Mechanismus der Ascorbinsäureaufnahme in neuronalen Tumorzellen und LAK-Zellen:
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1997
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1
1.1.
KLINIK
DES
NEUROBLASTOMS
1
1.2.
NEUROBLASTOM
UND
ASCORBINSAEURE
3
1.3.
DIE
PHYSIOLOGISCHE
ROLLE
DER
ASCORBINSAEURE
IM
ORGANISMUS
4
1.4.
PROOXIDATIVE
WIRKUNG
VON
ASCORBAT
AUF
NEUROBLASTOMZELLEN
6
1.5.
AUFGABENSTELLUNG
DER
DOKTORARBEIT
8
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
9
2.1.
CHEMIKALIEN
UND
VERWENDETE
LOESUNGEN
9
2.1.1
RADIOAKTIVE
CHEMIKALIEN
9
2.1.2.
CHEMIKALIEN
9
2.1.3
VERWENDETE
ZELLINIEN
11
2.1.4.
MEDIEN
UND
LOESUNGEN
11
2.1.5.
GERAETE
13
2.2.
METHODEN
14
2.2.1.
ZELLKULTIVIERUNG
14
2.2.2.
EINFRIEREN
VON
ZELLEN
14
2.2.3.
TRANSPORT
VON
ASCORBAT
UND
DEHYDROASCORBAT
14
2.2.4.
BESTIMMUNG
DES
ZELLVOLUMENS
VON
NEUROBLASTOMZELLEN
15
2.2.5.
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE
16
2.2.6.
HERSTELLUNG
VON
5
%
AB-MEDIUM
16
2.2.7.
ANREICHERUNG
VON
NK-ZELLEN
17
3.
ERGEBNISSE
19
3.1.
METHODISCHE
ASPEKTE
DER
ASCORBATAUFHAHME
20
3.1.1.
INTRAZELLULAERE
ANREICHERUNG
VON
ASCORBAT
21
3.1.2.
LINEARITAET
DER
ASCORBATAUFHAHME
22
3.2.
KONZENTRATIONSABHAENGIGE
AUFNAHME
VON
ASCORBAT
IN
PC
12
UND
NEUROBLASTOMZELLEN
23
3.2.1.
ASCORBATAUFNAHME
BEI
DEN
NEUROBLASTOMZELLINIEN
SK-N-LO
UND
SK-N-SH
26
3.2.2.
TEMPERATURABHAENGIGKEIT
DER
ASCORBATAUFNAHME
30
3.3.
FREISETZUNG
VON
ASCORBAT
AUS
DEN
CHROMAFFINEN
GRANULA
VONPC-12-ZELLEN
31
3.4.
ASCORBATAUFNAHME
IN
ABHAENGIGKEIT
VON
DESSEN
OXIDATIONSSTATUS
IN
NEUROBLASTOM
ZELLEN
33
3.5.
ASCORBAT
UND
DEHYDROASCORBATAUFNAHME
BEI
PC
12
ZELLEN
-
35
3.6.
ASCORBATAUFNAHME
VON
INTERLEUKIN-2
STIMULIERTEN
NATUERLICHEN
KILLERZELLEN
(LAK)
36
3.7.
SPEZIFITAET
DER
ASCORBAT
UND
DEHYDROASCORBATAUFNAHME
39
3.8.
EINFLUSS
VON
IONEN
UND
GLUCOSE
AUF
DEN
ASCORBINSAEURE
TRANSPORT
41
3.8.1.
EINFLUSS
VON
NATRIUM
AUF
DIE
ASCORBATAUFNAHME
41
3.8.2.
EINFLUSS
VON
CALCIUM
AUF
DIE
ASCORBATAUFNAHME
43
3.8.3.
EINFLUSS
VON
GLUCOSE
AUF
DIE
ASCORBATAUFNAHME
44
3.8.4.
ASCORBATAUFNAHME
IN
ZELLKULTURMEDIUM
IM
VERGLEICH
ZUR
ASCORBATAUFNAHME
IN
GLUCOSEFREIEM
MINIMALEN
SALZMEDIUM
45
3.9.
ASCORBATTRANSPORT
IN
ABHAENGIGKEIT
VOM
OXIDATIONSSTATUS
DES
EXTRAZELLULAEREN
MILIEUS
46
3.10.
EINFLUSS
DES
INTRAZELLULAEREN
GLUTATHIONSYSTEMS
AUF
DEN
ASCORBATTRANSPORT
47
3.11.
INTRAZELLULAERER
NACHWEIS
VON
ASCORBAT
UND
DEHYDROASCORBAT
50
3.12.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
ERGEBNISSE
5
3
4.
DISKUSSION
54
4.1.
METHODISCHE
ASPEKTE
DER
ASCORBATAUFNAHME
55
4.2.
VERGLEICH
DER
ASCORBATAUFNAHME
BEI
PC-12-UND
NEUROBLASTOMZELLEN
55
4.3.
TEMPERATURABHAENGIGKEIT
DER
ASCORBATAUFNAHME
57
4.4.
FREISETZUNG
VON
ASCORBAT
AUS
PC-12
ZELLEN
MITTELS
ACETYLCHOLIN
58
4.4.
VERGLEICH
DER
ASCORBATAUFNAHME
UND
DEHYDROASCORBATAUFNAHME
BEI
NEUROBLASTOM
UND
PC-12-ZELLEN
59
4.4.1.
SPEZIFITAET
DER
ASCORBAT-UND
DEHYDROASCORBATAUFNAHME
60
4.5.
ASCORBAT
UND
DEHYDROASCORBATAUFNAHME
BEI
INTERLEUKIN-2
STIMULIERTEN
NK-ZELLEN
(LAK-ZELLEN)
60
4.6.
BEDEUTUNG
VON
NATRIUM
FUER
DEN
ASCORBAT
TRANSPORT
BEI
SK-N-LO-ZELLEN
61
4.6.1.
BEDEUTUNG
VON
CALCIUM
FILR
DIE
ASCORBATAUFHAHME
BEI
SK-N-LO
ZELLEN
62
4.6.2.
BEDEUTUNG
VON
GLUCOSE
FUER
DIE
ASCORBATAUFHAHME
BEI
SK-N-LO
ZELLEN
63
4.7.
TRANSPORTMECHANISMUS
DER
ASCORBATAUFHAHME
64
5.
ZUSAMMENFASSUNG
68
6.
LITERATURVERZEICHNIS
70 |
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