Tissue engineering von Knorpelgewebe: Untersuchungen zur In-vitro-Chondrozytenvermehrung
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INHALTSVERZEICHNIS
I.
EINLEITUNG
.
1
1.
GEWEBETRANSPLANTATION
IM
KOPF-HALS-BEREICH
.
1
2.
KNORPELGEWEBE
.
2
2.1.
HISTOLOGIE
.
2
2.2.
EXTRAZELLULAERE
MATRIX
.
2
2.3.
FORMEN
DES
KNORPELGEWEBES
.
3
2.4.
KNORPELWACHSTUM
.
4
3.
ZELLZUECHTUNG
.
5
3.1.
ZELLWACHSTUM
IN
VITRO
.
5
3.2.
ZELLALTERUNG
.
6
3.3.
CHONDROZYTENPHAENOTYP
IN
VITRO
.
7
4.
KNORPELZUECHTUNG
IM
DREIDIMENSIONALEN
KULTURMODELL
.
7
4.1.
REEXPRESSION
DES
CHONDROZYTENPHAENOTYPS
IM
DREIDIMENSIONALEN
KULTURMODELL
.
7
4.2.
KNORPELZUECHTUNG
UNTER
PERFUSIONSBEDINGUNGEN
.
8
II.
ZIEL
DER
ARBEIT
.
10
III.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
11
1.
MATERIAL
.
11
1.1.
CHEMIKALIEN
.
11
1.2.
HISTOLOGIE
.
11
1.3.
MEDIUM
UND
ZUSAETZE
.
12
1.4.
GERAETE
.
12
VIII
INHALT
1.5.
KULTURSCHALEN
UND
FILTER
.
12
2.
METHODEN
.
14
2.1.
ZELLBIOLOGISCHE
METHODEN
.
14
2.1.1.
VERARBEITUNG
DES
KNORPELPRAEPARATES
.
14
2.1.2.
ANSATZ
DER
ENZYMLOESUNG
.
14
2.1.3.
ENZYMATISCHE
CHONDROZYTENISOLIERUNG
.
15
2.1.4.
AUSZAEHLUNG
UND
VITALITAETSBESTIMMUNG
.
15
2.1.5.
ANSATZ
DES
KULTURMEDIUMS
.
16
2.1.6.
ANSATZ
DER
MONOLAYERKULTUR
.
16
2.1.7.
KRYOKONSERVIERUNG
ISOLIERTER
CHONDROZYTEN
.
16
2.1.8.
BESTIMMUNG
DES
CHONDROZYTENPHAENOTYPS
.
17
2.1.9.
AGAROSE-KULTUR
.
17
2.2.
HISTOLOGISCHE
METHODEN
.
18
2.2.1.
ALKALISCHE-PHOSPHATASE-ANTI-ALKALISCHE-PHOSPHATASE
IMMUNHISTOCHEMIE
18
2.2.2.
PEROXIDASE-ANTI-PEROXIDASE
IMMUNHISTOCHEMIE
.
18
2.2.3.
VITALITAETSTEST
AUF
FLUORESZENZBASIS
.
19
IV.
ERGEBNISSE
.
20
1.
CHONDROZYTENWACHSTUM
IN
DER
MONOLAYERKULTUR
.
20
1.1.
HYALINER
UND
ELASTISCHER
KNORPEL
VOM
SCHWEIN
.
20
1.1.1.
CHONDROZYTENGEWINNUNG
UND-VITALITAET
.
20
1.1.2.
MONOLAYERKULTUR
VON
SCHWEINECHONDROZYTEN
.
20
1.2.
HYALINER
KNORPEL
VOM
RIND
.
22
1.2.1.
CHONDROZYTENGEWINNUNG
UND-VITALITAET
.
22
1.2.2.
MONOLAYERKULTUR
VON
RINDERCHONDROZYTEN
.
22
1.3.
HUMANER
NASENSEPTUMKNORPEL
.
24
1.3.1.
CHONDROZYTENGEWINNUNG
UND-VITALITAET
.
24
1.3.2.
MONOLAYERKULTUR
.
24
1.3.3.
ZELLVERMEHRUNG
HUMANER
CHONDROZYTEN
.
27
INHALT
IX
1.3.4.
PASSAGEDAUER
.
31
1.4.
HUMANER
ELASTISCHER
KNORPEL
.
33
1.4.1.
CHONDROZYTENGEWINNUNG
UND-VITALITAET
.
33
1.4.2.
MONOLAYERKULTUR
.
33
2.
DEDIFFERENZIERUNG
IN
DER
MONOLAYERKULTUR
.
35
3.
CHONDROZYTEN
IN
DER
DREIDIMENSIONALEN
AGAROSE-GEL-KULTUR
.
37
V.
DISKUSSION
.
40
1.
ZELLTEILUNG
HUMANER
CHONDROZYTEN
.
40
1.1.
WIEDERERLANGUNG
DER
REPLIKATIONSFAEHIGKEIT
.
40
1.2.
EINFLUSS
VON
WACHSTUMSFAKTOREN
.
41
2.
CHONDROZYTENPROLIFERATION
IN
DER
MONOLAYERKUTUR
.
41
2.1.
RINDERCHONDROZYTEN
.
41
2.2.
HUMANCHONDROZYTEN
.
42
3.
CHONDROZYTENDEDIFFERENZIERUNG
IN
DER
MONOLAYERKULTUR
.
44
3.1.
AENDERUNGEN
DER
MORPHOLOGIE
.
44
3.2.
AENDERUNGEN
DES
SYNTHESEVERHALTENS
.
44
3.3.
ZELLALTERUNG
IN
VITRO
.
45
4.
CHONDROZYTENREDIFFERENZIERUNG
IM
DREIDIMENSIONALEN
KULTURMODELL
.
47
4.1.
UNTERSCHIEDLICHE
DREIDIMENSIONALE
KULTURANORDNUNGEN
.
47
4.2.
CHONDROZYTENREDIFFERENZIERUNG
IN
DER
AGAROSE-KULTUR
.
48
5.
ZUECHTUNG
VON
KNORPELGEWEBE
-
PERSPEKTIVEN
.
49
X
INHALT
VI.
ZUSAMMENFASSUNG
.
53
VH.
LITERATUR
.
55 |
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