Apoptose in normalen und malignen lymphatischen Geweben:
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1999
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INHALTSUEBERSICHT
SEITE
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1
B
UND
T-LYMPHOZYTEN,
ZELLEN
DES
IMMUNSYSTEMS
.
1
1.1.1
DIE ENTWICKLUNG
VON
B-
UND
T-LYMPHOZYTEN
.
2
1.1.2
DIE
ADAPTIVE
IMMUNANTWORT
VON
B-LYMPHOZYTEN
.
3
1.1.3
AUFBAU
UND
FUNKTION
VON
IMMUNGLOBULINEN.
6
1.2
DER
ZELLTOD
VON
LYMPHOZYTEN,
VERURSACHT
DURCH
APOPTOSE
ODER
NEKROSE
.
7
1.2.1
AUFGABEN
APOPTOTISCHER
VORGAENGE
.
10
1.2.2
INDUKTION
UND
NACHWEIS
APOPTOTISCHER
ZELLEN
.
10
1.2.3
EINFLUSS
VON
PROTEINEN
DER
BCL-2-FAMILIE
AUF
DEN
VERLAUF
APOPTOTISCHER
VORGAENGE
.
13
1.2.4
DER
EINFLUSS
VON
P53
AUF
APOPTOTISCHE
VORGAENGE
.
14
1.2.5
DER
EINFLUSS
VON
C-MYC
AUF
APOPTOTISCHE
VORGAENGE
.
15
1.3
MALIGNE
LYMPHOME
.
15
1.3.1
KEIMZENTRUMS-LYMPHOME
,
FCL-F
(FOLLICULAR
CENTRE
LYMPHOMA).
.
16
1.3.2
MANTELZELL-LYMPHOME,
MCL
(MANTLE
CELL
LYMPHOMA).
16
1.3.3
DIFFUSE
GROSSZELLIGE B-ZELL
LYMPHOME
VOM
ZENTROBLASTISCHEN
TYP,
DLBCL-CB
(DIFFUSE
LARGE
B-CELL
LYMPHOMA,
CENTROBLASTIC
TYPE).
16
1.3.4
DIFFUSE
GROSSZELLIGE
B-ZELL
LYMPHOME
VOM
IMMUNOBLASTISCHEN
TYP,
DLBCL-IB
(DIFFUSE
LARGE
B-CELL
LYMPHOMA,
IMMUNOBLASTIC
TYP)
.
16
1.3.5
BURKITT
UND
BURKITT-AEHNLICHE
LYMPHOME
(BL-LIKE)
.
17
1.4
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
.
18
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
19
2.1
GEWEBEMATERIAL
.
19
2.2
SILANISIEREN
DER
OBJ
EKTTRAEGER
.
21
2.3
SCHNEIDEN
DER
PARAFFINGEWEBE
UND
BESCHRIFTEN
DER
OBJEKTTRAEGER.
21
2.4
ENTPARAFFINISIEREN
DER
GEWEBE
.
22
2.5
TROCKNEN
UND
FIXIEREN
DER
CRYOSTATGEWEBE
.
22
2.6
UNTERDRUECKEN
UNSPEZIFISCHER
FAERBUNGEN
.
22
2.6.1
UNTERDRUECKEN
DER
ENDOGENEN
PEROXIDASEN
(YYQUENCHEN
"
)
.
23
2.6.2
UNTERDRUECKEN
DER
ENDOGENEN
ALKALISCHEN
PHOSPHATASEN
.
23
2.7
PERFORATION
DER
ZELLEN
UND
DEMASKIERUNG
DER
ANTIGENE
.
23
2.7.1
MIKROWELLENBEHANDLUNG
.
23
2.7.2
PROTEINVERDAU
MIT
TRYPSIN
.
24
2.8
DIE
IMMUNFAERBUNG
.
24
2.8.1
ANSETZTEN
DER
ANTIKOERPERLOESUNGEN
.
24
2.8.2
DIE
APOPTOSEFARBUNG
.
25
2.8.3
EINFACHE
IMMUNFARBUNG
.
26
2.8.4
EINSATZ
VON
PEROXIDASE-ANTI-PEROXIDASE-KOMPLEXEN
.
27
2.8.5
DIE
DOPPELFARBUNG:
GEKOPPELTER
NACHWEIS
VON
APOPTOTISCHEN
UND
PHAGOZYTIERENDEN
ZELLEN
AUF
EINEM
GEWEBESCHNITT
.
27
2.8.6
BEWEIS
DER
SPEZIFISCHEN
BINDUNG
VON
ANTI-C-MYC UND ANTI-BCL-X.
27
2.9
HERSTELLEN
DER
FAERBESUBSTRATLOESUNGEN
.
29
2.9.1
FAERBESUBSTRATLOESUNGEN
FUER
MIT
MEERRETTICHPEROXIDASE
KONJUGIERTE
ANTIKOERPER
.
29
2.9.1.1
3-AMINO-9-ETHYLCARBAZOLE
(AEC)
.
29
2.9.1.2
3,3-DIAMINOBENZIDIN
4
HYDROCHLORID
(DAB)
.
29
2.9.2
FAERBELOESUNGEN
FUER
MIT
ALKALISCHER
PHOSPHATASE
KONJUGIERTE
ANTIKOERPER
.
30
2.9.2.1
AP
SUBSTRAT-TABLETTEN
YYGRUEN
"
.
30
2.9.2.2
NEUFUCHSIN
.
30
2.9.3
GEGENFARBEN
DER
GEWEBE
.
31
2.9.3.1
GEGENFARBEN
MIT
METHYLGRUEN
.
31
2.9.3.2
GEGENFARBEN
MIT
HAEMALAUN
.
32
2.10
MIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNGEN
.
32
2.12.1
ERRECHNUNG
DER
ZELLZAHL
PRO
BLICKFELDFLAECHE
BEI
EINER
250-FACHEN
VERGROESSERUNG
.
33
3.
ERGEBNISSE
.
34
3.1
IMMUNHISTOLOGISCHE
ORIENTIERUNG
IN
NORMALEN
LYMPHATISCHEN
GEWEBEN
.
34
3.1.1
AUSWAHL
EINES
GEEIGNETEN ANTIKOERPERS
ZUR
DARSTELLUNG
VON
PHAGOZYTIERENDEN
ZELLEN
AUF
GEFRIERSCHNITTEN
UND
PARAFFINGEWEBEN
.
34
3.2
NACHWEIS
VON
MAKROPHAGEN
IN
SITU
.
36
3.2.1
HAEUFIGKEIT
VON
MAKROPHAGEN
IN
NORMALEN
UND
MALIGNEN
LYMPHATISCHEN
GEWEBEN
.
37
3.3
NACHWEIS
VON
APOPTOTISCHEN
ZELLEN
IN
SITU
.
38
3.4
HAEUFIGKEIT
VON
APOPTOTISCHEN
ZELLEN
IN
NORMALEN
UND
MALIGNEN
LYMPHATISCHEN
GEWEBEN
.
39
3.4.1
KORRELATION
IM
AUFTRETEN
APOPTOTISCHER
ZELLEN
UND
MAKROPHAGEN.
.
42
3.5
AUSWAHL
DER
ANTIKOERPER
FUER
DEN
NACHWEIS
APOPTOSE-ASSOZIIERTER
PROTEINE
.
45
3.6
DIE
EXPRESSION
APOPTOSE-ASSOZIIERTER
PROTEINE
IN
SITU
.
45
3.6.1
EXPRESSION
VON
KI-67
.
45
3.6.2
EXPRESSION
VON
BCL-X
.
48
3.6.3
EXPRESSION
VON
BCL-2
.
52
3.6.4
DIE
EXPRESSION
VON
C-MYC
.
54
3.6.5
EXPRESSION
VON
BAK
UND
P53
.
57
3.7.1
VERGLEICH
DER
EXPRESSION
VON
KI-67
UND
BCL-X
.
58
3.7.2
VERGLEICH
DER
EXPRESSION
VON
KI-67
UND
C-MYC
.
59
4.
DISKUSSION
.
60
4.1
APOPTOSE
UND
PHAGOZYTOSE
IN
NORMALEN
LYMPHATISCHEN
GEWEBEN
UND
MALIGNEN
LYMPHOMEN
.
60
4.2
KORRELATION:
APOPTOSEINDEX
UND
APOPTOSE-ASSOZIIERTE
PROTEINE
.
63
4.2.1
KORRELATION:
APOPTOSEINDEX
UND
DIE
EXPRESSION
VON
KI-67
.
63
4.2.2
KORRELATION:
APOPTOSEINDEX
UND
DIE
EXPRESSION
VON
BCL-2
.
64
4.2.3
KORRELATION:
APOPTOSEINDEX
UND
DIE EXPRESSION
VON
C-MYC
.
64
4.2.4
KORRELATION:
APOPTOSEINDEX
UND
DIE
EXPRESSION
VON
P53
.
66
4.2.5
KORRELATION:
APOPTOSEINDEX
UND
DIE
EXPRESSION
VON
BCL-X
.
67
4.3
INTERAKTION
DER
APOPTOSE-REGULIERENDEN
PROTEINE
.
68
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
70
6.
ANHANG.
.
71
7.
LITERATURVERZEICHNIS
.
97
8.
DANKSAGUNG
.
108
9.
LEBENSLAUF.
.
109 |
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