Nachweis von Nucleolin als HDL 3 bindendes Zelloberflächenprotein auf Hep G2 Zellen: eine Photoaffinitätsstudie
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1996
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3
INHALT
1. EINLEITUNG.5
2. MATERIAL UND METHODEN.10
2.1 PRAEPARATION VON HDL
3 UND APO HDL3.10
2.2 REINIGUNG VON APOLIPOPROTEIN A-I (APO A-I) UND APOLIPOPROTEIN A-II
(APOA-II).10
2.3. 4-AZIDOBENZOYL-HDL
3.11
2.4. AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE.12
2.5. MONOSPEZIFISCHE ANTI- APO A-I BZW. ANTI- APO A-II ANTIKOERPER.13
2.6. BESTRAHLUNGSBEDINGUNGEN.13
2.7. ZELLEN UND ZELLKULTURBEDINGUNGEN.!7.14
2.8. ISOLIERUNG DER ZELLMEMBRANEN.14
2.9 IMMUNOBLOT UND DOT BLOT.15
2.10. ANTIKOERPERGEWINNUNG GEGEN DEN APOLIPOPROTEIN - MEMBRANPROTEIN
KOMPLEX . 16
2.11. ALLGEMEINE METHODEN.17
3. ERGEBNISSE. 18
3.1. DARSTELLUNG VON APOLIPOPROTEIN E FREIEM HDL
3, APOLIPOPROTEIN A-I UND
APOLIPOPROTEIN A-II. 18
3.2. DARSTELLUNG MONOSPEZIFISCHER ANTI- APO A-I UND ANTI- APO A-II
ANTIKOERPER.20
3.3. DARSTELLUNG VON BIOTINYL- HDL
3 UND VON 4- AZIDOBENZOYL- HDL3.22
3 .4. ERMITTLUNG DER MAXIMALEN NICHT DESTRUIERENDEN BESTRAHLUNGSZEIT VON
4- AZIDOBENZOYL- HDL
3.24
3.5. PHOTOVEMETZUNG UND CHARAKTERISIERUNG DER VERNETZUNGSPRODUKTE VON
4- AZIDOBENZOYL- HDL
3 APOLIPOPROTEINEN.24
3.6. NACHWEIS EINES HDL
3 BINDENDEN ZELLOBERFLAECHENPROTEINES AUF HEP G2 ZELLEN. 27
3.7. AMINOSAEURESEQUENZ VON TRYPTISCHEN SPALTPRODUKTEN DES HDL
3 BINDENDEN
ZELLOBERFLAECHENPROTEINS.31
4. DISKUSSION.36
5. ZUSAMMENFASSUNG.42
6. LITERATURVERZEICHNIS.43
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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4
7. DANKSAGUNG.55
8. LEBENSLAUF.56
9. ERKLAERUNG.57 |
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