Klonierung und Charakterisierung von shyk8, einem Gen mit entwicklungsspezifischer Expression in der Maus:
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
ZUSAMMENFASSUNG
SEITE
1
2.
EINLEITUNG
3
2.1.
DIE
NEURALE
INDUKTION
WIRD
VON
FAKTOREN
GESTEUERT,
DIE
VON
DER
FRUCHTFLIEGE
BIS
ZU
VERTEBRATEN
HOMOLOG
SIND
3
2.2.
RETINOLSAEURE
IST
EIN
WICHTIGER
FAKTOR
IN
DER
ENTWICKLUNG
DES
ZNS
VON
VERTEBRATEN
5
2.3.
RETINOLSAEURE
INDUZIERT
NEUROEKTODERMALE
DIFFERENZIERUNG
IN
P19-ZELLEN
6
2.4.
WIRKUNG
VON
KOPFAKTIVATOR
AUF
DIE
NEUROEKTODERMALE
DIFFERENZIERUNG
VON
P19-ZELLEN
DURCH
RETINOLSAEUREBEHANDLUNG
7
2.5.
ZIEL
DER
ARBEIT
8
3.
ERGEBNISSE
9
3.1.
KLONIERUNG
VON
GENEN
MIT
ERHOEHTER
EXPRESSION
IN
NEUROEKTODERMAL
DIFFERENZIERENDEN
ZELLEN
9
3.2.
CHARAKTERISIERUNG
DER
DIFFERENTIELL
HYBRIDISIERENDEN
KLONE
11
3.2.1.
SEQUENZVERGLEICH
11
3.2.2.
VERGLEICH
DER
EXPRESSIONSMUSTER
IN
DER
IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
13
3.3.
ANALYSE
DER
SHYKS-GESAMTSEQUENZ
15
3.4.
EXPRESSIONSMUSTER
DER
SHYKOE-MRNA
WAEHREND
DER
MAUSENTWICKLUNG
UND
IN
DER
ADULTEN
MAUS
17
3.4.1.
SHYKD
-EXPRESSION
IN
FRUEHEN
EMBRYONALSTADIEN
18
3.4.2.
SHYKD
EXPRESSION
WAEHREND
DER
ORGANOGENESE
20
3.4.3.
SHYKFL-EXPRESSION
IM
ZNS
UND
IN
NEURALLEISTENDERIVATEN
EINES
16.5
TAGE
ALTEN
EMBRYOS
21
3.4.4.
SHYKOE-EXPRESSION
IN
DER
NEUGEBORENEN
MAUS
(PO)
24
3.4.5.
SHYK8
EXPRESSION
IM
GEHIRN
VON
ERWACHSENEN
MAEUSEN
25
3.5.
SHYKSS-EXPRESSION
IN
DER
NORTHERN
BLOT
ANALYSE
27
4.
DISKUSSION
29
4.1.
P19-ZELLEN
SIND
EIN
BEWAEHRTES
IN
VITRO-SYSTEM
FUER
NEUROEKTODERMALE
DIFFERENZIERUNG
29
4.2.
BEKANNTE
GENE
DER
NEURALEN
DIFFERENZIERUNG
WURDEN
SELEKTIERT
30
4.3.
DIE
EXPRESSION
VON
SHYKS
UND
SHYK8
WIRD
WAEHREND
DER
EMBRYONALENTWICKLUNG
ENTWICKLUNGSABHAENGIG
REGULIERT
32
4.4.
NEURONALE
DIFFERENZIERUNG
UND
SHYK8
-EXPRESSION
IM
ZNS
34
4.4.1.
SHYKOE-EXPRESSION
IM
CEREBRALEN
CORTEX
34
4.4.2.
SHYKS-EXPRESSION
IM
HIPPOCAMPUS
35
4.4.3.
SHYKS
EXPRESSION
IM
CEREBELLUM
35
4.4.4.
SHYKS-EXPRESSION
IM
BULBUS
OLFACTORIUS
36
4.5.
WIE
KOENNTE
EINE
DIFFERENZIERUNGSSPEZIFLSCHE
ROLLE
VON
SHYK8
AUSSEHEN
37
5.
MATERIAL
UND
METHODEN
39
5.1.
ZELLKULTUR,
INDUKTION
UND
CHARAKTERISIERUNG
DER
P19
ZELLEN
39
5.1.1.
WACHSTUM
39
5.1.2.
INDUKTION
MIT
RETINOLSAEURE
39
5.1.3.
INDUKTIONSKONTROLLE
40
5.2.
ISOLIERUNG
VON
MRNA
40
5.3.
HERSTELLEN
VON
RADIOAKTIV
MARKIERTER
CDNA
40
5.4.
DIFFERENTIELLE
HYBRIDISIERUNG
41
5.5.
HERSTELLUNG
RADIOAKTIVER
RNA
ALS
SONDE
FUER
DIE
IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
42
5.6.
HERSTELLUNG
VON
MAUSPRAEPARATEN
FUER
DIE
IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
42
5.7.
IN
SITU-HYBRIDISIERUNG
43
5.8.
SEQUENZIERUNG
44
5.9.
NORTHEMBLOT
ANALYSE
44
6.
LITERATURVERZEICHNIS
45
7.
DANKSAGUNGEN
50
8.
LEBENSLAUF
51 |
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