Die Synthese des Heterosides Glukosylglycerol im Cyanobakterium Synechocystis sp. PCC 6803: methodische und praktische Untersuchungen
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1996
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| Beschreibung: | Rostock, Univ., Diss., 1997 |
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
8
2.1.
KULTIVIERUNG,
ZELLEMTE
UND
EXPERIMENTE
IN
VIVO
8
2.2.
STANDARDCHEMIKALIEN
8
2.3.
HOCHLEISTUNGSFLUESSIGKEITSCHROMATOGRAPHIE
(HPLC)
9
2.3.1.
APPARATIVE
AUSRUESTUNG
UND
STATIONAERE
PHASEN
9
2.3.2.
ALLGEMEINE
PROBENVORBEREITUNG
UND
SPEZIFISCHE
STANDARDS
9
2.3.3.
NOMENKLATUR
UND
BESTIMMUNG
CHROMATOGRAPHISCHER
PARAMETER
10
2.4.
ALLGEMEINE
PROTEINBEHANDLUNG
UND
BESTIMMUNG
DER
PROTEINKONZENTRATION
10
2.5.
PROTEINSEPARATION
11
2.5.1.
MATRICES
11
2.5.2.
PROTEINBINDUNG
12
2.5.3.
PROTEINCHROMATOGRAPHIE
12
2.5.3.1.
ALLGEMEINE
AUSRUESTUNG
UND
HANDHABUNG
VON
MATRICES
12
2.5.3.2.
PROTEIN
UND
HANDHABUNG
VON
PROTEINFIAKTIONEN
13
2.5.3.3.
CHROMATOGRAPHIE
AN
IONENAUSTAUSCHERN
13
2.5.3.4.
GROESSENAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE
(GELFILTRATION)
13
2.5.3.5.
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
14
2.5.4.
PROTEINELEKTROPHORESE
14
2.6.
ENZYMATISCHE
BESTIMMUNG
VON
GLY-3-P
15
2.7.
BESTIMMUNG
DER
ENZYMATISCHEN
AKTIVITAETEN
VON
GGPS
UND
GGPP
15
2.7.1.
ALLGEMEINE
BEDINGUNGEN
15
2.7.2.
BESTIMMUNG
DER
GGPS-AKTIVITAET
DURCH
GLY-3-P-VERBRAUCH
16
2.7.3.
BESTIMMUNG
VON
ENZYMATISCHEN
AKTIVITAETEN
MIT
DER
HPLC-ANALYTIK
16
2.7.3.1.
GGPS-UND
GGPS/P-AKTIVITAET
16
2.13.2.
GGPP-AKTIVITAET
18
2.7.3.3.
BESTIMMUNG
GLY-3-P-UMSETZENDER
UND
GLC-(P)-FREISETZENDER
AKTIVITAETEN
19
2.7.4.
BESTIMMUNG
DER
GGPS-AKTIVITAET
MIT
RADIOAKTIVEM
SUBSTRAT
19
2.8.
BESTIMMUNG
VON
INTRAZELLULAEREN
GLC-(P)
UND
GLY-P-KONZENTRATIONEN
19
2.9.
ABBILDUNGEN
UND
STATISTIK
20
INHALTSVERZEICHNIS
1
CHROMATOGRAPHISCHES
VERHALTEN
DES
HETEROSIDES
GLUKOSVLGLVCEROL
AN
UNTERSCHIEDLICHEN
STATIONAEREN
PHASEN
DER
HPLC
21
3.1.
ERGEBNISSE
21
3.1.1.
ALKYL-MODIFIZIERTES
KIESELGEL
21
3.1.2.
AMINO-MODIFIZIERTES
KIESELGEL
22
3.1.3.
CA
2
*-MODIFIZIERTE
LONENAUSTAUSCHERPHASE
24
3.1.4.
KOMBINATION
VON
ALKYL-MODIFIZIERTER
KIESELGEL
UND
CA
2
'
-MODIFIZIERTER
LONENAUSTAUSCHERPHASE
25
3.1.5.
APPLIKATION
AUSGEWAEHLTER
CHROMATOGRAPHISCHER
SYSTEME
BEI
DER
QUALITATIVEN
UND
QUANTITATIVEN
GLUKOSYLGLYCEROLANALYTIK
FUER
NATUERLICHE
PROBEN
27
3.I.5.I.
AMINO-MODIFIZIERTES
KIESELGEL
27
3.1.5.2.
KOMBINATION
VON
ALKYL-MODIFIZIERTER
KIESELGEL
UND
CA
2
'
-MODIFIZIERTER
LONENAUSTAUSCHERPHASE
28
3.2.
DISKUSSION
29
3.2.1.
GRENZEN
DER
KLASSISCHEN
GLUKOSYLGLYCEROLANALYTIK
29
3.2.2.
HPLC-ANALYTIK
VON
GLUKOSYLGLYCEROL
30
DAS
GLUKOSYLGLYCEROL-SYNTHETISIERENDE
ENZYMSYSTEM
37
4.1.
ERGEBNISSE
DER
CHARAKTERISIERUNG
DES
ENZYMSYSTEMS
37
4.1.1.
METHODISCHE
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
DETEKTION
DER
ENZYMATISCHEN
AKTIVITAET
IN
VITRO
37
4.1.1.1.
ENZYMATISCHER
NACHWEIS
DES
GLYCEROL-3-PHOSPHAT-VERBRAUCHS
37
4.1.1.2.
DETEKTION
DES
ENZYMATISCHEN
ENDPRODUKTES
GLUKOSYLGLYCEROL
MITTELS
HPLC
38
4.1.2.
VERSUCHE
ZUR
ENZYMSEPARATION
40
4.I.2.I.
AMMONIUMSULFATFAELLUNG
40
4.1.2.2.
ZENTRIFUGATION
41
4.1.2.3.
HYDROPHOBE
PROTEINBINDUNG
41
4.1.2.4
PROTEINBINDUNG
UND
PROTEINCHROMATOGRAPHIE
AN
IONENAUSTAUSCHERN
42
4.I.2.5.
HORIZONTALE
STAERKEGELELEKTROPHORESE
47
4.1.2.6.
GROESSENAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE
(GELCHROMATOGRAPHIE)
48
4.1.2.7.
AFFMITAETSCHROMATOGRAPHIE
51
4.1.3.
BIOCHEMISCHE
EIGENSCHAFTEN
DER
GG-SYNTHETISIERENDEN
ENZYME
56
4.1.3.1.
EINFLUESSE
VON
LONENKONZENTRATION
UND
LONENART
AUF
DIE
ENZYMAKTIVITAETEN
56
4.1.3.2.
STABILITAET
GEGENUEBER
NACL-KONZENTRATION
UND
PH-WERT
67
4.1.3.3.
PH-WERT
68
4.I.3.4.
TEMPERATUR
69
INHALTSVERZEICHNIS
4.1.3.5.
EINFLUSS
DER
SUBSTRATE
AUF
DIE
ENZYMAKTIVITAET
70
4.1.36.
UMSATZ
VON
GGPS-SUBSTRATEN
DURCH
SEKUNDAERE
ENZYMAKTIVITAETEN
73
4.1.4.
MANIPULATION
DER
GLUKOSYLGLYCEROL-SYNTHESE
IN
VIVO
75
4.2.
DISKUSSION
80
4.2.1.
DETEKTION
DER
AKTIVITAET
DES
GG-SYNTHETISIERENDEN
ENZYMSYSTEMS
IN
VITRO
80
4.2.2.
ENZYMSEPARATION
83
4.2.3.
DIE
ENZYMATISCHE
AKTIVITAET
DES
GG-SYNTHETISIERENDEN
ENZYMSYSTEMS
IN
VITRO
88
4.2.3.1.
EINFLUSS
MONO
UND
DIVALENTER
IONEN
88
4.2.3.2.
EINFLUESSE
VON
STABILITAET,
PH-WERT
UND
TEMPERATUR
94
4.2.3.3.
SUBSTRATE
UND
SEKUNDAER-AKTIVITAETEN
IN
CYANOBAKTERIELLEN
PROTEINEXTRAKTEN
95
4.2.4.
MANIPULATION
DER
GLUKOSYLGLYCEROL-SYNTHESE
IN
VIVO
97
4.2.5.
HYPOTHETISCHE
MODELLE
ZUR
REGULATION
DES
GG-SYNTHETISIERENDEN
ENZYMSYSTEMS
IN
SYNECHOCYSTIS
SP.
PCC
6803
99
ZUSAMMENFASSUNG
LITERATURVERZEICHNIS
DANKSAGUNG
ERKLAERUNG
UND
COPYRIGHT
WISSENSCHAFTLICHER
WERDEGANG |
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| topic_facet | Synechocystis - Glycerinderivate - Glucosederivate - Biosynthese - Enzymaktivität Synechocystis Glycerinderivate Glucosederivate Enzymaktivität Biosynthese Hochschulschrift |
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