Der Einfluß spannungsabhängiger Ionenkanäle auf die Kapazitätsmessung an Einzelzellen und die Optimierung der Auflösung in Cell-attached-Experimenten:
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1998
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VI
INHALT
1. EINLEITUNG 1
2. GRUNDLAGEN 3
2.1. EXOZYTOSE 3
2.2. SPANNUNGSABHAENGIGE MEMBRANSTROEME 6
2.3. DIE PATCH-CLAMP-TECHNIK 11
2.3.1. UNTERSUCHUNG DER EXOZYTOSE DURCH KAPAZITAETS- 13
MESSUNG
2.3.2. DIE MESSUNG DER FUSIONSPORE 17
2.3.3. BESTIMMUNG DER EIGENSCHAFTEN VON MEMBRANSTROEMEN 19
2.4. EFFEKTE SPANNUNGSABHAENGIGER MEMBRANSTROEME BEI DER 22
KAPAZITAETSMESSUNG AN ZELLMEMBRANEN
3. EXPERIMENTELLER AUFBAU UND MESSMETHODEN 26
3.1. ZELLKULTUR UND ZELLPRAEPERATION 26
3.2. WHOLE-CELL-MESSUNGEN 27
3.3. CELL-ATTACHED-MESSUNGEN 32
4. DIE MESSUNG DES EINFLUSSES SPANNUNGSABHAENGIGER IONEN 40
STROEME AUF DIE KAPAZITAETSMESSUNG AN ZELLMEMBRANEN
4.1. EIGENSCHAFTEN DES DELAYED-RECTIFIER-STROMS IN 42
NG 108-15-ZELLEN
4.1.1. LECKSTROM 42
4.1.2. DIE AKTIVIERUNGSKURVE 43
4.1.3. DER OFFENKANALSTROM 46
4.1.4. DIE ZEITKONSTANTE DER KINETIK 49
4.2. ARTEFAKTE WAEHREND DER KAPAZITAETSMESSUNG DURCH DIE 62
AKTIVIERUNG VON K-STROEMEN
5. DIE AUFLOESUNG BEI DER KAPAZITAETSMESSUNGEN IN DER 75
CELL-ATTACHED-KONFIGURATION
5.1. DIE PHASE BEI CELL-ATTACHED-MESSUNGEN 76
5.2. DAS INSTRUMENTELLE RAUSCHEN 81
5.3. DER EINFLUSS VON PIPETTE UND PIPETTENHALTER 87
5.3.1. E
N-CT-RAUSCHEN 87
5.3.2. DIELEKTRISCHES RAUSCHEN 88
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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VN
5.3.3. VERTEILTES RC-RAUSCHEN 92
5.3.4. VERGLEICH DER RAUSCHQUELLEN 94
5.4. RAUSCHEN BEI CELL-ATTACHED-MESSUNGEN 98
5.4.1. EXPERIMENTELL ERMITTELTES RAUSCHEN 98
5.4.2. DIELEKTRISCHES RAUSCHEN DER PIPETTENSPITZE 102
5.4.3. ABSCHAETZUNG DES RAUSCHENS DES MEMBRANPATCHES 103
5.4.4. VERGLEICH DER RAUSCHQUELLEN 107
5.5. AUFLOESBARKEIT DER FUSIONSPORE * 111
6. ZUSAMMENFASSUNG UND DISKUSSION 115
6.1. KAPAZITAETSMESSUNGEN BEI AKTIVIERTEN MEMBRANLEITWERTEN 116
6.2. KAPAZITAETSMESSUNGEN IN CELL-ATTACHED 120
6.2.1. DAS KAPAZITAETSRAUSCHEN BEI CELL-ATTACHED-MESSUNGEN 120
6.2.2. DIE DETEKTION DER FUSIONSPORE 123
6.2.3. DIE PHASENEINSTELLUNG BEI CELL-ATTACHED-MESSUNGEN 124
7. LITERATURVERZEICHNIS 126 |
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