5
5
6
7
9
10
10
10
11
11
12
13
13
14
15
15
15
16
18
18
19
20
20
21
22
22
22
23
24
24
25
26
SEITE
3.5
FPLC
27
3.5.1
DURCHLAUFUND
ELUATE
NACH
ANIONENAUSTAUSCH
CHROMATOGRAPHIE
27
3.5.2
AKM
IM
MOLEKULARGEWICHTSBEREICH
1.000
DA
MIT
TEA
ALS
PUFFERLOESUNG
27
3.5.3
AKM
IM
MOLEKULARGEWICHTSBEREICH
1.000
DA
MIT
HEPES
ALS
PUFFERLOESUNG
28
3.6
HPLC
30
3.6.1
NEUROTROPHE
FRAKTIONEN
NACH
HPLC-AUFARBEITUNG
30
3.7
SCHLUSSFOLGERUNG
32
4.
DISKUSSION
33
4.1
VORBEMERKUNG
33
4.2
DER
BIOASSAY
33
4.3.1
ASTROZYTENKONDITIONIERTE
MEDIEN
ALS
QUELLE
NEUROTROPHER
FAKTOREN
36
4.3.2
VERGLEICH
DER
ISOLIERTEN
NEUROTROPHEN
AKTIVITAET
MIT
BEKANNTEN
NEUROTROPHEN
FAKTOREN
37
4.4
METHODIK
DER
AUFARBEITUNG
DES
AKM
39
4.5.
AUSBLICK
40
5,
ZUSAMMENFASSUNG
42
6.
ANHANG
44
SCHEMA
1
44
SCHEMA
2
45
SCHEMA
3
45
SCHEMA
4
46
SCHEMA
5
47
7.LITERATURVERZEICHNIS
48
8,
DANKSAG
UN
G
63
9.
LEBENSLAUF
64 |
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