Diagnostik und Prävalenz von Infektionen mit Mikrosporidien bei Patienten mit HIV-Infektion unter besonderer Berücksichtigung molekularbiologischer Methoden:
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1
1.1.
GESCHICHTE
DER
MIKROSPORIDIENINFEKTIONEN
1
1.2.
TAXONOMIE
2
1.3.
BIOLOGISCHE
CHARAKTERISTIK
UND
ENTWICKLUNGSZYKLUS
DER
MIKROSPORIDIEN
5
1.3.1.
SPOREN
6
1.3.2.
MEROGONY
7
1.3.3.
SPOROGONY
8
1.3.4.
GENUS-SPEZIFISCHE
BESONDERHEITEN
DER
MENSCHENPATHOGENEN
ARTEN
8
1.3.4.1.
ENTEROZYTOZOON
SPP.
8
1.3.4.2.
ENCEPHALITOZOON
SPP.
9
1.3.4.3.
NOSEMA
SPP.
11
1.3.4.4.
VITTAFORMA
SPP.
12
1.3.4.5.
PLEISTOPHORA
SPP.
UND
TRACHIPLEISTOPHORA
SPP.
13
1.3.4.6.
UNBEKANNTE
GATTUNGEN
(MICROSPORIDIUM
SPP.)
13
1.4.
EPIDEMIOLOGIE
15
1.4.1.
MIKROSPORIDIOSIS
IN
NICHT
HIV-INFIZIERTEN
PATIENTEN
OHNE
ODER
MIT
UNKLAREN
IMMUNDEFEKT
IMMUNDEFEKT
15
1.4.2.
MIKROSPORIDIOSIS
IN
NICHT
HIV-INFIZIERTEN
PATIENTEN
MIT
IMMUNDEFEKT
18
1.4.3.
MIKROSPORIDIENINFEKTIONEN
BEI
PATIENTEN
MIT
HLV-INFEKTION
19
1.4.4.
HERKUNFT
UND
UEBERTRAGUNG
DER
HUMANEN
MIKROSPORIDIOSEN
20
1.5.
KLINIK
DER
MIKROSPORIDIENINFEKTIONEN
22
1.5.1.
GASTROINTESTINALE
UND
BILIAERE
INFEKTIONEN
22
1.5.1.1.
ENTEROCYTOZOON
BIENEUSI
22
1.5.1.2.
ENCEPHALITOZOON
SPP.
23
1.5.1.3.
ANDERE
ARTEN
25
1.5.2.
HEPATITIS
UND
PERITONITIS
26
1.5.3.
OKULARE
INFEKTIONEN
26
1.5.4.
MYOSITIS
26
1.5.5.
INFEKTIONEN
DER
NIEREN
UND
ABLEITENDEN
HAMWEGE
27
1.5.6.
CEREBRALE
INFEKTIONEN
27
1.5.7.
SYSTEMISCHE
INFEKTIONEN
27
2.
FRAGESTELLUNG
UND
ZIELSETZUNG
30
3.
PATIENTEN
UND
METHODEN
31
3.1.
PATIENTENKOLLEKTIV
31
3.1.1.
DUODENUM
31
3.1.2.
STUHL
31
3.1.3.
ANDERE
MATERIALIEN
32
3.2.
GEWEBEENTNAHME
32
3.3.
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
33
3.3.1.
GEWEBEBEHANDLUNG
UND
LAGERUNG
33
3.3.2.
VORBEREITUNG
DER
ULTRADUENNSCHNITTE
33
3.3.3.
UNTERSUCHUNG
DER
ULTRADUENNSCHNITTE
34
3.4.
LICHTMIKROSKOPIE
DER
PARAFFINSCHNITTE
3S
3.4.1.
GEWEBEBEHANDLUNG
UND
LAGERUNG
3
5
3.4.2.
HERSTELLUNG
VON
PARAFFINSCHNITTEN
35
3.4.3.
FAERBUNG
UND
UNTERSUCHUNG
DER
PARAFFINSCHNITTE
35
3.5.
POLYMERASE
CHAIN
REACTION
(PCR)
36
3.5.1.
GEWEBEBEHANDLUNG
UND
LAGERUNG
36
3.5.2.
DNA-ISOLIERUNG
AUS
BIOPSIEN
36
3.5.3.
VORBEREITUNG
UND
DURCHFUEHRUNG
DER
PCR
36
3.5.4.
HERSTELLUNG
VON
POSITIVKONTROLLEN
DURCH
KLONIERUNG
DER
SSU-RRNA
37
3.5.4.1.
PCR
AMPLIFIKATION
DER
SSU-RRNA
VON
ENTEROCYTOZOON
BIENEUSI
UND
ENCEPHALITOZOON
INTESTINALIS
37
3.5.4.2.
GELEXTRAKTION
UND
KLONIERUNG
DER
PCR-PRODUKTE
37
3.5.5.
SPEZIFISCHE
DNA-AMPLIFIKATION
FUER
ENTEROCYTOZOON
BIENEUSI
UND
ENCEPHALITOZOON
INTESTINALIS
38
3.5.6.
DARSTELLUNG
DER
PCR-PRODUKTE
38
3.5.7.
SOUTHERN
BLOT
HYBRIDISIERUNG
DER
PCR-PRODUKTE
39
3.6.
BEHANDLUNG
DER
STUHLPROBEN
40
3.6.1.
HERSTELLUNG
EINES
SEDIMENTS
40
3.6.2.
FAERBUNG
UND
UNTERSUCHUNG
DER
OBJEKTTRAEGER
40
4.
ERGEBNISSE
41
4.1.
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
41
4.2.
STUHLUNTERSUCHUNGEN
48
4.3.
PCR
UND
LICHTMIKROSKOPIE
IN
DUODENALEN
BIOPSIEN
SO
4.3.1.
ERGEBNISSE
DER
KONIERUNGEN
DER
SSU-RRNA
GENE
VON
ENTEROCYTOZOON
BIENEUSI
UND
ENCEPHALITOZOON
INTESTINALIS
50
4.3.2.
ERGEBNISSE
DER
LICHTMIKROSKOPIE
UND
SPEZIFISCHEN
DNA
AMPLIFIKATION
FUER
ENTEROCYTOZOON
BIENEUSI
UND
ENCEPHALITOZOON
INTESTINALIS
50
4.4.
ANDERE
MATERIALIEN
54
4.4.1.
NASENSEKRET
54
4.4.2.
KONJUNKTIVALABSTRICH
54
4.4.3.
SPUTUM
54
4.4.4.
URIN
55
4.4.5.
GALLENSEKRET
55
2
4.5.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
57
5.
DISKUSSION
60
5.1.
BEDEUTUNG
DER
MIKROSPORIDIENINFEKTIONEN
BEI
HIV-PATIENTEN
61
5.2.
DIAGNOSTIK
DER
HUMANEN
MIKROSPORIDIENINFEKTIONEN
5.2.1.
TRANSMISSIONS-ELEKTRONENMIKROSKOPIE
5.2.2.
LICHTMIKROSKOPIE
_
65
5.2.2.1.
STUHL-UND
ZYTOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
66
5.2.2.2.
HISTOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
68
5.2.3.
POLYMERASE
CHAIN
REACTION
(PCR)
69
5.2.4
VERGLEICH
DER
METHODEN
78
6.
ZUSAMMENFASSUNG
79
7.
LITERATURVERZEICHNIS
81
8.
VORABVEROEFFENTLICHUNGEN
LEBENSLAUF |
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