Untersuchungen zur Isolierung von Regulator-Genen des floralen Meristem-Identitäts-Gens FLORICAULA aus Antirrhinum majus:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1999
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| Beschreibung: | Köln, Univ., Diss., 1999 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
_
5
1.1
B
LUETENENTWICKLUNG
-
EIN
B
EISPIEL
VON
PFLANZLICHER
M
USTERBILDUNG
.
5
1.2
M
OEGLICHE
A
NWENDUNGEN
VON
E
RKENNTNISSEN
AUS
DER
B
LUETENENTWICKLUNG
IN
N
UTZPFLANZEN
.
6
1.3
D
IE
B
LUETENBILDUNG
WIRD
UEBER
DIE
W
ECHSELWIRKUNG
VON
AEUBEREN
B
EDINGUNGEN
MIT
ENDOGENEN
F
AKTOREN
KONTROLLIERT
.
7
1.4
D
IE
GENETISCHE
K
ONTROLLE
DES
GENERATIVEN
W
ACHSTUMS
.
8
1.4.1
DREI
GRUPPEN
VON
GENEN
SIND
FUER
DIE
BLUETENBILDUNG
WICHTIG
.
8
1.4.2
BLUETEZEIT-GENE
.
9
1.4.3
SIND
BLUETEZEIT-GENE
PHASEN-UMSCHALT-GENE?
.
12
1.5
D
ER
UE
BERGANG
VOM
VEGETATIVEN
ZUM
GENERATIVEN
W
ACHSTUM
IN
A
NTIRRHINUM
MAJUS
.
13
1.6
A
NTIRRHINUM
ALS
GEEIGNETE
M
ODELLPFLANZE
ZUR
U
NTERSUCHUNG
DES
P
HASENUEBERGANG
VON
VEGETATIV
ZU
GENERATIV
.
14
1.7
S
TRATEGIE
ZUR
I
SOLIERUNG
VON
P
HASEN
-U
MSCHALT
-G
ENEN
.
14
2
MATERIAL
UND
METHODEN
_
17
2.1
B
IOMATERIAL
.
17
2.1.1
ANTIRRHINUM
MAJUS
PFLANZENMATERIAL
.
17
2.1.2
E.
COLI
STAEMME
.
17
2.13
AGROBACTERIUM
TUMEFACIENS
STAMM
.
18
2.1.4
PLASMIDE
UND
VEKTOREN
.
18
2.13
OLIGONUCLEOTIDE
.
19
2.1.6
CDNA-BANKEN
.
19
2.1.7
ENZYME
.
20
2.2
M
ATERIAL
.
20
2.2.1
CHEMIKALIEN,
RADIOCHEMIKALIEN
UND
SONSTIGE
MATERIALIEN
.
20
2.3
M
ETHODEN
.
21
2.3.1
MOLEKULARBIOLOGISCHE
STANDARDMETHODEN
.
21
2.3.2
HYBRIDISIERUNG
VON
NORTHERN
BLOTS
.
21
233
IN
SITU-HYBRIDISIERUNGEN
.
27
2.3.4
SCREENING
VON
CDNA
BANKEN
.
21
2.33
KLONIERUNG
VON
5
'
-CDNA-ENDEN
MITTELS
PCR
AUS
EINER
CDNA-POPULATION
.
22
2.3.6
HERSTELLUNG
UND
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
FLO-PROMOTORREGION
FRAGMENTEN
FUER
EMSA
.
22
INHALTSVERZEICHNIS
2.3.7
EXTRAKTION
VON
KERNPROTEINEN
.
22
2.3.8
NATIVE
POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
ZUM
NACHWEIS
VON
DNA-PROTEIN
INTERAKTIONEN
.
23
2.3.9
UBEREXPRESSION
VON
PROTEINEN
MIT
'
HISTIDIN-TAG'IN
E.
COLI
UND
AUFREINIGUNG
.23
2.3.10
SOUTH-WESTERN-SCREENING
.
23
2.3.11
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DNA
ALS
SONDE
FUER
SOUTH-WESTERN-SCREENING
.
24
2.3.12
HYPOKOTYLTRANSFORMATION
UND
REGENERATION
VON
ANTIRRHINUM
.
24
2.3.13
SEQUENZIERUNGEN
.
24
2.3.14
SEQUENZANALYSEN
.
24
3
ERGEBNISSE
_
27
3.1
D
ETEKTION
VON
C
/
S
-
REGULATORISCHEN
E
LEMENTEN
IN
DER
FLO
P
ROMOTORREGION
.
27
3.2
D
AS
AT
REICHE
FLO-P
ROMOTORREGION
-F
RAGMENT
(-94/-2
13)
INTERAGIERT
SPEZIFISCH
MIT
KERNPROTEINEXTRAKTEN
.
28
3.3
Z
WEI
VERSCHIEDENE
C
DNA
S
WURDEN
IN
EINEM
S
OUTH
-
WESTERN
-
SCREENING
MIT
DEM
FLO-P
ROMOTORREGION
-F
RAGMENT
(-94/-213)
ISOLIERT
.
29
3.4
S
EQUENZANALYSE
DER
C
DNA
S
,
DIE
AUS
DER
A
NTIRRHINUM
I
NFLORESZENZ
-
E
XPRESSIONSBANK
ISOLIERT
WURDEN
.
31
3.4.1
DIE
1,6
KB
LANGE
CDNA,
HMR1
ZEIGT
HOHE
HOMOLOGIE
ZU
PFLANZLICHEN
HMG-I/Y
DNA-BINDEPROTEINEN
.
31
3.4.2
DIE
1,1
KB
LANGE
CDNA,
SAP1
BESITZT
AUSSER
EINEM
'
AT-HOOK
'
KEINE
BEKANNTEN
SEQUENZMOTIVE
.
37
3.5
SAP
1
-VERWANDTE
PROTEINE
AUS
ANTIRRHINUM,
ARABIDOPSIS,
SLNAPIS
UND
ORYZA
39
3.5.1
ISOLIERUNG
VON
SAPL-HOMOLOGEN
GENEN
AUS
ANTIRRHINUM
.
39
3.5.2
ISOLIERUNG
VON
MUTMASSLICHEN
SAP
1
-HOMOLOGEN
GENEN
AUS
ARABIDOPSIS
.
40
,
3.6
D
IE
E
XPRESSION
VON
HMR1
UND
SAP1
IN
A
NTIRRHINUM
.
48
3.6.1
NORTHERN
BLOT-ANALYSEN
VON
HMR1
UND
SAP!
.
48
3.6.2
IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
VON
HMR1
.
51
3.7
P
ROTEINEXPRESSION
VON
HMR1
UND
SAPI
IN
E.
COU
.
53
3.8
B
INDESTUDIEN
MIT
SAP1
.
55
3.8.1
SAP1
BINDET
IM
NATIVEN
ZUSTAND
UND
MIT
SEHR
HOHER
AFFINITAET
AN
DAS
FLO
PROMOTORREGION-FRAGMENT
(-2131-94)
.
55
3.8.2
SAP1
BINDET
SCHEINBAR
KOOPERATIV
AN
DAS
FLO-PROMOTORREGION-FRAGMENT
(-941-213)
.
56
3.9
H
ERSTELLUNG
VON
TRANSGENEN
P
FLANZEN
,
DIE
HMR1
UND
SAPI
KONSTITUTIV
EXPRIMIEREN
.
58
3.9.1
TRANSFORMATION
VON
PHYG35S::HMRLSE
UND
PHYG35S::HMRLAS
.
59
3.9.2
TRANSFORMATION
VON
PHYG35S::SAPLSE
UNDPHYG35S::SAPLAS
.
59
INHALTSVERZEICHNIS
3.9.3
BEOBACHTETE
PHAENOTYPISCHE
VERAENDERUNGEN
AN
DEN
PFLANZEN
DIE
PHYG35S::HMRLAS
ENTHALTEN
.
60
4
DISKUSSION
.
63
4.1
D
ER
B
EREICH
(-21
3/-94)
DER
FW-P
ROMOTORREGION
ENTHAELT
CIS
-
E
LEMENTE
,
DIE
MOEGLICHERWEISE
AN
DER
REGULATION
VON
FLO
BETEILIGT
SIND
.
63
4.2
S
OWOHL
HMRI
ALS
AUCH
SAP1
ENTHALTEN
C
HARAKTERISTIKEN
VON
NUKLEAREN
P
ROTEINEN
WIE
K
ERNLOKALISATIONSSIGNALE
UND
AT
HOOKS
.
64
4.3
HMR1
UND
SAPI
SCHEINEN
TROTZ
IHRER
UNTERSCHIEDLICHEN
S
TRUKTUR
UND
AT
HOOK
-K
OPIENZAHL
AEHNLICHE
E
IGENSCHAFTEN
IN
B
EZUG
AUF
DNA-B
INDUNG
ZU
BESITZEN
.
66
4.3.1
MOEGLICHE
INTERAKTIONEN
VON
HMRI
MIT
CHROMATIN
UND
KERN-PROTEINEN
.
70
4.3.2
HMRI
UND
SAP1
BINDEN
PRAEFERENTIELL,
ABER
WAHRSCHEINLICH
NICHT
SEQUENZSPEZIFLSCH
AN
DNA
.
71
4.4
ES
KONNTEN
IN
ARAB1DOPS1S
KEINE
ORTHOLOGEN
GENE
VON
SAP1
AUS
ANTIRRHINUM
GEFUNDEN
WERDEN
.
72
4.5
S
IND
HMRI
UND
SAPI
AN
DER
R
EGULATION
VON
FLO
UND
AN
DEM
P
HASENWECHSEL
VON
VEGETATIVEM
W
ACHSTUM
ZU
GENERATIVEM
W
ACHSTUM
BETEILIGT?
.
73
4.6
M
OEGLICHE
F
UNKTION
VON
HMRI
IN
DER
R
EPRIMIERUNG
VON
K
LASSE
B-G
ENEN
IM
AEUBEREN
W
IRTEL
.
74
5
ZUSAMMENFASSUNG
77
6
AUSBLICK
_
79
7
LITERATURVERZEICHNIS
.
81
8 ANHANG
.
91
8.1
C
DNA-S
EQUENZEN
.
91
8.2
O
LIGONUCLEOTIDSEQUENZEN
.
93
8.3
F
ACHBEGRIFFE
.
94
8.4
N
OMENKLATUR
VON
G
ENEN
UND
G
ENPRODUKTEN
.
94
8.5
A
BKUERZUNGEN
.
94 |
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