Ultrastrukturelle Untersuchungen zur Antigendichte und -modulation des CD54 Antigens (ICAM-1) auf leukämischen Blasten und normalen Knochenmarkszellen:
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1996
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1
.
EINFUEHRUNG
1
1.1
MEDIZINISCHER
HINTERGRUND
1
1.1.1
DIE
HAEMAPOESE
1
1
1.2
IDENTIFIZIERUNG
UND
KURZE
BESCHREIBUNG
DES
ZELLADHAESIONSMOLEKUELS
ICAM-1
4
1.1.2.1
KURZE
BESCHREIBUNG
DES
ICAM-1
4
1.1.2.2
IDENTIFIZIERUNG
DES
ICAM-1
4
1.1.3
ALLGEMEINE
EINFUEHRUNG
ZUR
IMMUNTYPISIERUNG
VON
OBERFLAECHENANTIGENEN
6
1.1.4
BASISINFORMATIONEN
ZUR
KLASSIFIKATION
UND
DIAGNOSTIK
DER
AKUTEN
LEUKAEMIEN
7
1.2
AUFGABENSTELLUNG
8
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
10
2.1
MATERIAL
10
2.1.1
ZELLMATERIAL
10
2.1.1.1
LEUKAEMIEN
1-10
10
2.1.1.2
KG-1
A-LEUKAEMIEZELLEN
11
2.1.1.3
NORMALES
KNOCHENMARK
1,2
UND
3
11
2.1.2
GERAETE
11
2.1.3
VERBRAUCHSMATERIAL
12
2.1.4
CHEMIKALIEN
UND
BIOLOGISCHE
STOFFE
13
2.1.4.1
FESTSTOFFE
13
2.1.4.2
FLUESSIGKEITEN,
LOESUNGEN
UND SUSPENSIONEN
13
2.1.4.3
IMMUNOREAGENZIEN
14
2.2
METHODEN
15
2.2.1
KONZEPT
DER
METHODIK
15
2.2.1.1
AUFARBEITUNG
DES
ZELLMATERIALS
15
2.2.1.2
MARKIERUNGSREAKTIONEN
16
2.2.1.3
PRAEPARATION
FUER
DIE
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
17
2.2.2
ANSATZ
LAGERBARER
ARBEITS
UND
STAMMLOESUNGEN
18
2.2.2.1
PUFFER
18
2.22.2
ANORGANISCHE
SALZLOESUNGEN
19
2.2.2.3
LOESUNGEN
FUER
ANTIKOERPER-INKUBATIONEN
20
2.2.3
PRAEPARATIVE
SCHRITTE
IM
DETAIL
21
2.2.3.1
VORBEREITUNG
VON
DECKGLAESERN
UND
ZELLMATERIAL
21
2.2.3.2
ANTIKOERPERMARKIERUNGEN
28
2.2.3.3
ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
PRAEPARATION
DES
MONOLAYERS
32
2.2.3.4
AUSWERTUNG
AM
ELEKTRONENMIKROSKOP
37
3.
ERGEBNISSE
40
3.1
UEBERPRUEFUNG
DER
METHODIK
40
3.1.1
VORVERSUCHE
ZUR
UNTERSUCHUNG
UND
BESTIM
MUNG
DER
OPTIMALEN
ZELLKONZENTRATION
41
3.1.1.1
ZELLKONZENTRATION
UND
ZELLHAFTUNG
41
3.1.2
UNTERSUCHUNGEN
ZU
ZELL-ZELL-INTERAKTIONEN
ZWISCHEN
LEUKAEMISCHEN
BLAESTEN
42
3.1.3
VERSUCHE
ZUR
UEBERPRUEFUNG
EINES
MOEGLICHEN
EINFLUSSES
DER
VORFIXIERUNG
AUF
DIE
VERTEILUNG
DES
ANTIGENS
CD54
44
3.1.3.1
VORVERSUCHE
MIT
GLUTARALDEHYD
44
3.2
UNTERSUCHUNG
DER
ANTIGENDICHTE
48
3.2.1
MORPHOLOGISCHE
AUSWERTUNG
49
3.2.2
SEMIQUANTITATIVE
AUSWERTUNG
50
3.2.2.1
ANTEIL
GOLDMARKIERTER
ZELLEN
AN
DER
GESAMTZELLPOPULATION
50
3.2.2.2
VERTEILUNG DER
MARKIERUNGSDICHTE
INNER
HALB
DER
CD
54
POSITIVEN
SUBPOPULATION
52
3.3
UNTERSUCHUNG
DER
ANTIGENMODULATION
58
3.3.1
MORPHOLOGISCHE
AUSWERTUNG
59
3.3.1.1
LEUKAEMIEN1-4
59
3.3.1.2
KG-1A-LEUKAEMIEKULTURZELLINIE
61
3.3.1.3
SEMIQUANTITATIVE
AUSWERTUNG
62
4.
DISKUSSION
67
4.1
INTERPRETATION
UND
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
67
4.1.1
DAS
METHODISCHE
KONZEPT
67
4.1.1.1
DIE
INDIREKTE
IMMUNOGOLDTECHNIK
69
4.1.1.2
ERMITTLUNG
DER
ZELLDICHTE
70
4.1.1.3
VERSUCHE
ZU
INTERAKTIONEN
ZWISCHEN
LEUKAEMISCHEN
BLASTEN71
4.1.1.4
VORVERSUCHE
ZUR
ERMITTLUNG
DES
EINFLUSSES
DER
VORFIXIERUNG
MIT
GLUTARALDEHYD
71
4.1.2
UNTERSUCHUNGEN ZUR
ANTIGENDICHTE
72
4.1.3
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
ANTIGENMODULATION
74
4.1.3.1
LEUKAEMIEZELLINIE
KG-1A
75
4.1.3.2
LEUKAEMIEN
1-4
76
5.
ZUSAMMENFASSUNG
79
6.
LITERATURVERZEICHNIS
81
7.
DANKSAGUNG
92
8.
BILDDOKUMENTATION
93 |
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