Prozessierung und Reparatur von tRNAs in menschlichen Mitochondrien:
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| Format: | Book |
| Language: | German |
| Published: |
München
Utz, Wiss.
1999
|
| Series: | Biochemie
|
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| Item Description: | Zugl.: München, Univ., Fak. für Biologie, Diss., 1999 |
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I
NHALTSVERZEICHNIS
1
E
INLEITUNG
.
1
1.1
DIE
ROLLE
VON
TRANSFER-RNA
IN
DER
PROTEINBIOSYNTHESE
1
1.2
KEMCODIERTE
UND
BAKTERIELLE
TRNAS
3
1.2.1
STRUKTUR
UND
MODIFIKATIONEN
.3
1.2.2
BIOGENESE
.
4
1.3
MITOCHONDRIALE
TRNAS
6
1.3.1
MITOCHONDRIEN
.
6
1.3.2
REIFUNG
.8
1.3.3
BESONDERHEITEN
.
8
1.3.4
RNA-EDITIERUNG
VON
MITOCHONDRIALEN
TRNAS
.9
1.3.5
UEBERLAPPENDE
TRNAS
IN
MITOCHONDRIEN
.
11
1.4
ZIELSETZUNG
DIESER
ARBEIT
13
2
MATERIAL
UND
METHODEN
.
15
2.1
MATERIAL
15
2.1.1
FEINCHEMIKALIEN
.15
2.1.2
ENZYME
.
15
2.1.3
PUFFER
.15
2.1.4
NUKLEOTIDE
.17
2.1.5
RADIOCHEMIKALIEN
.18
2.1.6
OLIGONUKLEOTIDE
.18
2.1.7
VEKTOREN
.
19
2.1.8
MEDIEN
.
19
2.1.9
BAKTERIENSTAMME,
HEFE
UND
ZELLKULTUREN
.19
2.1.10
MATERIALIEN
FUER
DIE
SAEULENCHROMATOGRAPHIE
.
20
2.1.11
GERATE
.
20
2.1.12
SONSTIGES
.
20
2.2
METHODEN
21
2.2.1
DNA-METHODEN
.
21
2.2.1.1
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
DNA/RNA
DURCH
ABSORPTIONSSPEKTROSKOPIE
.
21
2.2.1.2
POLYMERASE-KETTENREAKTION
.
21
2.2.1.3
RESTRIKTION
VON
DNA
.
21
2.2.1.4
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
ZUR
AUFTRENNUNG
VON
DNA
.
21
II
I
NHALTSVERZEICHNIS
2.2.1.5
REINIGUNG
UND
FAELLUNG
VON
DNA/RNA
.
22
2.2.1.6
ISOLATION
VON
DNA
AUS
"LOW-ME/TING
'
-AGAROSEGELEN
.
22
2.2.1.7
KLONIERUNG
VON
DNA
.
22
2.2.1.8
SEQUENZIERUNG
VON
DNA
.
23
2.2.2
RNA-METHODEN
.
23
2.2.2.1
DENATURIERENDE
POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
ZUR
AUFTRENNUNG
VON
RNA
.
23
22.2.2
ISOLATION
VON
RNA
AUS
POLYACRYLAMIDGELEN
.
23
2
2.2.3
/N-VFTRO-TRANSKRIPTION
.
23
2.2.2.4
5
'
-ENDMARKIERUNG
VON
RNA
.
24
2.2.2.5
AUTORADIOGRAPHIE
.
25
2.2.2.6
IN
VITRO-PROZESSIERUNG
VON
TRNA-PRIMAERTRANSKRIPTEN
.
25
2.2.2.7
/N-VRTRO-NUKLEOTIDEINBAU
AN
TRNA-TRANSKRIPTE
.
25
2.2.2.8
3
'
-SEQUENZANALYSE
VON
TRNAS
.
26
2.2.3
PROTEIN-METHODEN
.
28
2.2.3.1
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
PROTEINEN
NACH
BRADFORD
(1976)
.
28
2.2.3.2
PRAEPARATION
VON
MITOCHONDRIEN
.
28
2.2.3.3
HERSTELLUNG
EINES
MITOCHONDRIALEN
S100-PROTEINEXTRAKTES
.
29
2.2.3.4
KATIONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
.
30
3
E
RGEBNISSE
.
31
3.1
PROZESSIERUNG
VON
UEBERLAPPENDEN
TRNA-PRLMAERTRANSKRIPTEN
IN
MITOCHONDRIEN
32
3.1.1
PROZESSIERUNG
DES
UEBERLAPPENDEN
MENSCHLICHEN
TRNA
TY
'/TRNA
CR
'-PRIMAERTRANSKRIPTES
.
32
3.1.2
PROZESSIERUNG
DES
UEBERLAPPENDEN
PRIMAERTRANSKRIPTES
TRNA
S
*7TRNA
L
"
'
AUS
OPOSSUM
.
33
3.1.3
VERGLEICH
DER
PROZESSIERUNG
VON
UEBERLAPPENDEN
UND
NICHT-UEBERLAPPENDEN
PRIMAERTRANSKRIPTEN
.
35
3.1.4
BESTIMMUNG
DER
GENAUEN
SPALTPOSITION
DES
UEBERLAPPENDEN
TRNA
TY
7TRNA
C
"
-
PRIMAERTRANSKRIPTES.
37
3.2
EDITIERUNG
UND
REPARATUR
AM
3
'
-ENDE
MITOCHONDRIALER
TRNAS.
.
39
3.2.1
EDITIERUNG
VON
TRNA
T)
*-1
.
39
3.2.2
REPARATUR
VON
TRNA
TYF
-2
UND
TRNA
TYR
-4
TRANSKRIPTEN
.
43
3.2.3
MATRIZENABHAENGIGE
REPARATUR
VON
VERKUERZTEN
TRNA
T,R
-TRANSKRIPTEN?
.
45
3.2.4
/N-V/TRO-NUKLEOTIDEINBAU
AN
TRNA
TYR
-MINIHELICES
.52
3.2.5
ALLGEMEINE
REPARATUR
VON
MITOCHONDRIALEN
TRNAS
?
.
54
3.2.5.1
REPARATUR
VON
TRNA
PHE
.
55
3.2.5.2
REPARATUR
VON
TRNAYY
.
57
3.2.6
IST
DER
REPARATURMECHANISMUS
IN
ANDEREN
SPEZIES
VORHANDEN?
.
58
3.3
PARTIELLE
REINIGUNG
VON
SCHNITT
UND
EINBAUAKTIVITAET
.
61
I
NHALTSVERZEICHNIS
III
4
D
ISKUSSION
.
67
4.1
PROZESSIERUNG
UEBERLAPPENDER
PRIMAERTRANSKRIPTE
IN
MITOCHONDRIEN
.
67
4.1.1
PROZESSIERUNG
DER
UEBERLAPPENDEN
MENSCHLICHEN
TRNAE
R
'
7TRNA
C,
'
.
67
4.1.2
WIRD
IN
UEBERLAPPENDEN
PRIMAERTRANSKRIPTEN
DIE
5'
ODER
DIE
3
'
-
GELEGENE
TRNA
ERKANNT
?
.
69
4.2
EDITIERUNG
UND
REPARATUR
VON
TRNAS
.
72
4.2.1
EDITIERUNG
DER
3'-VERKUERZTEN
TRNA
T|IR
-1
.
72
4.2.2
ALLGEMEINE
REPARATUR
VON
3
'
-VERKUERZTEN
TRNAS
.
73
4.2.3
AUF
WELCHE
POSITIONEN
AM
3
'
-ENDE
VON
TRNAS
ERSTRECKT
SICH
REPARATUR?
.
74
4.2.4
MATRIZENUNABHAENGIGER
RNA-REPARATURMECHANISMUS
.
75
4.2.5
SUBSTRATERKENNUNG
UND
GENAUIGKEIT
DES
RNA-REPARATURSYSTEM
.
76
4.2.6
DAS
TRNA-REPARATURSYSTEM
UND
EVENTUELL
BETEILIGTE
KOMPONENTEN
.
78
4.2.7
DYNAMISCHES
MODELL
ZUR
REPARATUR
AM
3'-ENDE
VON
TRNAS
.
82
4.2.8
RELEVANZ
EINER
ALLGEMEINEN
REPARATUR
VON
TRNAS
.
85
4.2.9
REPARATUR
UND
DIE
EVOLUTION
VON
UEBERLAPPENDEN
TRNA-GENEN
.
87
4.3
PARTIELLE
REINIGUNG
VON
SCHNITT
UND
EINBAUAKTIVITAET
88
5
Z
USAMMENFASSUNG
.
91
6
S
UMMARY
.
93
7
A
BKUERZUNGEN
.
95
8
L
ITERATUR
.
97
9
D
ANKSAGUNG
.
109
10
L
EBENSLAUF
.
110 |
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