Trisomie 12 bei chronischen lymphatischen Leukämien der B-Zell Reihe: eine zytogenetische Analyse mit Hilfe der Fluoreszenz in situ Hybridisierung
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1998
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
L ABKUERZUNGSVERZEICHNIS J
2. EINLEITUNG 2
2.1 KLASSISCHE ZYTOGENETISCHE ANALYSE IN DER HAEMATOLOGIE UND ONKOLOGIE 2
2.2 FLUORESZENZ IN SITU HYBRIDISIEUMG - EINE NEUE METHODE IN DER
TUMORZYTOGENETIK 3
2.3 CHRONISCHE LYMPHATISCHE LEUKAEMIEN 5
3. ZIELSETZUNG DER ARBEIT 9
4. MATERIAL UND METHODIK 10
4.1 PATIENTEN 10
4.2 KONTROLLGRUPPE 10
4.3 ZELLISOLIERUNG UND ZELLKULTUR 12
4.4 ZELLEMTE 12
4.5 PRAEPARATION VON METAPHASE-CHROMOSOMEN UND INTERPHASEKERNEN 13
4.6 BLUTAUSSTRICHE 14
4.7 DNA-SONDEN 14
4.8 DNA-MARKIERUNG 15
4.8.1 NICK-TRANSLATION 15
4.8.2 PRAEPARATION EINER SEPHADEX-SAEULE 16
4.9 FLUORESZENZ IN SITU HYBRIDISIERUNG (FISH) 16
4.9.1 VORBEHANDLUNG DER PRAEPARATE FUER FLUORESZENZ ISH 16
4.9.2 AUFARBEITUNG DER REPETITIVEN DNA-SONDEN 17
4.9.3 CHROMOSOMALE IN SITU SUPPRESSIONS (CISS) HYBRIDISIERUNG 17
4.9.4 DENATURIERUNG DER CHROMOSOMEN 18
4.9.5 WASCHSCHRITTE 18
4.9.6 DETEKTION DER DNA-SONDEN 18
4.9.7 GEGENFAERBUNG 19
4.9.8 SIGNALAMPLIFIKATION 19
4.10 FLUORESZENZ-MIKROSKOPIE UND PHOTOGRAPHISCHE DOKUMENTATION 20
4.11 MEDIEN UND LOESUNGEN 21
4.12 MATERIAL UND GERAETE 22
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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5. ERGEBNISSE 25
5.1 VORBEHANDLUNG DER PRAEPARATE FUER FLUORESZENZ ISH 25
5.2 ZWEIFARBEN FLUORESZENZ ISH 25
5.2.1 KONTROLLEN 26
5.2.2 PATIENTEN 27
5.3 BLUTAUSSTRICHE 35
5.4 VERGLEICH DER HYBRIDISIERUNGSERGEBNISSE ZWISCHEN INTERPHASE-
ZELLEN ZYTOGENETISCHER PRAEPARATIONEN UND BLUTAUSSTRICHEN 36
5.5 HYBRIDISIERUNG MIT DER CHROMOSOM 12 SPEZIFISCHEN DNA-BIBLIOTHEK
("PAINTING-PROBE") 37
5.6 VERGLEICH DER FLUORESZENZ ISH DATEN MIT G-BAENDERUNGSANALYSEN 40
5.7 VERGLEICH DER PATIENTEN MIT B-CLL UND B-PLL 41
6
. DISKUSSION 42
6.1 DNA-SONDEN 42
6.2 VORBEHANDLUNG DER PRAEPARATE FUER FLUORESZENZ ISH 43
6.3 METHODISCHE ASPEKTE DER FLUORESZENZ ISH 44
6.4 ERGEBNISSE 44
6.4.1 KONTROLLEN 44
6.4.2 PATIENTEN 45
6.5 BLUTAUSSTRICHE 50
6.6 SCHLUSSFOLGERUNG 50
7. ZUSAMMENFASSUNG 52
8
. LITERATURVERZEICHNIS 53
8.1 IM TEXT ZITIERTE VEROEFFENTLICHUNGEN 53
8.2 EIGENE VEROEFFENTLICHUNGEN 65
8.2.1 ORIGINALARBEITEN 65
8.2.2 ABSTRACTS 65
9. LEBENSLAUF 66
10. DANKSAGUNG
67 |
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