Untersuchungen zur Entwicklung zellulärer und humoraler Immunreaktionen bei Enten (Anas platyrhynchos, L., 1758):
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABKUERZUNGEN
8
A.
EINLEITUNG
10
B.
LITERATURUEBERSICHT
11
1.
DAS
IMMUNSYSTEM
DER
ENTE
11
1.
1.
DAS
LYMPHATISCHE
SYSTEM
'
11
1.
1.
1.
PRIMAERE
LYMPHATISCHE
ORGANE
11
1.
1.2.
SEKUNDAERE
LYMPHATISCHE
ORGANE
UND
GEWEBE
13
1.
2.
DAS
UNSPEZIFISCHE
IMMUNSYSTEM
16
1.
2.
1.
ZELLULAERE
BESTANDTEILE
DES
UNSPEZIFISCHEN
IMMUNSYSTEMS
16
1.
2.
2.
HUMORALE
BESTANDTEILE
DES
UNSPEZIFISCHEN
IMMUNSYSTEMS
18
1.3.
DAS
SPEZIFISCHE
IMMUNSYSTEM
18
1.
3.
1.
HUMORALE
IMMUNANTWORT
18
1.
3.
2.
ZELLVERMITTELTE
IMMUNANTWORT
20
1.
3.
3.
FAKTOREN,
DIE
IMMUNREAKTIONEN
BEEINFLUSSEN
21
2.
ZUR
METHODIK
22
2.
1.
SACCHAROMYCES-ZYTOTOXIZITAETSTEST
22
2.
2.
MESSUNGEN
DER
IMMUNGLOBULINE
IM
SERUM
22
2.
3.
UNTERSUCHUNGEN
ZU
IMMUNGLOBULIN(IG)-POSITIVEN
ZELLEN
23
2.
4.
LEUKOZYTENTRANSFORMATIONSTEST
(LTT)
23
2.
4.
1.
GRUNDLAGEN
DES
LEUKOZYTENTRANSFORMATIONSTESTS
23
2.
4.
2.
FAKTOREN,
DIE
DEN
LEUKOZYTENTRANSFORMATIONSTEST
BEEINFLUSSEN
25
2.
4.
2.
1.
HERKUNFT
UND
ART
DER
ZELLEN
25
2.
4.
2.
2.
ISOLIERUNG
DER
LEUKOZYTEN
26
2.
4.
2.
3.
SERUMZUSATZ
26
2.
4.
2.
4.
MITOGENE
26
2.
4.
3.
DER
LTT
UNTER
VERWENDUNG
VON
3-(4,5-DIMETHYLTHIAZOL-2-YL)-2,5
DIPHENYLTETRAZOLIUMBROMID
(MTT)
27
2.
4.
3.
1.
ABHAENGIGKEIT
DER
MTT-FORMAZANBILDUNG
VON
VERSUCHSVARIABLEN
28
2.
4.
3.
2.
ANWENDUNG
DES
LTT-MTT
BEIM
GEFLUEGEL
29
3.
ZUSAMMENFASSUNG
UND
AUFGABENSTELLUNG
29
C.
EIGENE
UNTERSUCHUNGEN
33
1.
MATERIAL
UND
METHODEN
33
1.1.
VERSUCHSTIERE
33
1.
1.
1.
KANINCHEN
33
1.
1.
2.
ENTEN
33
1.
1.
3.
EMBRYONEN
33
1.
1.4.
ENTENSERUM
34
1.
2.
SACCHAROMYCES-ZYTOTOXIZITAETSTEST
34
1.2.
1.
HERSTELLUNG
DER
SACCHAROMYCES-CEREVISIAE-SUSPENSION
34
1.
2.
2.
GEWINNUNG
DER
VOLLBLUTPROBEN
34
1.
2.
3.
DURCHFUEHRUNG
34
1.
2.
4.
AUSWERTUNG
35
1.
3.
ISOLIERUNG
UND
REINIGUNG
VON
IGM,
IGY
UND
IGY(AFC)
SOWIE
DEREN
SCHWERER
KETTEN
35
1.
3.
1.
ISOLIERUNG
UND
REINIGUNG
VON
IGM,
IGY
UND
IGY(AFC)
AUS
ENTENSERUM
35
1.
3.
2.
ISOLIERUNG
DER
SCHWEREN
KETTEN
AUS
IGM,
IGY
UND
IGY(AFC)
36
1.
3.
3.
REINHEITSUEBERPRUEFUNG
UND
PROTEINBESTIMMUNG
37
1.
3.
3.
1.
IMMIMELEKTROPHORESE
(IE)
38
1.
3.
3.
2.
SDS-PAGE
38
1.
3.
3.
3.
PROTEINBESTIMMUNG
38
1.
4.
HERSTELLUNGEN
VON
ANTI
SEREN
GEGEN
DIE
ENTEN-SERUMPROTEINE
UND
DIE
SCHWEREN
KETTEN
VON
IGM,
IGY
UND
IGY(AFC)
DER
ENTEN
39
1.
4.
1.
PROTOKOLLE
DER
IMMUNISIERUNGEN
39
1.
4.
2.
UEBERPRUEFUNG
DER
ANTISEREN
39
1.5.
QUANTITATIVE
BESTIMMUNG
DER
IMMUNGLOBULINE
IN
SEREN
40
1.
5.
1.
GEWINNUNG
DER
SERUMPROBEN
UND
BEHANDLUNG
40
1.
5.
2.
DURCHFUEHRUNG
DER
EINFACHEN
RADIALEN
IMMUNDIFFUSION
40
1.
5.
3.
AUSWERTUNG
40
1.
6.
UNTERSUCHUNGEN
ZU
IG-POSITIVEN
ZELLEN
41
1.
6.
1.
GEWINNUNG
DER
ORGANPROBEN
41
1.
6.
2.
ANFERTIGUNG
DER
KRYOSTATSCHNITTEN
41
1.
6.
3.
ABLAUF
DER
INDIREKTEN
PEROXIDASE-METHODE
(IPO-METHODE)
42
1.
6.
4.
AUSWERTUNGSVERFAHREN
43
1.
7.
LTT
UNTER
VERWENDUNG
VON
MTT
43
1.7.
1.
GEWINNUNG
DER
BLUTPROBEN
UND
LEUKOZYTEN
43
1.
7.
2.
ANLEGEN
DER
LEUKOZYTENKULTUREN
UND
INKUBATION
44
1.
7.
2.
1.
VERGLEICH
VERSCHIEDENER
MITOGENE
UND
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
KONZENTRATION
45
1.
7.
2.
2.
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
ZELLDICHTE
45
1.
7.
2.
3.
ERMITTLUNG
DES
OPTIMALEN
SERUMS
UND
DER
OPTIMALEN
KONZENTRATION
45
1.
7.
2.
4.
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
INKUBATIONSDAUER
45
1.
7.
3.
UNTERSUCHUNG
ZUR
IN-VITRO
LEUKOZYTENTRANSFORMATIONSFAEHIGKEIT
VON
ENTEN
VERSCHIEDENER
ALTERSGRUPPEN
45
1.
7.
4.
ABLESEN
DES
LTT-MTT
46
1.
7.
4.
1.
ANSETZEN
UND
ZUGABE
DER
MTT-LOESUNG
46
1.
7.
4.
2.
ERMITTLUNG
DER
MTT-KONZENTRATIONEN
46
1.
7.
4.
3.
ERMITTLUNG
DER
MTT-LOESUNGSMITTEL
UND
DER
OPTISCHEN
DICHTE
46
1.
7.
5.
AUSWERTUNGSVERFAHREN
48
1.
7.
5.
1.
BERECHNUNG
DER
ZELLPROLIFERATION
(%)
48
1.
7.
5.
2.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
48
2.
ERGEBNISSE
49
2.
1.
UNSPEZIFISCHE
ZELLULAERE
IMMUNITAET
DER
ENTENEMBRYONEN
UND
DER
ENTEN
49
2.
2.
REINIGUNG
DER
IMMUNGLOBULINE
UND
HERSTELLUNG
DER
ANTISEREN
50
2.
2.
1.
ISOLIERUNG
UND
REINIGUNG
VON
IGM,
IGY
UND
IGY(AFC)
50
2.
2.
2.
ISOLIERUNG
DER
SCHWEREN
KETTEN
VON
IGM,
IGY
UND
LGY(AFC)
54
2.
2.
3.
HERSTELLUNG
UND
UEBERPRUEFUNG
DER
ANTISEREN
54
2.
3.
KONZENTRATIONSBESTIMMUNGEN
DER
IMMUNGLOBULINE
IM
ENTENSERUM
58
2.
3.
1.
IGM-KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
59
2.
3.
2.
IGY-KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
60
2.
3.
3.
IGM
UND
IGY
-
GESAMTKONZENTRATIONEN
IM
ENTENSERUM
61
2.
4.
UNTERSUCHUNGEN
ZU
IG-POSITIVEN
ZELLEN
62
2.
4.
1.
IGM
UND
IGY-POSITIVE
ZELLEN
IN
DER
BURSA
FABRICII
DER
ENTEN
ZU
VERSCHIEDENEN
ZEITPUNKTEN
DES
FETALLEBENS
UND
NACH
DEM
SCHLUPF
62
2.
4.
2.
IGM
UND
IGY-POSITIVE
ZELLEN
IM
THYMUS
63
2.
4.
3.
IGM
UND
IGY-POSITIVE
ZELLEN
IN
DER
MILZ
63
2.
4.
4.
IGM
UND
IGY-POSITIVE
ZELLEN
IN
DEN
HARDERSCHEN
DRUESEN
64
2.
4.
5.
IGM
UND
IGY-POSITIVE
ZELLEN
IM
DARM
64
2.
5.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
ZELLULAEREN
IMMUNITAET
DER
ENTE
MIT
HILFE
DES
LTTS
UNTER
VERWENDUNG
VON
MTT
(LTT-MTT)
66
2.
5.
1.
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
TESTBEDINGUNGEN
FUER
DEN
LTT-MTT
66
2.
5.
1.
1.
VERGLEICH
VERSCHIEDENER
MITOGENE
UND
DEREN
KONZENTRATIONEN
66
2.
5.
1.
2.
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
ZELLDICHTE
68
2.
5.
1.
3.
VERGLEICH
DER
SEREN
UND
DEREN
KONZENTRATIONEN
68
2.
5.
1.
4.
ERMITTLUNGEN
DER
OPTIMALEN
INKUBATIONSDAUER
BEI
VERWENDUNG
VON
PHA
70
2.
5.
1.
5.
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
MTT-KONZENTRATION
71
2.
5.
1.
6.
ERMITTLUNG
DES
OPTIMALEN
MTT-LOESUNGSMITTELS
72
2.
5.
2.
ZELLULAERE
IMMUNITAET
VON
ENTEN
VERSCHIEDENER
ALTERSSTUFEN
73
D.
DISKUSSION
75
1.
UNSPEZIFISCHE
ZELLULAERE
IMMUNITAET
DER
ENTENEMBRYONEN
UND
DER
ENTEN
75
2.
REINIGUNG
VON
ENTEN-IMMUNGLOBULINEN
UND
HERSTELLUNG
DER
ANTISEREN
75
3.
KONZENTRATIONSBESTIMMUNGEN
DER
IMMUNGLOBULINE
IM
ENTENSERUM
76
4.
NACHWEIS
IG-POSITIVER
ZELLEN
79
5.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
ZELLULAEREN
IMMUNITAET
DER
ENTE
MIT
HILFE
DES
LTTS
UNTER
VERWENDUNG
VON
MTT
80
5.
1.
ERMITTLUNG
DER
OPTIMALEN
TESTBEDINGUNGEN
FUER
LTT-MTT
81
5.
2.
ZELLULAERE
IMMUNITAET
VON
ENTEN
VERSCHIEDENER
ALTERSSTUFEN
83
E.
ZUSAMMENFASSUNG
/
SUMMARY
84
F.
LITERATURVERZEICHNIS
88
G.
ANHANG
104 |
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| author | Wang, Junwei |
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