Staphylococcus-aureus-a-Toxin-induzierte Leukotrienbildung in polymorphkernigen neutrophilen Granulozyten des Kaninchens:
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1.
ABKUERZUNGEN
1
2.
EINLEITUNG
2
2.1.
BAKTERIELLE
INFEKTIONEN
2
2.2.
STAPHYLOCOCCUS
AUREUS
3
2.2.1
PATHOGENITAETSFAKTOREN
VON
S.
AUREUS
2.3.
POLYMORPHKERNIGE
NEUTROPHILE
GRANULOZYTEN
S
2.4.
LEUKOTRIENE
7
2.5.
PROBLEMATIK
UND
AUFGABENSTELLUNG
10
3.
MATERIAL
UND
METHODIK
13
3.1.
GEWINNUNG
DER
KANINCHEN
PMN
13
3.1.1.
MATERIAL
13
3.1.2.
REAGENTIEN
14
3.I.3.I.
ISOLIERUNG
DER
PMN
14
3.1.3.2.
BESTIMMUNG
DER
ZELLAUSBEUTE
15
3.1.3.3.
DIFFERENZIERUNG
DER
LEUKOZYTEN
16
3.1.4.
INKUBATIONSBEDINGUNGEN
16
3.2.
ISOLIERUNG
UND
AUFARBEITUNG
DER
LEUKOTRIENE
18
3.2.1.
MATERIAL
18
3.2.2.
EXTRAKTION
DER
LEUKOTRIENE
18
3.2.3.
WIEDERFINDUNGSRATE
19
3.3.
BESTIMMUNG
DER
ZELLVIABILITAET
20
3.3.1.
VORUNTERSUCHUNGEN
20
3.3.2.
LDH-BESTIMMUNG
21
3.3.3.
KALIUMIONEN-BESTIMMUNG
22
3.4.
QUALITATIVE
UND
QUANTITATIVE
BESTIMMUNG
DER
LEUKOTRIENE
23
3.4.1.
MATERIAL
23
3.4.1.1.
HPLC-ANLAGE
23
3.4.I.2.
LOESUNGSMITTEL
23
3.4.2.
UMKEHRPHASEN-HPLC
24
3.4.3.
IDENTIFIZIERUNG
DER
LEUKOTRIENE
25
3.4
3.1.
HPLC-KALIBRIERUNG
25
3.4.3.2.
LTB
4
-RADLOIMMUNOASSAY
27
3.5.
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
PASSIVEN
EINSTROM
VON
IONEN
UND
MOLEKULEN
DURCH
DIE
ZELLMEMBRAN
29
3.5.1.
MATERIAL
29
3.5.2.
VERSUCHSANORDNUNG
29
3.5.3.
MESSUNG
DER
RADIOAKTIVITAET
30
3.6.
AUSWERTUNG
UND
STATISTIK
30
4.
ERGEBNISSE
4.1.
BILDUNG
VON
LTB*
IN
PMN
DURCH
S.-AUREUS-A-TOXIN
31
4.1.1.
DOSISBEZIEHUNG
DER
STIMULATION
31
4.1.2.
ZEITABHAENGIGKEIT
DER
STIMULATION
34
4.1.3.
HEMMUNG
DER
STIMULATION
MIT
ANTL-OT-TOXIN-AK
35
4.1.4.
W-OXIDATION
VON
LTB
36
4.2.
STIMULATION
VON
PMN
MIT
A23187
UND
FMLP
39
4.2.1.
KALZIUM-IONOPHOR
A23187
39
4.2.2.
LEUKOTAXIN
FMLP
40
4.3.
EINFLUSS
DES
EXTRAZELLULAEREN
KALZIUMS
41
4.3.1.
STIMULATION
IN
KALZIUMFREIEM
MILIEU
41
4.3.2.
STIMULATION
IN
KALZIUMHALTIGEM
MILIEU
41
4.3.3.
BEDEUTUNG
DER
AN-/ABWESENHELT
EXTRAZELLULAEREN
KALZIUMS
43
4.4.
WIRKUNG
VON
CALMODULIN
UND
KALZIUMKANALANTAGONISTEN
43
4.4.1
TRIFLUOPERAZLN
44
4.4.2.
W7
45
4.4.3.
VERAPAMIL
46
4.5.
EINFLUSS
DER
REAKTIONSTEMPERATUR
AUF
DIE
LTB
-
BILDUNG
47
4.6.
PMN-MEMBRANPERMEABILITAET
NACH
A-TOXIN-EINWIRKUNG
48
4.6.1.
VERSTAERKTE
PASSIVE
PERMEABILITAET
FUER
KALZIUM-IONEN
48
4.6.2.
INDIREKTE
GROESSENBESTIMMUNG
DER
A-TOXLN-MEMBRANPOREN
50
5.
DISKUSSION
5.1.
LTB
T
-BILDUNG
IN
PMN
NACH
STIMULATION
MIT
A-TOXIN
52
5.2.
MECHANISMEN
DER
AKTIVIERUNG
DES
5-LIPOXYGENASE
STOFFWECHSELS
53
5.2.1.
REZEPTORMEDLLERTE
FREISETZUNG
VON
AA-PRODUKTEN
53
5.2.2.
WIRKUNG
VON
KALZIUM-LONOPHOREN
55
5.2.3.
AKTIVIERUNG
DES
ARACHIDONSAEUREKASKADE
DURCH
A-TOXIN
55
5.3.
PATHOPHYSLOLOGISCHE
BEDEUTUNG
DER
LTB
4
-BILDUNG
58
5.4.
TRANSMEMBRANOESE
POREN
ALS
ALLGEMEINES
BIOLOGISCHES
PRINZIP
60
6.
ZUSAMMENFASSUNG
62
7.
LITERATUR
63
8.
DANKSAGUNG
76
9.
LEBENSLAUF
77 |
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