Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH): ein Instrument zur qualitativen und quantitativen Analyse strahleninduzierter Chromosomenaberrationen
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1997
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INHALTSVERZEICHNIS
TABELLENVERZEICHNIS
.
V
ABBILDUNGSVERZEICHNIS
.
VII
ABKUERZUNGEN
.
VIII
A
EINLEITUNG
.
1
B
MATERIAL
UND
METHODEN
.
5
B.
1
UNTERSUCHTE
SPENDER
.
5
B.
2
BESTRAHLUNGSEXPERIMENTE
.
6
B.
2.1
220
KV
ROENTGENSTRAHLEN
.
6
B.
2.2
SPALTNEUTRONEN
.
6
B.
3
LYMPHOZYTENKULTUR
.
8
B.
3.1
ANREICHERUNG
VON
LYMPHOZYTEN
AUS
VOLLBLUT
MIT
DEM
BUFFY-COAT
VERFAHREN
.
8
B.
3.2
ANSATZ
VON
LYMPHOZYTENKULTUREN
.
9
B.
3.3
KULTURDAUER
.
10
B.
4
ZYTOGENETISCHE
METHODEN
.
11
B.
4.1
METAPHASEPRAEPARATIONEN
PERIPHERER
LYMPHOZYTEN
.
11
B.
4.2
FPG-FAERBUNG
.
13
B.
4.3
BESTIMMUNG
DES
REPLIKATIONSINDEX
.
15
B.
5
MOLEKULARGENETISCHE
METHODEN
.
15
B.
5.1
VERWENDETE
DNS-SONDEN
.
15
B.
5.2
KULTIVIERUNG
VON
BAKTERIEN
.
16
B.
5.3
ISOLIERUNG
BAKTERIELLER
PLASMID-DNS
IM
UZ-MASSSTAB
.
18
B.
5.3.1
ETHANOLFAELLUNG
DER
DNS-LOESUNG
.
20
B.
5.4
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
DNS
.
21
B.
5.4.1
BESTIMMUNG
DER
DNS-KONZENTRATION
NACH
AGAROSEGEL
ELEKTROPHORESE
.
21
B.
5.4.2
PHOTOMETRISCHE
BESTIMMUNG
VON
DNS
.
22
B.
5.5
ELEKTROPHORETISCHE
AUFTRENNUNG
VON
DNS-MOLEKUELEN
.
22
B.
5.5.1
GROESSENBESTIMMUNG
VON
DNS-FRAGMENTEN
.
24
II
INHALTSVERZEICHNIS
B.
5.6
HERSTELLUNG
VON
DNS-SONDEN
MITTELS
PCR
.
25
B.
5.7
MARKIERUNG
VON
DNS
.
28
B.
5.7.1
MARKIERUNG
VON
DNS
MITTELS
NICK-TRANSLATION
.
29
B.
5.7.1.1
REINIGUNG
DES
MARKIERUNGSANSATZES
.
31
B.
5.7.1.2
KONZENTRIERUNG
UND
REINIGUNG
DER
MARKIERTEN
DNS
DURCH
ETHANOLFAELLUNG
.
31
B.
5.7.2
MARKIERUNG
VON
DNS
MITTELS
PCR
.
32
B.
5.7.2.1
MARKIERUNG
VON
A-SATELLITEN
DNS
.
32
B.
5.7.2.2
MARKIERUNG
VON
YYFLOW-GESORTETEN
"
CHROMOSOMEN
MITTELS
DOP-PCR
.
33
B.
5.8
FLUORESZENZ-/N-S/TU-HYBRIDISIERUNG
(FISH)
.
35
B.
5.8.1
VORBEREITUNG
UND
DENATURIERUNG
DER
SONDEN
.
36
B.
5.8.2
VORBEHANDLUNG
DER
PRAEPARATE
.
39
B.
5.8.2.1
PARAFORMALDEHYDBEHANDLUNG
ZUR
STABILISIERUNG
DER
CHROMOSOMENMORPHOLOGIE
.
39
B.
5.8.2.2
BISBENZIMID-UV-BEHANDLUNG
DER
PRAEPARATE
ZUR
DURCHFUEHRUNG
ZELLZYKLUSKONTROLLIERTER
FISH-AUSWERTUNGEN
.
40
B.
5.8.3
DENATURIERUNG
DER
PRAEPARATE
.
40
B.
5.8.4
PROTEINASE
K-BEHANDLUNG
.
41
B.
5.8.5
HYBRIDISIERUNG
.
42
B.
5.8.6
WASCHEN
UND
BLOCKEN
DER
PRAEPARATE
.
43
B.
5.8.7
DETEKTION
DER
MARKIERTEN
DNS-ABSCHNITTE
MIT
FLUORESZENZ
FARBSTOFFEN
.
44
B.
5.8.8
GEGENFAERBUNG
MORPHOLOGISCHER
STRUKTUREN
.
47
B.
5.8.9
AUSWERTUNG
DER
PRAEPARATE
.
48
B.
5.8.9.1
KONVENTIONELLE
FLUORESZENZMIKROSKOPIE
.
48
B.
5.8.9.2
FLUORESZENZMIKROSKOPIE
MIT
DIGITALEM
BILDANALYSESYSTEM
.
49
B.
6
CHROMOSOMENANALYSE
.
50
B.
6.1
KONVENTIONELLE
NOMENKLATUR
.
50
B.
6.2
PAINT
NOMENKLATUR
.
53
B.
6.3
SAVAGE
UND
SIMPSON
(S&S)-NOMENKLATUR
.
57
B.
7
STATISTISCHE
AUSWERTUNGEN
.
61
B.
7.1
AUSWERTUNGEN
ZUR
DNS-PROPORTIONALEN
VERTEILUNG
STRAHLENINDUZIERTER
CHROMOSOMENABERRATIONEN
.
61
INHALTSVERZEICHNIS
III
C
ERGEBNISSE
.
63
C.1
AUSWERTUNGEN
VON
EINZELCHROMOSOMEN
.
63
C.1.1
HYBRIDISIERUNG
MIT
UNTERSCHIEDLICH
GENERIERTEN
WCP-SONDEN
FUER
CHROMOSOM
1
UND
ANWENDUNG
VERSCHIEDENER
ANALYSESYSTEME
.
64
C.1.2
UNTERSUCHUNG
EINER
DNS-PROPORTIONALEN
VERTEILUNG
STRAHLENINDUZIERTER
CHROMOSOMENABERRATIONEN
.
68
C.
1.2.1
VERHAELTNIS
SYMMETRISCHER
TRANSLOKATIONEN
ZU
DIZENTRISCHEN
CHROMOSOMEN
(T:DIC)
.
70
C.1.3
VERGLEICH
DER
AUSWERTUNGSERGEBNISSE
VON
EINZELCHROMOSOMEN
BEI
ANWENDUNG
VERSCHIEDENER
NOMENKLATURSYSTEME
.
71
C.
1.3.1
AUSWERTUNGSERGEBNISSE
BEI
ANWENDUNG
DES
KONVENTIONELLEN
NOMENKLATURSYSTEMS
.
71
C.1.3.
2
AUSWERTUNGSERGEBNISSE
BEI
ANWENDUNG
DES
PAINT
NOMENKLATURSYSTEMS
.
72
C.
1.3.3
AUSWERTUNGSERGEBNISSE
BEI
ANWENDUNG
DES
S&S
NOMENKLATURSYSTEMS
.
74
C.2
AUSWERTUNGEN
VON
CHROMOSOMENKOMBINATIONEN
.
78
C.2.1
QUANTIFIZIERUNG
VON
ABERRATIONEN
NACH
3
GY
ROENTGENBESTRAHLUNG
VON
BLUTPROBEN
VERSCHIEDENER
SPENDER
UND
HYBRIDISIERUNG
MIT
VIER
VERSCHIEDENEN
CHROMOSOMENKOMBINATIONEN
.
78
C.2.
1.1
BESTIMMUNG
DES
REPLIKATIONSINDEX
.
79
C.2.
1.2
AUSWERTUNGEN
VON
KONTROLLEN
.
80
C.2.1.
3
HAEUFIGKEITEN
SYMMETRISCHER
TRANSLOKATIONEN
UND
DIZENTRISCHER
CHROMOSOMEN
IN
BESTRAHLTEN
BLUTPROBEN
.
81
C.2.
1.4
UNTERSUCHUNG
EINER
DNS-PROPORTIONALEN
VERTEILUNG
STRAHLEN
INDUZIERTER
CHROMOSOMENABERRATIONEN
BEI
SIEBEN
SPENDERN
.
81
C.2.2
QUANTIFIZIERUNG
VON
STRAHLENINDUZIERTEN
CHROMOSOMENABERRATIONEN
BEI
ANWENDUNG
EINER
MEHRFARBENHYBRIDISIERUNG
FUER
DIE
CHROMOSOMEN
KOMBINATION
1,4,12
.
89
C.2.2.
1
220
KV
ROENTGENSTRAHLEN
.
89
C.2.
2.2
SPALTNEUTRONEN
.
94
C.2.
2.3
DARSTELLUNG
VON
DOSIS-WIRKUNGS-BEZIEHUNGEN
FUER
CHROMOSOMEN
ABERRATIONEN
NACH
ROENTGEN
UND
SPALTNEUTRONENBESTRAHLUNG
UNTER
ANWENDUNG
VERSCHIEDENER
NOMENKLATURSYSTEME
.
99
C.2.
2.3.1
KONVENTIONELLE
NOMENKLATUR
.
99
C.2.2.3.2
PAINT-NOMENKLATUR
.
101
C.2.
2.3.3
S&S-NOMENKLATUR
.
101
C.2.2.3.4
LINEAR-QUADRATISCHE
KURVENANPASSUNG
.
101
C.2.2.4
KOMPLEXE
ABERRATIONEN
NACH
220
KV
ROENTGEN
UND
SPALTNEUTRONENBESTRAHLUNG
.
109
IV
INHALTSVERZEICHNIS
D
DISKUSSION
.115
D.
1
METHODISCHE
VARIATIONEN
VON
FISH-PAINTING
.
115
D.
1.1
AUSWERTUNGEN
VON
EINZELCHROMOSOMEN
UND
CHROMOSOMEN
KOMBINATIONEN
.
115
D.
1.2
ANWENDUNG
UNTERSCHIEDLICH
GENERIERTER
FISH-PAINTING-SONDEN
UND
UNTERSCHIEDLICHER
ANALYSESYSTEME
.
117
D.
2
NOMENKLATURSYSTEME
.
119
D.
2.1
ANWENDUNG
VERSCHIEDENER
NOMENKLATURSYSTEME
ZUR
AUSWERTUNG
VON
CHROMOSOMENABERRATIONEN
MITTELS
FISH-PAINTING
.
120
D.
2.2
ANWENDUNG
VERSCHIEDENER
NOMENKLATURSYSTEME
ZUR
QUANTIFIZIERUNG
VON
CHROMOSOMENABERRATIONEN
MITTELS
FISH-PAINTING
.
123
D.
2.2.1
DARSTELLUNG
VON
DOSIS-WIRKUNGS-BEZIEHUNGEN
.
123
D.
2.2.2
QUANTIFIZIERUNG
VON
KOMPLEXEN
ABERRATIONEN
BEI
ANWENDUNG
DES
S&S-NOMENKLATURSYSTEMS
.
125
D.
3
DNS-PROPORTIONALE
VERTEILUNG
VON
CHROMOSOMENABERRATIONEN
UND
INTERINDIVIDUELLE
UNTERSCHIEDE
IN
DER
REAKTION
AUF
STRAHLENEXPOSITION
.
128
D.
3.1
AUSWERTUNGEN
VON
EINZELCHROMOSOMEN
.
129
D.
3.2
VERGLEICH
VERSCHIEDENER
SPENDER
.
132
D.
4
KONSEQUENZEN
FUER
EINE
ANWENDUNG
DES
FISH-PAINTING
IN
DER
BIOLOGISCHEN
DOSIMETRIE
.
135
E
ZUSAMMENFASSUNG
.
137
F
ANHANG
.
139
F.
1
BEZUGSQUELLEN
.
139
F.
2
YYEASY-SCORE
SHEETS
"
.
140
G
LITERATURVERZEICHNIS
.
157 |
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| spelling | Knehr, Simone 1968- Verfasser (DE-588)120110180 aut Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) ein Instrument zur qualitativen und quantitativen Analyse strahleninduzierter Chromosomenaberrationen von Simone Knehr 1997 IX, 168 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier München, Univ., Diss., 1997 Fluoreszenzmarkierung (DE-588)4154829-2 gnd rswk-swf Strahlenschaden (DE-588)4057825-2 gnd rswk-swf In-situ-Hybridisierung (DE-588)4215968-4 gnd rswk-swf Chromosomenaberration (DE-588)4010163-0 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Chromosomenaberration (DE-588)4010163-0 s Strahlenschaden (DE-588)4057825-2 s In-situ-Hybridisierung (DE-588)4215968-4 s Fluoreszenzmarkierung (DE-588)4154829-2 s DE-604 DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=007873076&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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