Expression von lokalen Regulationsfaktoren im Ovar des Rindes:
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| Published: |
München
Utz, Wiss.
1998
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| Series: | Biologie
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INHALTSVERZEICHNIS
1
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
5
EINLEITUNG
UND
AUFGABENSTELLUNG
8
1
LITERATUR
9
1.1
DER
BRUNSTZYKLUS
DES
RINDES
9
1.1.1
FOLLIKULOGENESE
9
1.1.2
OVULATION
10
1.1.3
CORPUS
LUTEUM
10
1.1.4
LUTEOLYSE
11
1.1.5
VERLAUF
UND
ENDOKRINE
REGULATION
DES
ZYKLUS
11
1.2
ANGIOGENESE
16
1.3
WACHSTUMSFAKTOREN
18
1.3.1
FIBROBLASTEN-WACHSTUMSFAKTOREN(FGF)
19
1.3.2
VASKULAERER
ENDOTHEL-WACHSTUMSFAKTOR
(VEGF)
20
1.3.3
TRANSFORMIERENDER
WACHSTUMSFAKTOR
ALPHA
(TGF-A)
21
1.3.4
TRANSFORMIERENDER
WACHSTUMSFAKTOR
BETA
(TGF-SS)
22
1.3.5
INSULIN-AEHNLICHE
WACHSTUMSFAKTOREN
(IGF)
23
1.4
REGULATIVE
FAKTOREN
DER
EXTRAZELLULAEREN
MATRIX
(ECM)
25
1.4.1
MATRIX-METALLOPROTEINASEN
(MMP)
26
1.4.2
GEWEBE-METALLOPROTEINASE
INHIBITOREN
(TIMP)
27
1.4.3
PLASMINOGEN-AKTIVATOREN
(PA)
28
1.4.4
PLASMINOGEN-AKTIVATOR-INHIBITOREN
(PAI)
28
2
MATERIAL
30
2.1
LABORTECHNIK
30
2.2
BIOCHEMICA
31
2.3
KITS
33
2.4
ENZYME
UND
SUBSTRATE
34
2.5
MARKER
34
2.6
PUFFER
UND
LOESUNGEN
34
2.7
PRIMERSEQUENZEN
FUER
DIE
PCR
36
INHALTSVERZEICHNIS
3
METHODIK
38
3.1
GEWINNUNG
DES
PROBENMATERIALS
38
3.1.1
FOLLIKELGEWINNUNG
38
3.1.2
CL-GEWINNUNG
UND-KLASSIFIZIERUNG
39
3.2
INDUZIERTE
SUPEROVULATION,
OVAREKTOMIE
39
3.3
HORMONANALYTIK
42
3.3.1
ENZYMIMMUNTEST
(EIA)
42
3.3.2
RADIOIMMUNTEST
(RIA)
45
3.4
IMMUNHISTOCHEMIE
45
3.5
MOLEKULARBIOLOGISCHE
TECHNIKEN
46
3.5.1
VERMEIDUNG
EINER
RIBONUKLEASE-KONTAMINATION
46
3.5.2
RNA-EXTRAKTION
46
3.5.2.1
RNA-EXTRAKTION
MIT
TRIZOLYY
46
3.5.2.2
MRNA-EXTRAKTION
MIT
QUICK
PREP*
MICRO
MRNA
PURIFICATION
KIT
47
3.5.2.3
RNA-EXTRAKTION
MIT
RNEASY
48
3.5.3
RNA-AGAROSEGEL
50
3.5.4
REVERSE
TRANSKRIPTION/POLYMERASE-KETTENREAKTION
(RT-PCR)
51
3.5.4.1
REVERSE
TRANSKRIPTION
51
3.5.4.2
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
52
3.5.4.3
ANALYSE
DER
PCR-PRODUKTE
55
3.5.4.4
PRIMERSEQUENZEN
55
3.5.4.5
VALIDIERUNG
DER
RT-PCR
55
3.5.4.6UBIQUITIN-PCR
60
3.5.4.7
DARSTELLUNG
DER
PCR-ERGEBNISSE
62
3.5.5
RIBONUCLEASE
PROTECTION
ASSAY
(RPA)
63
3.5.5.1
SUBKLONIERUNG
64
3.5.5.2
PLASMID-MINIPRAEPARATION
65
3.5.5.3
LINEARISIERUNG
65
3.5.5.4
IN
VITRO
TRANSKRIPTION
66
3.5.5.5
DURCHFUEHRUNG
DES
RIBONUCLEASE
PROTECTION
ASSAY
67
3.6
DATENVERARBEITUNG
69
4
ERGEBNISSE
70
4.1
FOLLIKELKLASSIFIZIERUNG,
STEROIDHORMONMESSUNG
70
4.2
EXPRESSION
DER
AROMATASE
73
4.3
EXPRESSION
DER
GONADOTROPIN-REZEPTOREN
74
4.3.1
FSH-REZEPTOR
(FSH-R)
74
INHALTSVERZEICHNIS
4.3.2
LH-REZEPTOR
(LH-R)
75
4.4
EXPRESSION
DER
WACHSTUMSFAKTOREN
UND
IHRER
REZEPTOREN
77
4.4.1
SAURER
FIBROBLASTEN-WACHSTUMSFAKTOR
(AFGF)
77
4.4.2
BASISCHER
FIBROBLASTEN-WACHSTUMSFAKTOR
(BFGF)
79
4.4.2.1
EXPRESSION
79
4.4.2.2
HISTOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
81
4.4.3
FIBROBLASTEN-WACHSTUMSFAKTOR-REZEPTOR
(FGF-R)
85
4.4.4
VASKULAERER
ENDOTHEL-WACHSTUMSFAKTOR
(VEGF)
87
4.4.4.1
EXPRESSION
IM
FOLLIKEL
87
4.4.4.2
PROTEINGEHALT
IN
DER
FOLLIKELFLUESSIGKEIT
87
4.4.4.3
EXPRESSION
IM
CI
88
4.4.5
TRANSFORMIERENDER
WACHSTUMSFAKTOR
ALPHA
(TGF-A)
90
4.4.6
TRANSFORMIERENDER
WACHSTUMSFAKTOR
BETA
(TGF-SS)
91
4.4.7
INSULIN-AEHNLICHER
WACHSTUMSFAKTOR
1
(IGF
1)
93
4.4.7.1
EXPRESSION
93
4.4.7.2
HISTOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
95
4.4.8
INSULIN-AEHNLICHER
WACHSTUMSFAKTOR
2
(IGF-2)
97
4.4.9
INSULIN-AEHNLICHER
WACHSTUMSFAKTOR
REZEPTOR
TYP
I
(IGFR-1)
99
4.5
EXPRESSION
DER
REGULATIVEN
FAKTOREN DER
EXTRAZELLULAEREN
MATRIX
101
4.5.1
MATRIX-METALLOPROTEINASE-1
(MMP-1)
101
4.5.2
GEWEBE-METALLOPROTEINASE
INHIBITOR
1
(TIMP-1)
102
4.5.3
UROKINASE-PLASMINOGEN-AKTIVATOR(UPA)
104
4.5.4
PLASMINOGEN-AKTIVATOR-INHIBITOR-1
(PAI-1)
106
5
DISKUSSION
108
5.1
METHODIK
108
5.2
AROMATASE
111
5.3
GONADOTROPIN-REZEPTOREN
112
5.4
WACHSTUMSFAKTOREN
114
5.4.1
FIBROBLASTEN-WACHSTUMSFAKTOREN(FGF)
114
5.4.2
VASKULAERER
ENDOTHEL-WACHSTUMSFAKTOR
(VEGF)
116
5.4.3
TRANSFORMIERENDER
WACHSTUMSFAKTOR
ALPHA
(TGF-A)
118
5.4.4
TRANSFORMIERENDER
WACHSTUMSFAKTOR
BETA
(TGF-SS)
119
5.4.5
INSULIN-AEHNLICHE
WACHSTUMSFAKTOREN
(IGF)
121
5.5
REGULATIVE
FAKTOREN
DER
EXTRAZELLULAEREN
MATRIX
(ECM)
124
5.5.1
MATRIX-METALLOPROTEINASE-1
(MMP-1)
124
5.5.2
GEWEBE-METALLOPROTEINASE
INHIBITOR-1
(TIMP-1)
124
5.5.3
UROKINASE-PLASMINOGEN-AKTIVATOR
(UPA)
125
5.5.4
PLASMINOGEN-AKTIVATOR-INHIBITOR-1
(PAI-1)
126
INHALTSVERZEICHNIS
5.6
ZUSAMMENWIRKEN
DER
EINZELNEN
FAKTOREN,
AUSBLICK
127
6
ZUSAMMENFASSUNG
131
7
SUMMARY
134
8
LITERATURVERZEICHNIS
137
DANKSAGUNG
161
LEBENSLAUF
162 |
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