Durchflußzytometrische Charakterisierung der Populationsdynamik von Acinetobacter calcoaceticus und Ralstonia eutropha:
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Leipzig ; Halle
UFZ
1998
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Nr. 1998,16 |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1.
EINLEITUNG
1
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
8
2.1
MIKROORGANISMEN
8
2.1.1
BATCH-KULTIVIERUNGEN
MIT
ACETAT
ALS
KOHLENSTOFF
UND
ENERGIEQUELLE
8
2.1.2
KULTIVIERUNGEN
MIT
PHENOL
ALS
KOHLENSTOFF-UND
ENERGIEQUELLE
8
2.1.2.1
BATCH-KULTIVIERUNG
9
2.1.2.2
TRANS/ENT-STATE-KULTIVIERUNG
IM
CHEMOSTATEN
9
2.1.2.3
ZUSATZ
EINER
ZWEITEN
ENERGIEQUELLE:
FORMIAT-GRADIENT
10
2.1.2.4
SUBSTRATHEMMUNG
MIT
NUTRISTAT-EXPERIMENTEN
10
2.1.3
BESTIMMUNG
DER
BIOMASSEKONZENTRATION
UND
ZELLFIXIERUNG
12
2.2
FLUORESZENZFARBSTOFFE
UND
FLUORESZENZFAERBUNG
12
2.2.1
RRNS-FAERBUNG
13
2.2.1.1
VERWENDETE
OLIGONUKLEOTIDSONDEN
13
2.2.1.2
IN
S/TU-HYBRIDISIERUNG
AUF
OBJEKTTRAEGERN
14
2.2.1.3
IN
S/TU-HYBRIDISIERUNG
IN
SUSPENSION
15
2.2.2
DNS-FAERBUNG
15
2.3
FLUORESZENZMIKROSKOPIE
UND-SPEKTROSKOPIE
16
2.4
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
16
2.4.1
AUSWERTUNG
DER
ZYTOMETRISCHEN
DATEN
19
2.4.2
POPULATIONSMODELLE
21
3.
ERGEBNISSE
22
3.1
ACINETOBACTER
CALCOACETICUS
69
V
22
3.1.1
VERSUCHE
MIT
ACETAT
ALS
KOHLENSTOFF
UND
ENERGIEQUELLE
22
3.1.1.1
AMPLIFIKATION
DES
FLUORESZENZSIGNALS
23
3.1.1.2
RRNS-GEHALT
BEI
EINER
BATCH-KULTIVIERUNG
26
3.1.2
VERSUCHE
MIT
PHENOL
ALS
KOHLENSTOFF-UND
ENERGIEQUELLE
27
3.1.2.1
ERGEBNISSE
AUS
BATCH-KULTIVIERUNG
27
3.1.2.2
ERGEBNISSE
DER
FRANS/ENF-STATE-EXPERIMENTE
IM
CHEMOSTATEN
30
3.2
RALSTONIA
EUTROPHA
JMP134
34
3.2.1
VERSUCHE
MIT
ACETAT
ALS
KOHLENSTOFF
UND
ENERGIEQUELLE
34
3.2.2
VERSUCHE
MIT
PHENOL
ALS
KOHLENSTOFF
UND
ENERGIEQUELLE
35
3.2.2.1
ERGEBNISSE
AUS
BATCH-KULTIVIERUNG
35
3.2.2.2
ERGEBNISSE
DER
FRANS/ENF-STATE-EXPERIMENTE
IM
CHEMOSTATEN
37
3.2.2.3
ZUSATZ
EINER
ZWEITEN
ENERGIEQUELLE:
FORMIAT-GRADIENT
42
3.2.2.4
SUBSTRATHEMMUNG
MIT
NUTRISTAT-EXPERIMENTEN
43
3.3
MISCHKULTUR
AUS
A.
CALCOACETICUS
69
V
UND
R.
EUTROPHA
JMP134
46
3.3.1
VERSUCHE
MIT
ACETAT
ALS
KOHLENSTOFF
UND
ENERGIEQUELLE
46
3.3.1.1
IN
SZTU-HYBRIDISIERUNG
MIT
UNTERSCHIEDLICH
MARKIERTEN
OLIGONUKLEOTIDSONDEN
46
3.3.1.2
TRENNUNG
DER
MISCHPOPULATION
DURCH
DNS-FAERBUNG
51
3.3.2
VERSUCHE
MIT
PHENOL
ALS
KOHLENSTOFF
UND
ENERGIEQUELLE
54
3.3.2.1
EXPERIMENTE
IM
CHEMOSTATEN
54
3.3.2.2
MODELLIERUNG
58
VERZEICHNISSE
4.
DISKUSSION
63
4.1
POPULATIONSDYNAMIK
BEI
ACINETOBACTER
CALCOACETICUS
69
V
63
4.1.1
CHARAKTERISIERUNG
EINZELNER
ZELLEN
BEI
BATCH
VERSUCHEN
MIT
DEM
SUBSTRAT
ACETAT
63
4.1.1.1
QUANTIFIZIERUNG
DER
SONDENVERMITTELTEN
FLUORESZENZ
64
4.1.1.2
SIGNALVERSTAERKUNG
65
4.1.2
RRNS
UND
DNS-GEHALT
BEIM
WACHSTUM
AUF
PHENOL
67
4.2
POPULATIONSDYNAMIK
BEI
RALSTONIA
EUTROPHA
JMP134
69
4.2.1
KINETIK
BEI
BATCH-VERSUCHEN
MIT
DEM
SUBSTRAT
ACETAT
69
4.2.2
RRNS
UND
DNS
GEHALT
BEIM
WACHSTUM
AUF
PHENOL
70
4.2.2.1
SITUATION
BEI
DER
BATCB-KULTIVIERUNG
70
4.2.2.2
EINFLUSS
DER
DURCHFLUSSRATE
AUF
DEN
DNS
UND
RRNS-GEHALT
72
4.2.2.3
EINFLUSS
EINES
FORMIAT-GRADIENTEN
AUF
DEN
DNS
UND
RRNS-GEHALT
73
4.2.2.4
EINFLUSS
DER
SUBSTRATHEMMUNG
AUF
DEN
DNS
UND
RRNS-GEHALT
74
4.3
CHARAKTERISIERUNG
DER
POPUIATIONSDYNAMIK
EINER
MISCHKULTUR
75
4.3.1
POPULATIONSDYNAMIK
DER
MISCHKULTUR
MIT
ACETAT
ALS
KOHLENSTOFF
UND
ENERGIEQUELLE
75
4.3.2
POPULATIONSDYNAMIK
DER
MISCHKULTUR
MIT
PHENOL
ALS
KOHLENSTOFF
UND
ENERGIEQUELLE
77
4.4
AUSBLICK
79
5.
ZUSAMMENFASSUNG
81
6.
LITERATUR
83
II |
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