Fluoreszenz In-situ-Hybridisierung: Untersuchungen an Abstrichmaterial, Leukoplakien und Plattenepithelkarzinomen des Kopf-Hals-Bereichs
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1998
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG
1.1 PLATTENEPITHELKARZINOME IM KOPF-HALS-BEREICH
1.2. PRAEVENTION UND CHEMOPRAEVENTION
1.3 SCREENINGUNTERSUCHUNGEN AUF TUMORFRUEHSTADIEN
1.3.1 ABSTRICHE IM KOPF-HALS-BEREICH
1.4 DIE TUMORENTSTEHUNG IM KOPF-HALS-BEREICH
1.4.1 MULTISTEP-KARZINOGENESE
1.4.2 FELDKANZERISIERUNG
1.5 CHROMOSOMALE ABERRATIONEN UND METHODEN ZU IHRER BESTIMMUNG
1.6 BISHERIGE ZYTOGENETISCHE UNTERSUCHUNGEN AN KOPF-HALS-TUMOREN
1.7 FRAGESTELLUNG
1.7.1 ETABLIERUNG DER FISH AN MUNDSCHLEIMHAUT-BUERSTENABSTRICHEN
1.7.2 WISSENSCHAFTLICHE UND KLINISCHE FRAGESTELLUNG
2. MATERIAL
2.1 GEWEBEPROBEN UND ABSTRICHPROBEN
2.2 ZENTROMERSPEZIFISCHE DNA-PROBEN
2.3 ENZYME UND NUKLEINSAEUREN
2.4 MARKIERUNGS- UND NACHWEISSYSTEME
2.5 ANTIKOERPER
2.6 GERAETE
2.7 CHEMIKALIEN
2.8 MEDIEN UND PUFFER
3. METHODEN
3.1 PRAEPARATION DER PLASMID-DNA
3.1.1 HERSTELLUNG VON KOMPETENTEN ZELLEN
3.1.2 TRANSFORMATION KOMPETENTER ZELLEN
3.1.3 MIDIPRAEPARATION VON PLASMID-DNA
3.2 MARKIERUNG VON NUKLEINSAEUREN
3.2.1 BIOTINMARKIERUNG MITTELS NICKTRANSLATION
3.2.2 REINIGUNG UEBER SEPHADEX G50 SAEULE
3.2.3 DOT-BLOT-ASSAY
3.2.4 AETHANOLFAELLUNG
3.3 HERSTELLUNG DER GEWEBE- UND ZELLPRAEPARATE
3.3.1 SCHNEIDEN VON GEFRIERSCHNITTPRAEPARATEN
3.3.2 HAEMATOXVLIN-EOSIN-FAERBUNG
3.3.3 ALKALISCHE PHOSPHATASE-ANTI-ALKALISCHE PHOSPHATASE (APAAP)
METHODE
3.4 ZVTOSPINPRAEPARATE
3.4.1 ZVTOSPINPRAEPARATE AUS ABSTRICHEN
3.4.2 ZVTOSPINPRAEPARATE AUS BIOPSIEN
3.4.3 DEHYDRATISIERUNG UND FIXIERUNG
3.5 FLUORESZENZ IN S/FU-HYBRIDISIERUNG
B
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32
4
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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IN M
INHALTSVERZEICHNIS
3.5.1 DENATURIERUNG UND HYBRIDISIERUNG UEBER NACHT 32
3.5.2 FLUORESZENZ-NACHWEIS 34
3.5.3 MIKROSKOPISCHE AUSWERTUNG DER FISH-ERGEBMSSE 34
4. ERGEBNISSE 36
4.1 CYTOKERATIN-FAERBUNGEN AN BIOPSIEN UND ABSTRICHEN 3B
4.2 ANWENDUNG DER FISH AN BUERSTEN-ABSTRICHPRAEPARATEN 3B
4.3 FISH-ERGEBNISSE VON 11 KOPF-HALS-TUMOREN 38
4.3.1 AUSWERTUNGSKRITERIEN FUER DIE FISH-ANALVSE 38
4.3.2 FISH-ERGEBNISSE VON 11 TUMORBIOPSIEN 41
4.4 ERGEBNISSE DER FISH AN DEN TUMORABSTRICHEN 4B
4.5 FISH-ERGEBNISSE AN ABSTRICHEN VON KONTROLLPERSONEN UND VERSCHIEDENEN
RISIKOGRUPPEN 51
4.5.1 FISH-ERGEBNISSE AN ABSTRICHEN VON 30 KONTROLLPERSONEN 51
4.5.2 FISH-ERGEBNISSE AN TUMORFERNER SCHLEIMHAUT 54
4.5.3 ERGEBNISSE DER FISH-ANALYSE IM ABSTRICH VON 50 RISIKOPERSONEN 50
4.5.4 ERGEBNISSE DER FISH-ANALVSE IM ABSTRICH VON 30 TUMORPATIENTEN IN
DER TUMORNACHSORGE 63
4.6 FISH-ERGEBNISSE AN 16 LEUKOPLAKIE-BIOPSIEN B6
5. DISKUSSION 69
5.1 STANDARDISIERUNG DER FISH AN ABSTRICHEN FUER DIE ROUTINEMAESSIGE
ANWENDUNG, 70
5.2 MOEGLICHE URSACHEN DER UNTERSCHIEDLICHEN FISH-ERGEBNISSE VON
L'UMORBIOPSIE
UND TUMORABSTRICH IN PLATTENEPITHELKARZINOMEN DES KOPF-HALS-BEREICLIS 70
5.3 FISH-UNTERSUCHUNGEN AM MUNDBODENABSTRICH VON 30
NIEMALSRAUCHERN/NICHTTRINKERN (KONTROLLGRUPPE) 72
5.4 TUMORFERNE SCHLEIMHAUTABSTRICHE 73
5.5 50 PATIENTEN MIT NIKOTIN-/ALKOHOLABUSUS (RISIKOPERSONEN):
ABSTRICHERGEBNISSE 74
5.6 FISH-UNTERSUCHUNGEN AM MUNDBODENABSTRICH UND
WANGENSCHLEIMHAUTABSTRICH VON 30 TUMORPATIENTEN IN DER TUMORNACHSORGE 75
5.7 NUMERISCHE CHROMOSOMENABERRATIONEN IN LEUKOPLAKIEN 77
5.8 FISH UND CHEMOPRAEVENTION 79
5.9 MODELL ZUR CHROMOSOMALEN NUMERISCHEN ABERRATIONSBILDUNG
IN DER KARZINOGENESE 80
.10 FISH-PERSPEKTIVEN 81
. 11 SCHLUSSFOLGERUNG 82
6. ZUSAMMENFASSUNG 83
7. LITERATURVERZEICHNIS 84
8. LEBENSLAUF 95
9. DANKSAGUNG
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