Validierung und Anwendung einer verbesserten durchflußzytometrischen Methode zur Quantifizierung extrem niedriger Leukozytenkonzentrationen:
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1998
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
_
1
1.1
M
ETHODEN
ZUR
L
EUKOZYTENDEPLETION
.
1
1.1.1
SEDIMENTATION
.
1
1.1.2
ZENTRIFUGATION
.
2
1.1.3
WASCHEN
VON
ERYTHROZYTENKONZENTRATEN
.
2
1.1.4
GEFRIER-AUFTAU-WASCH-VERFAHREN
.
2
1,1.5
BEDSIDE
FILTRATION
.
2
1.1.6
LABORFILTRATION
.
3
1.2
I
NDIKATIONEN
ZUR
A
NWENDUNG
LEUKOZYTENDEPLETIERTER
B
LUTPRAEPARATIONEN
.
.3
1.2.1
FEBRILE
NICHTHAEMOLYTISCHE
TRANSFUSIONSREAKTIONEN
(FNHTR)
.
3
1.2.2
TRANSFUSIONSASSOZIIERTE
LUNGENFUNKTIONSSTOERUNG
.
4
1.2.3
ALLOIMMUNISIERUNG
.
5
1.2.4
TRANSFUSIONSASSOZIIERTE
INFEKTIONEN
.
6
1.2.5
TRANSFUSIONSASSOZIIERTE
IMMUNMODULATION
.
8
1.2.6
TRANSFUESIONSASSOZIIERTE
YYGRAFT-VERSUS-HOST
"
ERKRANKUNG
(GVHD)
.
9
13
Q
UANTIFIZIERUNG
SEHR
NIEDRIGER
L
EUKOZYTENKONZENTRATIONEN
.
10
1.3.1
FLUORESZENZMIKROSKOPIE
.
11
1.3.2
NAGEOTTE-ZAEHLKAMMER
.
11
1.3.3
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
.
11
1.3.4
POLYMERASE
CHAIN
REACTION
(PCR)
.
12
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
_
13
2.1
M
ATERIAL
.
13
2.2
M
ETHODEN
.
15
2.2.1
HERSTELLUNG
DER
BLUTPRAEPARATE
.
15
2.2.2
PROBENGEWINNUNG
.
16
2.2.3
NAGEOTTEKAMMER-ZAEHLUNG
.
16
2.2.4
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
ZAEHLUNG
NACH
ANREICHERUNG
.
17
2.2.4.1
MAGNETISCHE
ANREICHERUNG
.
17
2.2.4.2
DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE
ANALYSE
.
18
2.2.5
VERSUCHSAUFBAU
UND
AUSWERTUNG
.
25
2.2.5.1
KONTROLLE
DER
SOLLWERTE
.
25
2.2.5.2
EVALUIERUNG
DER
NAGEOTTE-ZAEHLKAMMER
METHODE
.
26
2.2.53
EVALUIERUNG
DER
MACS-DURCHFLUSSZYTOMETER-METHODE
.
26
2.2.5.4
FILTEREFFIZIENZEN
.
28
2.2.5.6
STATISTIK
UND
AUSWERTUNG
.
29
3.
ERGEBNISSE
.
30
3.1
S
OLLWERTE
.
30
3.2
E
VALUIERUNG
DER
N
AGEOTTE
-Z
AEHLKAMMER
M
ETHODE
.
32
3.3
E
VALUIERUNG
DER
MACS-D
URCHFLUBZYTOMETER
-M
ETHODE
.
------------
35
3.3.1
RICHTIGKEIT,
LINEARITAET
UND
NACHWEISGRENZE
.
35
3.3.2
PRAEZISION
.
39
3.4
N
AGEOTTEZAEHLKAMMER
UND
D
URCHFLUBZYTOMETER
IM
V
ERGLEICH
.
43
3.5
F
ILTRATIONSEFFIZIENZ
KOMMERZIELLER
P
OLYESTERFILTER
.
45
3.5.1
SEPACELL
RZ-200
BL
NACH
LAGERUNG
.
45
3.5.2
SEPACELL
RZ-200
BL
VOR
LAGERUNG
.
46
3.5.3
SEPACELL
R-200II
AS
NACH
LAGERUNG
.
47
3.5.4
SEPACELL
R-200
II
AS
VOR
LAGERUNG
.
47
3.6
L
EUKOZYTENDIFFERENZIERUNG
.
49
4.1
S
TELLENWERT
DER
VORGESTELLTEN
M
ETHODE
.
-
51
4.2
A
NWENDUNG
DER
VORGESTELLTEN
M
ETHODE
ZUR
Q
UALITAETSKONTROLLE
57
4.3
P
HAENOTYPISIERUNG
VON
R
ESTLEUKOZYTEN
.
58
5.
ZUSAMMENFASSUNG
_
62
6.
ANHANG
64
7.
LITERATURVERZEICHNIS
67
8.
LEBENSLAUF,
81 |
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