Untersuchungen zur Charakterisierung der lokalen immunologischen Reaktion von Interleukin-4 transgenen Mäusen:
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1999
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
.
I
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
IV
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
DIE
HAUT
ALS
IMMUNOLOGISCH
KOMPETENTES
ORGAN
.
2
1.2
DIE
PATHOGENESE
ALLERGISCHER
UND
IRRITATIVER
KONTAKTDERMATITIS
.
3
1.3
DIFFERENZIERUNGSPROBLEMATIK
ZWISCHEN
ALLERGISCHER
UND
IRRITATIVER
KONTAKTDERMATITIS
.
5
1.4
INTERLEUKIN-4:
BIOLOGIE
UND
KLINISCHE
RELEVANZ
.
6
1.5
INTERLEUKIN-4
TRANSGENE
MAEUSE
-
UEBERBLICK
UND
BIOLOGIE
.
8
1.6
FRAGESTELLUNG
UND
ZIELE
.
12
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
14
2.1
VERSUCHSTIERE
.
14
2.2
APPLIKATIONSSUBSTANZEN
.
14
2.3
VERBRAUCHSCHEMIKALIEN
.
14
2.4
KULTURMEDIEN,
LOESUNGEN
UND
PUFFER
.
15
2.5
ANTIKOERPER
UND
MICROBEADS
.
15
2.6
OLIGONUKLEOTIDE
.
16
2.7
REKOMBINANTE
ZYTOKINE
.
16
2.8
GENOTYPISIERUNG
DER
VERSUCHSTIERE
.
17
2.9
BEHANDLUNGSPROTOKOLLE
.
18
2.9.1
BEHANDLUNGSPROTOKOLL
ZUR
LOKALEN
INDUKTION
DER
ERSTANTWORT
.
18
2.9.2
BEHANDLUNGSPROTOKOLL
ZUR
LOKALEN
INDUKTION
UND
AUSLOESUNG
DER
ZWEITANTWORT
.
18
2.9.3
BEHANDLUNGSPROTOKOLL
ZUR
RIL-4
SUBSTITUTION
.
18
2.10
MESSUNG
DER
OHRDICKE
.
18
2.11
PRAEPARATION
DER
GEWEBE
.
19
2.12
LYMPHKNOTEN-GEWICHTS
UND
-ZELLZAHLBESTIMMUNG
.
19
2.13
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
ANALYSEN
.
20
2.14
MAGNETISCHE
ZELLSEPARATION
(MAGNETIC
ACTIVATED
CELL
SEPARATION)
.
20
2.15
EX
VIVO
RESTIMULATION
.
21
2.16
BESTIMMUNG
DER
ZYTOKINKONZENTRATION
.
22
2.17
RNA-ISOLATION
.
23
FOTAFA
V
M
DCLM
I
S
_
UE
2.18
QUANTIFIZIERUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
.
24
2.19
REVERSE
TRANSKRIPTION
.
24
2.20
QUANTITATIVE
YYREAL-TIME
PCR
"
.
25
2.21
HERSTELLUNG
DER
ZYTOKINSTANDARDS
.
26
2.22
AUSWERTUNGEN
.
27
2.22.1
BERECHNUNG
DER
ZUNAHME
DER
OHRDICKE
.
27
2.22.2
BERECHNUNG
DES
LYMPHKNOTEN-STIMULATIONSINDEX
.
28
2.22.3
BERECHNUNG
DES
IMDS-DIFFERENZIERUNGSINDEX
.
28
2.22.4
BERECHNUNG
DER
ZYTOKIN
PROTEINKONZENTRATION
.
29
2.22.5
BESTIMMUNG
DER
ZYTOKIN
GENEXPRESSION
.
29
2.23
STATISTIK
.
30
3.
ERGEBNISSE
.
31
3.1
GENO
UND
PHAENOTYPISCHE
CHARAKTERISIERUNG
IL-4
TRANSGENER
MAEUSE
.
31
3.1.1
GENOTYPISIERUNG
.
31
3.1.2
IMMUNOLOGISCHER
PHAENOTYP
.
32
3.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
LOKALEN
ERSTANTWORT
IL-4
TRANSGENER
MAEUSE
.
35
3.2.1
DOSIS-WIRKUNGSBEZIEHUNG
.
36
3.2.2
IMDS-DIFFERENZIERUNGSINDEX
.
40
3.2.3
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
ANALYSE
EPIDERMALER
ZELLPOPULATIONEN
.
42
3.2.4
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
ANALYSE
VON
ZELLPOPULATIONEN
DER
AURIKULAEREN
LYMPHKNOTEN
.
46
3.2.5
MIGRATIONSVERHALTEN
ANTIGENPRAESENTIERENDER
ZELLEN
DER
EPIDERMIS
.
50
3.2.6
ANALYSE
DER
GENEXPRESSIONSMUSTER
EPIDERMALER
ZYTOKINE
.
54
3.3
EINFLUSS
VON
SUBSTITUIERTEN
REKOMBINANTEN
IL-4
AUF
DIE
INDUKTIONSPHASE
DER
LOKALEN
KONTAKTALLERGISCHEN
REAKTION
VON
WILDTYP-MAEUSEN
.
56
3.3.1
ANALYSE
DER
ZEITABHAENGIGKEIT
DER
BIOLOGISCHEN
AKTIVITAET
DES
SUBSTITUIERTEN
RIL-4
.
56
3.3.2
DOSIS-WIRKUNGSBEZIEHUNG
DER
BIOLOGISCHEN
AKTIVITAET
DES
SUBSTITUIERTEN
RIL-4
.
58
3.3.3
ANALYSE
DER
INDUKTIONSPHASE
DER
LOKALEN
KONTAKTALLERGISCHEN
REAKTION
NACH
SUBSTITUTION
VON
RIL-4
.
59
3.3.3.1
ANALYSE
DER
ZELLPROLIFERATION
DER
AURIKULAEREN
LYMPHKNOTEN
.
59
3.3.3.2
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
ANALYSE
DER
AURIKULAEREN
LYMPHKNOTEN
.
60
3.4
CHARAKTERISIERUNG
DER
LOKAL
INDUZIERTEN
ZWEITANTWORT
IL-4
TRANSGENER
MAEUSE
.
63
INHALTSVERZEICHNIS
_
UEI
3.4.1
DOSISERMITTLUNG
FUER
DIE
AUSLOESUNG
DER
ZWEITANTWORT
.
65
3.4.2
DNFB
ALS
REFERENZSUBSTANZ
ZUR
KONTROLLE
DER
ANTIGENSPEZIFITAET
.
66
3.4.3
ANALYSE
DER
KUTANEN
REAKTIVITAET
.
67
3.4.4
ANALYSE
DER
AKTIVIERUNG
DER
AURIKULAEREN
LYMPHKNOTEN
.
68
3.4.4.1
LYMPHKNOTENZELLPROLIFERATION
.
69
3.4.4.2
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
ANALYSE
DER
CD69
EXPRESSION
AUF
MHC
KLASSE
II*
LYMPHKNOTENZELLEN
.
71
3.4.5
ANALYSE
DER
ZYTOKINMUSTER
IN
DEN
AURIKULAEREN
LYMPHKNOTEN
.
74
4.
DISKUSSION
.
79
4.1
LOKALE
IMMUNOLOGISCHE
REAKTION
VON
WILDTYP-MAEUSEN
.
80
4.2
LOKALE
IMMUNOLOGISCHE
REAKTION
VON
IL-4
TRANSGENEN
MAEUSEN
.
86
4.3
DIE
BEDEUTUNG
VON
IL-4
IM
KONTEXT
ALLERGISCHER
ERKRANKUNGEN
.
92
5.
AUSBLICK
.
98
6.
ZUSAMMENFASSUNG
.
100
7.
LITERATURVERZEICHNIS
.
101
VEROEFFENTLICHUNGEN
.
118
EIDESSTATTLICHE
ERKLAERUNG
.
120
LEBENSLAUF
.
121 |
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