Modulation der Expression von integrinen und anderen Adhäsionsmolekülen auf Zellinien humaner kolorektaler Karzinome:
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1997
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INHALT
1
EINLEITUNG
6
1.1
DIE
PROBLEMATIK
DER
METASTASIERUNG
BEI
KOLONKARZINOMCN
6
1.2
INTEGRINE
ALS
ZELL-MATRIX
ADHAESIONSMOLEKUELE
7
1.2.1
DIE
STRUKTUR
DER
INTEGRINE
8
1.2.2
FUNKTIONEN
DER
INTEGRINE
9
1.2.2.1
ADHAESION
UND
MIGRATION
10
1.2.2.2
SIGNALTRANSDUKTION
DURCH
INTEGRINE
12
1.2.2.3
YYFOCAL
ADHESIONS
"
SIND
SIGNAL-TRANSDUKTIONS-ORGANELLEN
13
1.2.3
INTEGRINE
IN
NORMALER
KOLONSCHLEIMHAUT,
KOLONADENOMEN
UND
-KARZINOMEN
15
1.2.4
EIGENSCHAFTEN
UND
BEDEUTUNG
EINZELNER
INTEGRINE
16
1.2.4.1
BETA-1
INTEGRINE
16
1.2.4.2
BETA-4
INTEGRINE
18
1.2.4.3
ALPHA-V
INTEGRINE
20
1.3
CADHERINE
SIND
ZELL-ZELL
ADHLSIONSMOLEKUELE
21
1.3.1
DESMOSOMEN:
DESMOGLEIN
UND
DESMOPLAKIN
21
1.3.2
E-CADHERIN
UND
CATENINE
22
1.3.2.1
E-CADHERIN
WIRKT
ALS
INVASIONS-SUPPRESSOR
22
1.3.2.2
DIE
INVASIONS-SUPPRESSOR
FUNKTION
DES
E-CADHERINS
WIRD
DURCH
DIE
VERBINDUNG
ZU
DEN
CATENINEN
GESTEUERT
23
1.3.2.3
ES
BESTEHEN
ZUSAMMENHAENGE
ZWISCHEN
DEM
TUMOR-SUPPRESSOR-GEN
APC
UND
DEN
CATENINEN
24
1.3.2.4
ANTIKOERPER
GEGEN
E-CADHERIN
BEEINFLUSSEN
DIE
INTEGRINEXPRESSION
24
1.4
CD44
UND
CD44V6
ALS
REZEPTOREN
FLIR
HYALURONAN
25
1.4.1
DER
AUFBAU
VON
CD44
25
1.4.2
CD44
EXISTIERT
IN
VERSCHIEDENEN
ALTERNATIV
GESPLEISSTEN
VARIANTEN
26
1.4.3
DIE
VARIANTE
CD44V6
FINDET
SICH
BEVORZUGT
AUF
METASTASIERENDEN
TUMORZELLINIEN
26
13
DIE
ENTZUENDLICHE
STROMAREAKTION
IM
TUMORGEWEBE
27
1.6
INTERLEUKIN
6
28
1.6.1
IL-6
IST
AN
DER
ENTSTEHUNG
VON
PARANEOPLASTISCHEN
SYNDROMEN
UND
AUTOIMMUNERKRANKUNGEN
BETEILIGT
28
1.6.2
IL-6
UND
TUMOREN
28
1.7
TRANSFORMING
GROWTH
FACTOR
BETA-1
29
1.7.1
DIE
STEUERUNG
DER
FUNKTION
VON
TGF
BETA-1
29
1.7.2
DIE
MULTIFUNKTIONALRTAET
VON
TGF
BETA-1
30
1.7.3
TGF
BETA-1
VERSTAERKT
DIE
MATRIXDEPOSITION
31
1.7.4
TGF
BETA-1
REGULIERT
DIE
SYNTHESE
VON
INTEGRINREZEPTOREN
UND
FOERDERT
DIE
MIGRATION
31
1.7.5
TGF
BETA-1
UND
TUMOREN
32
1.8
TUMOR
NECROSIS
FACTOR
ALPHA
33
1.8.1
TNF
ALPHA
IST
EIN
MEDIATOR
VON
ENTZONDUNGSREAKTIONEN
UND
SEPSIS
33
1.8.2
DIE
REGULATION
DER
TNF-WIRKUNG
33
1.8.3
TNF
ALPHA
WIRKT
EINERSEITS
ZYTOTOXISCH
AUF
TUMOREN,
ERHOEHT
ANDERERSEITS
IHRE
MOTILITAET
UND
INVASIVITAET
33
1.8.4
TNF
ALPHA
UND
ADHAESIONSMOLEKUELE
34
1.9
HEPATOCYTE
GROWTH
FACTOR
(SCATTER
FACTOR)
35
1.9.1
REGULATIONSMECHANISMEN
DER
HGF/SF
FUNKTIONEN
35
1.9.2
DER
YYSCATTER
EFFECT
"
35
1.10
INTERLEUKIN
1
BETA
36
1.10.1
REGULATIONSMECHANISMEN
36
INHALT
1.10.2
IL-LBETA
UND
INTEGRINE
37
1.11
PLAETTCHENWACHSTUMSFAKTOR
(PIATDCT
DERIVED
GROWTH
FACTOR)
37
1.11.1
PDGF
UND
TUMOREN
38
1.11.2
PDGFUND
INTEGRINE
38
2
ZIELSTELLUNG
39
3
MATERIAL
UND
METHODEN
40
3.1
ZELLINIEN
40
3.1.1
HRT-18
40
3.1.2
CX-2
40
3.1.3
HT-29
40
3.2
METHODEN
DER
ZELLKULTUR
41
3.2.1
ANZUCHT
UND
PASSAGE
VON
ZELLEN
41
3.2.2
BESTIMMUNG
DER
ZELLZAHL
41
3.2.3
ZELLDICHTE
IN
DEN
VERSCHIEDENEN
VERSUCHEN
42
3.2.4
EINFRIEREN
UND
AUFTAUEN
VON
ZELLEN
42
3.2.3
MYKOPLASMENTEST
42
3.2.6
SPHAEROIDANSATZ
43
3.2.7
TUMOREN
IN
NACKTMAEUSEN
43
3.2.8
INKUBATION
MIT
ZYTOKINEN
43
3.2.9
INKUBATION
MIT
DECMA-1
44
3J
IMMUNFLUORESZENZ
45
3.3.1
ANTIKOERPER
45
3.3.2
IMMUNFLUORESZENZFAERBUNG
47
3.4
KONFOKALE
MIKROSKOPIE
48
3.4.1
GRUNDPRINZIPIEN
48
3.4.2
QUANTIFIZIERUNG
DER
FLUORESZENZINTENSITAET
IN
VERSCHIEDENEN
BEREICHEN
VON
SPHAEROIDEN
49
3.5
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
49
3.5.1
FUNKTIONSWEISE
DES
DURCHFLUSSZYTOMETERS
49
3.5.2
FAERBUNG
50
3.5.3
EINSTELLUNG
DES
DURCHFLUSSZYTOMETERS
51
4
ERGEBNISSE
53
4.1
MORPHOLOGIE
DER
DREI
ZELLINIEN
SOWIE
DER
SPHLROIDE
UND
NACKTMAUSTUMOREN
VON
HRT-18
UND
CX
2
53
4.2
INTEGRINEXPRESSION
IM
MONOLAYER
55
4.2.1
INTEGRINEXPRESSION
IN
MBNOLAYERKULTUREN
VON
HRT-18
55
4.2.2
FLUORESZENZMIKROSKOPISCHER
VERGLEICH
DER
INTEGRINEXPRESSION
VON
HRT-18,
CX-2
UND
HT-29
61
4.2.3
QUANTIFIZIERUNG
DER
INTEGRINEXPRESSION
IM
MONOLAYER
VON
HRT-18,
CX-2
UND
HT-29
MIT
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
62
4.2.4
DER
EINFLUSS
DER
ZELLDICHTE
AUF
DIE
INTEGRINEXPRESSION
64
4.3
INTEGRINEXPRESSION
IN
SPHAEROIDKULTUREN
65
4.4
INTEGRINEXPRESSION
IN
NACKTMAUS
TUMOREN
69
4.5
MODULATION
VON
INTEGRINEN
AUF
HRT-18
DURCH
ZYTOKINE
71
4.5.1
QUALITATIVE
VERAENDERUNGEN
71
4.5.2
QUANTITATIVE
VERAENDERUNGEN
71
INHALT
4.6
DISSOZIATION
DES
MONOLAYERS
DURCH
ANTIKOERPER
GEGEN
E-CADHERIN
72
4.7
SONSTIGE
ADHAESIONSMOLEKUELE
75
4.7.1
DESMOSOMEN
75
4.7.2
E-CADHERIN
75
4.7.3
CD44,
CD44V6
76
5
DISKUSSION
77
5.1
INTEGRINE
IM
MONOLAYER
78
5.1.1
UNTERSCHIEDLICHE
EXPRESSIONSMUSTER
DES
INTEGRINS
ALPHA-6/BETA-4
IN
VERSCHIEDENEN
BEREICHEN
DES
MONOLAYERS
78
5.1.2
DIE
EXPRESSION
VON
ALPHA-V/BETA-5
IN
KLASSISCHEN
JBCAL
ADHESIONS
"
80
5.
1.3DIEEXPRESSIONVONBETA-L
INTEGRINEN
82
5.2
UNTERSCHIEDLICHE
INTEGRINEXPRESSION
IN
MONOLAYER
UND
SPHAEROID
83
5.3
VERAENDERUNGEN
DER
ADHLSIONSMOLEKIILE
IN
NACKTMAUS-TUMOREN
86
5.4
DIE
BESONDERE
ROLLE
VON
CX-2
87
5.4.1
CX-2
BILDET
ANDERE
INTEGRINE
ALS
DIE
OBRIGEN
ZELLINIEN
87
5.4.2
EIN
MODELL
ZUR
UNTERSUCHUNG
DER
FUNKTION
VON
ALPHA-5
INTEGRINEN
IN
KOLONKARZINOMEN
88
5.5
MODULATIONSMOEGLICHKEITEN
DER
INTEGRINEXPRESSION
DURCH
ZYTOKINE
89
5.5.1
TNF
ALPHA
BEWIRKT
EINE
AENDERUNG
DER
INTEGRINEXPRESSION
89
5.5.2
DIE
VERAENDERUNG
VON
ICAM-1
DURCH
INTERIEUKIN-6
90
5.5.3
FEHLENDE
INTEGRINVERAENDERUNGEN
DURCH
HGF
UND
ANDERE
ZYTOKINE
90
5.5.4
DECMA-1:
ZELLSCATTERING
OHNE
INTEGRINVERAENDERUNGEN
91
5.5.5
ALTERNATIVE
WEGE
DER
REGULATION
VON
ADHAESION
UND
MIGRATION
91
5.6
ALLGEMEINE
FOLGERUNGEN
FUER
WEITERE
VERSUCHE
92
6
ZUSAMMENFASSUNG
94
7
LITERATURVERZEICHNIS
97
DANKSAGUNG
LEBENSLAUF |
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