Signaltransduktion und Zellbewegung in den vielzelligen Entwicklungsstadien von Dictyostelium discoideum:
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INHALTSVERZEICHNIS
I.
ZUSAMMENFASSUNG
.
5
II.
EINLEITUNG
.
7
11.1.
M
ORPHOGENESE
UND
M
USTERBILDUNG
.
7
II.2.
V
ORTEILE
DES
M
ODELLSYSTEMS
D
ICTYOSTELIUM
DISCOIDEUM
.
8
II.
3.
D
ER
L
EBENSZYKLUS
VON
D
ICTYOSTELIUM
DISCOIDEUM
.
9
11.3.1.
VEGETATIVE
ODER
WACHSTUMSPHASE
.
9
11.3.2.
ENTWICKLUNGSSTADIUM
I:
AGGREGATION
UND
SIGNAL-RELAY
.
11
11.3.3.
ENTWICKLUNGSSTADIUM
II:
ZELLDIFFERENZIERUNG
UND
-SORTIERUNG,
STROEME
UND
MOUNDS
.
11
11.3.4.
ENTWICKLUNGSSTADIUM
III:
DAS
MIGRATIONSSTADIUM
'
SLUG'.
.
12
II.4.
C
HEMOTAXIS
.
13
11.4.1.
CHEMOTAXIS
VON
DICTYOSTELIUM
DISCOIDEUM
.
13
11.4.2.
CHEMOTAXIS-MUTANTEN
(STREAMER
F)
.
14
II.
5.
S
IGNALTRANSDUKTION
.
15
11.5.1.
MORPHOGENE
UND
CHEMOATTRAKTANTEN
.
15
11.5.2.
KOMPONENTEN
DER
CAMP-SIGNALTRANSDUKTION
WAEHREND
DER
FRUEHEN
AGGREGATION
.
17
11.5.3.
DIE
CAMP-REZEPTOREN
(CAR)
.
17
11.5.4.
HETEROTRIMERE
G-PROTEINE
.
19
11.5.5.
KINETIK
DER
INTRAZELLULAEREN
SIGNALVERARBEITUNG
.
20
11.6.
K
ORRELATION
VON
Z
ELLFORM
,
SUBZELLULAEREN
E
REIGNISSEN
UND
D
UNKELFELDWELLEN
.
22
11.7.
D
IE
R
OLLE
VON
C
AMP
WAEHREND
DER
POSTAGGREGATIVEN
E
NTWICKLUNG
.
23
11.8.
Z
IELSETZUNG
DER
ARBEIT
.24
III.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
26
III.
1.
S
TAEMME
UND
Z
ELLKULTUR
DER
AXENISCHEN
S
TAEMME
(AX2,
AX3,
G
ALPHA
1
(G45V))
.26
III.
1.1.
HERSTELLUNG
VON
SPOREN
.
26
III.
1.2.
SCHUETTELKULTUR
VON
VEGETATIVEN
ZELLEN
.
26
III.2.
S
TAEMME
UND
Z
ELLKULTUR
DER
BAKTERIELL
WACHSENDEN
S
TAEMME
NC4
,
XP55
UND
DER
S
TREAMER
-M
UTANTE
NP368
.
27
111.2.1.
STAMMPLATTEN
.
27
III.
2.2.
WACHSTUMSPLATTEN
.28
III.
3.
F
AERBEN
DER
Z
ELLEN
.
29
III.
3.1.
NEUTRALROTFAERBUNG
.
29
111.3.2.
LADEN
DER
ZELLEN MIT
CELL
TRACKERYY.
30
II
1.3.3.
GFP-EXPRIMIERENDE
ZELLEN
.
30
III.
4.
U
MSETZEN
VON
S
LUGS
AUF
A
GAR
MIT
K
OFFEIN
.
30
III.
5.
M
IKROINJEKTION
.
31
II
1.5.1.
VIDEOMIKROSKOPIE
.
32
III.6.
D
IGITALE
B
ILDVERARBEITUNG
.
33
II
1.6.1.
BILDAUFNAHME
UND
SPEICHERUNG
.33
III.
6.2.
TIME-SPACE-PLOTS
.34
II
1.6.3.
EINZELZELLVERFOLGUNG
.34
III.
6.4.
BILDSUBTRAKTION
.35
IV.
ERGEBNISSE
.37
IV.
1.
A
NALYSE
DER
W
ELLENFORTLEITUNG
UND
Z
ELLBEWEGUNG
WAEHREND
DER
MOUND
-
B
ILDUNG
.
37
IV.
1.1.
AENDERUNG
IN
DER
ZELLBEWEGUNGSGESCHWINDIGKEIT
WAEHREND
DER
MOUNDBILDUNG
.
40
IV.
1.2.
DIE
PERIODISCHE
ZELLBEWEGUNG KORRELIERT
MIT
AENDERUNGEN
DER
ZELLFORM.
44
IV.
1.3.
DIE
VERAENDERUNG
DER
ZELLGESCHWINDIGKEIT
KORRELIERT
MIT
DER
EXPRESSION
ZELLTYPSPEZIFISCHER
GENE
.
48
IV.2.
M
ORPHOLOGISCHER
V
ERGLEICH
DER
S
TAEMME
AX3
UND
G
ALPHA
1
(G45V)
.
49
IV.2.1.
SIGNALAUSBREITUNG
IN
DER
G-ALPHA1-MUTANTE
.
51
IV.2.2.
ZELLBEWEGUNG
IN
DER
G-ALPHA1
-MUTANTE
.
57
IV.
2.3.
DIFFERENZIERUNG
DER
PRE-SPORE
UND
PRE-STALK-ZELLEN IN
DER
MUTANTE
.
59
IV.3.
CAMP-I
NJEKTIONEN
BEEINFLUSSEN
DIE
M
ORPHOGENESE
IN
DEN
POSTAGGREGATIVEN
ENTWICKLUNGSSTADIEN
.
61
IV.3.
1.
INDUKTION
VON
OPTISCHEN
DICHTEWELLEN
WAEHREND
DER
FRUEHEN
AGGREGATEN.
63
IV.
3.2.
AGGREGATBILDUNG
IN
STROEMEN
.
66
IV.
3.3.
WELLENFORTLEITUNG
IN
MOUNDS
.
68
IV.3.4.
DIE
AUSWIRKUNGEN
VON
CAMP-LNJEKTIONEN
IN
SLUGS
.
71
V.
DISKUSSION
.74
V.1
.
B
EOBACHTUNG
VON
L
ICHTSTREUUNGSEFFEKTEN
IN
DER
MOUND
-P
HASE
.
74
V.
1.1.
DIE
SIGNALGEOMETRIE
WAEHREND
DER
MOUND-PHASE
.
75
V.1.2.
DIE
VERAENDERUNG
DER
SIGNALPARAMETER
WAEHREND
DER
MOUND-PHASE
.
76
V.1.3.
MOEGLICHE
URSACHE
DER
VERAENDERUNG
DER
SIGNALPARAMETER
.
76
V.1.4.
DIE
DIFFERENTIELLE
EXPRESSION
VERSCHIEDENER
CAMP-REZEPTOREN
KOENNTE
IN
DIREKTEM ZUSAMMENHANG
MIT
DEN
BEOBACHTETEN
PARAMETERAENDERUNGEN
STEHEN.
.
77
V.1.5.
WERDEN
DIE
BEOBACHTETEN
SEHR
HOCHFREQUENTEN
LICHTSTREUUNGEN
TATSAECHLICH
DURCH
EBENSO
HOCHFREQUENTE
CAMP
WELLEN
VERURSACHT?
.
77
V.2.
C
HARAKTERISTIKA
DER
B
EWEGUNG
FLUORESZENZMARKIERTER
Z
ELLEN
IM
MOUND
78
V.2.
1.
KORRELATION
ZWISCHEN
ZELLFORM- UND
GESCHWINGKEITSAENDERUNGENAENDERUNGEN
WAEHREND
DER
FRUEHEN
AGGREGATION
.
79
V.2.2.
KORRELATION
ZWISCHEN
ZELLFORM
UND
GESCHWINGKEITSAENDERUNGEN
IN
STROEMEN
UND
MOUNDS
.
80
V.3.
Z
EITLICHER
V
ERGLEICH
DER
Z
ELLBEWEGUNGSGESCHWINDIGKEIT
MIT
DER
G
EN
-
E
XPRESSION
.
80
V.4.
K
ORRELATION
VON
B
EWEGUNGSMUSTERN
UND
MOUND
-M
ORPHOLOGIE
IN
DER
G
P
ROTEIN
-M
UTANTE
G
ALPHA
1
(G45V)
.
81
V.4.
1.
UNTERSCHIEDE
ZWISCHEN
PARENTALSTAMM
UND
MUTANTE
.
81
V.4.2.
MOEGLICHE
URSACHEN
DER
BILDUNG
RINGFOERMIGER
AGGREGATE
IN
DER
MUTANTE.
82
V.4.3.
EIGENSCHAFTEN
DER
RINGFOERMIGEN
AGGREGATE
.
83
V.4.4.
DOPPLER-EFFEKT
IN
RINGEN
.
83
V.4.5.
SIND
DIFFERENZIERUNGSDEFEKTE
DIE
URSACHE
DER
RINGBILDUNG
IN
DER
MUTANTE?
.
84
V.4.6.
DER
PRIMAERE
DEFEKT,
DER
DIE
RINGBILDUNG
IN
DER
MUTANTE
VERURSACHT,
BESTEHT
VERMUTLICH
IN
DER
ANTERIOR-LIKE
ZU
PRE-STALK
ZELL-PROPORTIONIERUNG
UND/ODER
ZELLSORTIERUNG
.85
V.
4.7.
WAS
IST
DIE
MOLEKULARE
GRUNDLAGE
DER
RINGBILDUNG?
.85
V.4.8.
RINGBILDUNG
DURCH
KOFFEIN
:
.
86
V.4.9.
ANDERE
RINGFOERMIGE
MOUNDS
.87
V.4.
10.
DIE
BILDUNG
RINGFOERMIGER
MOUNDS
KOENNTE
EIN
INDIKATOR
FUER
DEFEKTE
IN
DER
PRE-STALK
DIFFERENZIERUNG
ODER
ZELLSORTIERUNG
SEIN
.
87
V.4.11.
WELCHES
MORPHOGEN
IST
FUER
DIE
ZELLBEWEGUNGEN
IN
DEN
VIELZELLIGEN
ENTWICKLUNGSSTADIEN
VERANTWORTLICH?
.
88
V.4.
12.
MIKROINJEKTION
VON
CAMP
IN
DER
FRUEHEN
AGGREGATION
.
88
V.4.13.
DER
EFFEKT
VON
KOFFEIN
.
89
V.4.
14.
AUSLOESEN
VON
DUNKELFELDWELLEN
ALS
NACHWEIS
FUER
CAMP-RELAY.
.90
V.4.
15.
MIKROINJEKTION
VON
CAMP
IN
ZELLSTROEMEN
.
91
V.4.
16.
MIKROINJEKTION
IN
MOUNDS
.
91
V.4.
17.
MIKROINJEKTION
VON
CAMPIN
SLUGS
.
93
V.5.
A
USBLICK
.
94
VI.
LITERATUR
.
95 |
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