Charakterisierung notwendiger genetischer Elemente der mlo vermittelten Resistenz in Gerste (Hordeum vulgare) gegen Gerstenmehltau (Erysiphe graminis f.sp. hordei):
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG.
1.1
RESISTENZPHAENOMENE
IN
TIEREN
UND
PFLANZEN
.
1
1.2
DAS
PATHOSYSTEM
GERSTE-GETREIDEMEHLTAU
.
3
1.3
MOLEKULARE
ANALYSE
VON
SIGNALWEGEN
.
6
1.4
ZIELE
DIESER
ARBEIT
.
9
2
MATERIAL
UND
METHODEN
_
10
2.1
PFLANZENMATERIAL
.10
2.2
PILZISOLATE
UND
INOKULATIONSEXPERIMENTE
.
11
2.3
HAEUFIG
VERWENDETE
LOESUNGEN
.
11
2.4
NUCLEINSAEURE-PRAEPARATIONEN
.
12
2.4.1
PRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
AUS
KLEINEN
BAKTERIENKULTUREN
(
2
ML)
.
12
2.4.2
PRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
AUS
GROSSEN
BAKTERIENKULTUREN
(
100
ML)
.
12
2.4.3
PRAEPARATION
GENOMISCHER
DNA
AUS
GERSTENBLAETTEM
.
13
2.4.4
PRAEPARATION
VON
RNA
AUS
GERSTENBLAETTEM
.
13
2.5
DNA-AMPLIFIKATION
MITTELS
PCR
.
14
2.5.1
AMPLIFIKATION
VON
INSERTIONEN
AUS
PLASMID-DNA
.
15
2.5.2
AMPLIFIKATION
GENOMISCHER
DNA-ABSCHNITTE
.
15
2.6
KLONIERUNG
VON
PCR-AMPLIFIKATIONSPRODUKTEN
.
15
2.7
SEQUENZIERUNG
VON
PLASMID-INSERTIONEN
.
16
2.8
ELEKTROPHORETISCHE
TRENNUNG
VON
NUCLEINSAEUREN
.17
2.8.1
NICHT-DENATURIERENDE
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
.
17
2.8.2
DENATURIERENDE
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
.
18
2.8.3
DENATURIERENDE
POLYACRYLAMID-ELEKTROPHORESE
.
18
2.9
SOUTHERN-ANALYSE
.
19
2.9.1
NICHT-RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
PLASMIDINSERTIONEN
.
19
2.9.2
DNA-IMMOBILISIERUNG
.
19
2.9.3
HYBRIDISIERUNG
UND
NACHWEIS
.
19
2.10
NORTHERN-ANALYSE
.
20
2.10.1
NICHT-RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
DURCH
IN
VITRO
TRANSKRIPTION
.
20
2.10.2
RNA-IMMOBILISIERUNG
.
21
2.10.3
HYBRIDISIERUNG
UND
NACHWEIS
.
21
2.11
AFLP
ANALYSE
.
22
2.12
MIKROSKOPISCHE
METHODEN
.
25
2.12.1
MIKROSKOPISCHES MATERIAL
.
25
2.12.2
FIXIERUNG
VON
INFIZIERTEN
PRIMAERBLAETTEM
.
25
2.12.3
FAERBETECHNIKEN/HISTOCHEMISCHE
NACHWEISE
.
25
2.13
STATISTISCHE
FORMELN
.
26
3.1
CYTOLOGISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DES
INFEKTIONSVERLAUFS
.
28
3.1.1
DIE
ROR
MUTANTEN
ZEIGEN
MAKROSKOPISCH
INTERMEDIAERE
INFEKTIONSTYPEN
.
29
3.1.2
QUANTITATIV-CYTOLOGISCHE
ANALYSEN
DER
ROR
MUTANTEN
ENTSPRECHEN
DEN
MAKROSKOPISCHEN
BEFUNDEN29
3.1.3
ZWEI
WESENTLICHE
KOMPONENTEN
DER
ZEILWANDAPPOSITION
SIND
IN
DEN
ROR
MUTANTEN
ERHALTEN
.
32
3.2
VERGLEICHENDE
ANALYSE
DES
"DEFENSE-MIMIC"-PHAENOTYPS
.
34
3.2.1
DIE
ROR
MUTATIONEN
UNTERDRUECKEN
DIE
MLO
VERMITTELTE
SPONTANE
AUSBILDUNG
VON
ZELLWANDAPPOSITIONEN
.
34
3.2.2
DIE
AKKUMULATION
ABWEHR-ASSOZIIERTER
TRANSKRIPTE
GEHT
MIT
DER
AUSBILDUNG
SPONTANER
ZELLWANDAPPOSITIONEN
EINHER
.
35
3.3
GENETISCHE
UND
CYTOLOGISCHE
ANALYSE
DER
WECHSELWIRKUNG
ZU
ANDEREN
RESISTENZMECHANISMEN
.
38
3.3.1
DIE
ROR
GENPRODUKTE
SIND
FUER
DEN
MLA-8
VERMITTELTEN
RESISTENZMECHANISMUS
NICHT
NOTWENDIG.
38
3.3.2
RORL
IST
FUER
DEN
MLO
VERMITTELTEN
RESISTENZMECHANISMUS
NICHT
NOTWENDIG
.
40
3.3.3
MIO
UND
ROR
GENE
SIND
AN
DER
NICHT-WIRT-RESISTENZ
GEGEN
WEIZENMDRITAUISOLATE
BETEILIGT
.
43
3.3.4
EINE
MUTATION
IN
RORL
ERHOEHT
DIE
ANFAELLIGKEIT
GEGEN
EIN
PARTIELL
MLO
VIRULENTES
GERSTENMEHLTAUISOLAT
.
46
3.4
GENETISCHE
KARTIERUNG
DES
RORL
LOCUS
.
47
3.4.1
GEKOPPELTE
AFLP
MARKER
KONNTEN
DURCH
ANALYSE
VON
GRUPPEN
GENOTYPISCH
CHARAKTERISIERTER
F
2
SEGREGANTEN
ISOLIERT
WERDEN
.
47
3.4.2
RORL
KARTIERT
IN
NAEHE
DES
CENTROMERS
AUF
CHROMOSOM
1H
DER
GERSTE
.
52
4
DISKUSSION.
_
56
4.1
MUTATIONSANALYTISCHE
STUDIEN
ZUR
RESISTENZ
IN
PFLANZEN
.
56
4.1.1
ROR
GENE
ALS
POSITIVE
REGULATOREN
VON
RESISTENZ
.
56
4.1.2
MIO
ALS
NEGATIVER
REGULATOR
VON
RESISTENZ
.
65
4.2
SPEZIFITAET
VON
RESISTENZ:
ERKENNUNG
UND
REAKTION
.
71
4.3
BEITRAEGE
DER
MOLEKULAREN
PHYTOPATHOLOGIE
ZUM
PFLANZENSCHUTZ
.
76
5 ZUSAMMENFASSUNG
_
83
6
LITERATURVERZEICHNIS
_
84
7
ANHANG
_
.95
7.1
OLIGONUCLEOTIDE
.
95
7.1.1
OLIGONUCLEOTIDE
FUER
PCR-REAKTIONEN
.
95
7.1.2
OLIGONUCLEOTIDE
FUER
DIE
AFLP
ANALYSE
.
95
7.2
SEQUENZEN
VON
AFLP
MARKERN
UND
CAPS
LOCI
.
96
7.3
VERZEICHNIS
VERWENDETER
ABKUERZUNGEN
.
100
7.4
VERZEICHNIS
DER
TABELLEN
UND
ABBILDUNGEN
.
101 |
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