Molekularbiologie und Immunchemie von Immunglobulin-E bei Patienten mit atopischer Dermatitis:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1996
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| Beschreibung: | Berlin, Humboldt-Univ., Diss., 1996 |
| Beschreibung: | 87 Bl. Ill., graph. Darst. |
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1. INHALTSVERZEICHNIS
2. ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.4
3. EINLEITUNG.5
3.1 ATOPIE UND ATOPISCHE DERMATITIS.5
3.2 IMMUNGLOBULINE.7
3.3 REGULATION DER IMMUNGLOBULINE - SYNTHESE.9
3.4 IMMUNGLOBULINE - REZEPTOREN UND FUNKTIONEN.\.11
3.5 IGE-BINDUNG AUF LANGERHANS-ZELLEN.12
3.6 IMMUNPHAENOMENE BEI ATOPISCHER DERMATITIS.13
3.7 ANTIKOERPER - STRUKTUR UND ENTSTEHUNG DER ANTIKOERPER - VIELFALT.16
4. AUFGABENSTELLUNG.22
5. MATERIAL UND METHODEN.23
5.1 VERWENDETE REAGENZIEN UND CHEMIKALIEN.23
5.1.1 ZELLPRAEPARATION.23
5.1.2 MRNA-SYNTHESE.RR.23
5.1.3 CDNA-SYNTHESE, PCR, GELELEKTROPHORESE'.23
5.1.4 RESTRIKTION, LIGATION
.24
5.1.5 TRANSFORMATION, PLASMIDPRAEPARATION.24
5.1.6 SEQUENZIERUNG.24
5.1.7 ELISA.25
5.2 CHARAKTERISIERUNG DER UNTERSUCHTEN PATIENTEN.26
5.2.1 PATIENTENAUSWAHL FUER MOLEKULARBIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN
.26
5.2.2 PATIENTENAUSWAHL FUER IMMUNCHEMISCHE UNTERSUCHUNGEN. .26
5.3 ZELL-PRAEPARATION.27
5.3.1 GEWINNUNG MONONUKLEAERER ZELLEN.27
5.3.2 B-ZELL-SEPARATION
.27
5.4 MRNA-PRAEPARATION, CDNA-PRAEPARATIONUND AMPLIFIKATION DER VH-GENE.27
5.4.1 MRNA -PRAEPARATI ON.27
5.4.2 CDNA-PRAEPARATION
.28
5.4.3 PCR.28
5.5 KLONIERUNG DER PCR-PRODUKTE.29
5.5.1 RESTRIKTION.,.29
5.5.2 LIGATION.30
5.5.3 TRANSFORMATION.30
5.5.4 PLASMIDPRAEPARATION.31
5.6 SEQUENZIERUNG.31
5.6.1 SEQUENZREAKTION UND PROBENAUFBEREITUNG.31
5.6.2 SEQUENZANALYSE.32
5.7 PRAEPARATION DER PATIENTEN-SEREN FUER DIE IMMUNCHEMISCHEN
UNTERSUCHUNGEN.33
5.8 SERUM-IGE-SPIEGELUND SERUM-IGE-REAKTIVITAET.33
5.9 ELISA-EXFERIMENTE.33
5.9.1 FESTPHASEN-(SOLID-PHASE)-ELISA
.33
5.9.2 OPTIMIERUNG DES CAPTURE-ASSAYS.34
5.9.3 CAPTURE-ASSAY FUER SPEZIFISCHES SERUM-IGE.35
5.10 ABSORPTIONSEXPERIMENTE.35
6. ERGEBNISSE. 36
6.1 MOLEKULARBIOLOGIE.36
6.1.1 STRATEGIE.36
6.1.2 ALLERGENSPEZIFISCHES IGE IM SERUM DER AUSGEWAEHLTEN PATIENTEN.36
6.1.3 ZELLPRAEPARATION, AMPLIFIKATION DER VFJ-GENE, KLONIERUNG UND
SEQUENZIERUNG DER PCR-PRODUKTE.37
6.1.4 VFRFAMILIEN-VERWENDUNG IN S-TRANSKRIPTEN.38
6.1.5 EXPRESSION INDIVIDUELLER VN-KEIMBAHNGENE.40
2
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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6.1.6 SOMATISCHE MUTATIONEN IN DEN S-VX-TRANSKRIPTEN
.41
6.1.7 VARIABILITAET DER VX-GENE.42
6.1.8 BEVORZUGT MUTIERTE POSITIONEN.46
6.1.9 D- UND JX-GEN UTILISATION.48
6.2 IMMUNCHEMIE.52
6.2.1 STRATEGIE
.52
6.2.2 SERUM-IGE-SPIEGEL.52
6.2.3 FESTPHASEN-ELISA-EXPERIMENTE
.53
6.2.4 CAPTURE-ASSAY.56
6.2.5 A BSORPTIONSEXPERIMENTE.\.57
7. DISKUSSION.59
7.1 SERUM-IGE-REAKTIVITAET.59
7.2 MOLEKULARBIOLOGISCHE ANALYSEN.65
8. ZUSAMMENFASSUNG.73
9. THESEN.74
10. LITERATURVERZEICHNIS. 76
3 |
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