Die Erfassung reaktiver Sauerstoffspezies mittels Chemilumineszenz: Untersuchungen in nicht-zellulären und zellulären Systemen
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1
1.1.
THEMATIK
DER
ARBEIT
7
2.
THEORETISCHE
GRUNDLAGEN
8
2.1.
CHEMILUMINESZENZ
8
2.2.
LUMINOL-ABHAENGIGE
CHEMILUMINESZENZ
10
2.3.
LUCIGENIN-ABHAENGIGE
CHEMILUMINESZENZ
15
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
17
3.1.
MATERIAL
17
3.1.1.
CHEMIKALIEN
UND
BIOCHEMIKALIEN
17
3.1.2.
GERAETE
18
3.1.3.
GEFAESSE
UND
EINMALARTIKEL
19
3.1.4.
V
ERSUCHSTIERHALTUNG
19
3.2.
METHODEN
19
3.2.1.
ZELLPRAEPARATIONEN
19
3.2.1.1.
PRAEPARATION
HUMANER
MONONUKLEAERER
ZELLEN
UND
GRANULOZYTEN
19
3.2.I.2.
PRAEPARATION
HUMANER
THROMBOZYTEN
20
3.2.1.3.
PRAEPARATION
HUMANER
ENDOTHELZELLEN
AUS
DEM
OMENTUM
21
3.2.1.4.
PRAEPARATION
PHAGOZYTAERER
ZELLEN
AUS
HUMANEM
LEBERGEWEBE
22
3.2.1.5.
PRAEPARATION
VON
KUPFFER-ZELLEN
AUS
DER
RATTENLEBER
23
3.2.2.
CHEMILUMINESZENZ-MESSUNGEN
25
3.2.2.1.
AUFBAU
DES
SYSTEMS
ZUR
MESSUNG
DER
CHEMILUMINESZENZ
IN
ZELLFREIEN
UND
ZELLULAEREN
SYSTEMEN
25
3.2.2.2.
AUFBAU
DES
SYSTEMS
ZUR
MESSUNG
DER
CHEMILUMINESZENZ
AUF
EINZELZELLEBENE
27
3.2.2.3.
CHEMILUMINESZENZ-MESSUNGEN
IN
ZELLFREIEN
SYSTEMEN
27
3.2.2.4.
CHEMILUMINESZENZ-MESSUNGEN
IN
HUMANEN
ZELLULAEREN
SYSTEMEN
29
3.2.2.5.
CHEMILUMINESZENZ-MESSUNGEN
AN
KUPFFER-ZELLEN
DER
RATTE
30
3.2.2.6.
CHEMILUMINESZENZ-MESSUNGEN
AUF
EINZELZELLEBENE
30
3.2.3.
CYCLISCHE
VOLTAMMETRIE
31
3.2.4.
1
H-NMR-MESSUNGEN
32
3.2.5.
BESTIMMUNG
VON
METABOLITEN
DES
ARACHIDONSAEURE
STOFFWECHSELS
32
3.2.5.1.
DER
ARACHIDONSAEURE-STOFFWECHSEL
32
3.2.5.2.
EICOSANOIDBESTIMMUNGEN
MITTELS
RADIO-IMMUNOASSAY
36
3.2.5.3.
BESTIMMUNG
VON
METABOLITEN
DES
ARACHIDONSAEURE
STOFFWECHSELS
IN
HUMANEN
BLUT
UND
ENDOTHELZELLEN
36
3.2.5.4.
BESTIMMUNG
VON
METABOLITEN
DES
ARACHIDONSAEURE
STOFFWECHSELS
IN
KUPFFER-ZELLEN
DER
RATTE
37
3.2.5.5.
BESTIMMUNG
VON
LTB4
IN
PHAGOZYTAEREN
ZELLEN
AUS
HUMANEM
LEBERGEWEBE
38
3.2.6.
BESTIMMUNG
DER
NO-BILDUNG
VON
KUPFFER-ZELLEN
38
3.2.7.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
39
4.
ERGEBNISSE
40
4.1.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
BEEINFLUSSUNG
DER
LUMINOL
CHEMILUMINESZENZ
DURCH
EISENIONEN
IN
ZELLFREIEN
SYSTEMEN
40
4.1.1.
WIRKUNG
VON
METALLCHELATOREN
AUF
DIE
LUMINOL
CHEMILUMINESZENZ
40
4.1.2.
WIRKUNG
VON
OH-FAENGEM
AUF
DIE
LUMINOL
CHEMILUMINESZENZ
42
4.1.3.
WIRKUNG
VON
FE(II)
UND
FE(III)
AUF
DIE
LUMINOL
CHEMILUMINESZENZ
43
4.1.4.
WIRKUNG
VON
ADP
UND
CITRAT-CHELATISIERTEM
FE(II)
UND
FE(III)
AUF
DIE
LUMINOL-CHEMILUMINESZENZ
46
4.1.5.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
LUMINOL-EISENIONEN
WECHSELWIRKUNG
MITTELS
CYCLISCHER
VOLTAMMETRIE
47
4.1.6.
WIRKUNG
VON
FE(II)
AUF
DAS
'H-NMR-SPEKTRUM
VON
LUMINOL
51
4.2.
CHEMILUMINESZENZ-MESSUNGEN
IN
ZELLULAEREN
SYSTEMEN
55
4.2.1.
LUMINOL-CHEMILUMINESZENZ
UND
DEREN
SPEZIFITAET
IN
ZELLULAEREN
SYSTEMEN
55
4.2.2.
LUCIGENIN-CHEMILUMINESZENZ
UND
DEREN
SPEZIFITAET
IN
ZELLULAEREN
SYSTEMEN
56
4.2.3.
CHEMILUMINESZENZ-MESSUNGEN
AN
PATIENTENZELLEN
58
4.3.
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
WIRKUNGSMECHANISMUS
DES
FLAVONOIDS
SILIBININ
59
4.3.1.
FLAVONOIDE
59
4.3.2.
WIRKUNG
VON
SILIBININ
AUF
DIE
LUMINOL-ABHAENGIGE
CHEMILUMINESZENZ
HUMANER
GRANULOZYTEN
62
4.3.3.
WIRKUNGEN
VON
SILIBININ
AUF
DIE
LUCIGENIN-ABHAENGIGE
CHEMILUMINESZENZ
HUMANER
GRANULOZYTEN
63
4.3.4.
WIRKUNGEN
VON
SILIBININ
AUF
DIE
LUCIGENIN-ABHAENGIGE
CHEMILUMINESZENZ
VON
KUPFFER-ZELLEN
DER
RATTE
65
4.3.5.
WIRKUNGEN
VON
SILIBININ
AUF
DIE
NACHWEISBARE
NO-MENGE
67
4.3.5.1.
UNTERSUCHUNGEN
AN
KUPFFER-ZELLEN
DER
RATTE
68
4.3.6.
WIRKUNGEN
VON
SILIBININ
AUF
DEN
ARACHIDONSAEURE
STOFFWECHSEL
69
4.3.6.1.
UNTERSUCHUNGEN
AN
KUPFFER-ZELLEN
DER
RATTE
69
4.3.6.2.
UNTERSUCHUNGEN
AN
HUMANEN
THROMBOZYTEN,
WEISSEN
BLUTZELLEN
UND
ENDOTHELZELLEN
71
4.3.6.3.
UNTERSUCHUNGEN
AN
PHAGOZYTAEREN
ZELLEN
AUS
HUMANEM
LEBERGEWEBE
76
4.4.
CHEMILUMINESZENZ-MESSUNGEN
AUF
EINZELZELLEBENE
77
4.4.1.
LUMINOL-ABHAENGIGE
CHEMILUMINESZENZ
AUF
EINZELZELLEBENE
77
4.4.1.1.
REAKTION
HUMANER
GRANULOZYTEN
AUF
VERSCHIEDENE
STIMULI
77
4.4.2.
LUCIGENIN-ABHAENGIGE
CHEMILUMINESZENZ
AUF
EINZELZELLEBENE
82
4.4.2.1.
REAKTION
HUMANER
GRANULOZYTEN
AUF
VERSCHIEDENE
STIMULI
82
4.4.3.
CHEMILUMINESZENZ-MESSUNGEN
AUF
EINZELZELLEBENE
UNTER
SILIBININ-ZUSATZ
83
5.
DISKUSSION
85
5.1.
EINFLUSS
VON
EISENIONEN
AUF
DIE
LUMINOL-ABHAENGIGE
CHEMILUMINESZENZ
85
5.2.
CHEMILUMINESZENZ-MESSUNGEN
IN
ZELLULAEREN
SYSTEMEN
90
5.3.
DER
WIRKUNGSMECHANISMUS
VON
SILIBININ
92
5.4.
CHEMILUMINESZENZ-MESSUNGEN
AUF
EINZELZELLEBENE
97
6.
ZUSAMMENFASSUNG
102
7.
ABKUERZUNGEN
UND
TRIVIALNAMEN
104
8.
LITERATUR
106 |
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