Untersuchungen an retinalen Müllerschen Gliazellen zu verschiedenen Effekten des Neurotransmitters Glutamat und zur Charakterisierung von Kaliumionenleitfähigkeiten:
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG 1
1.1. UEBERSICHT UEBER EINTEILUNG UND FUNKTION VON GLIAZELLEN 1
1.2. AUFBAU UND FUNKTION DER RETINA 4
1.3. DIE MUELLERZELLE ALS DOMINIERENDER GLIAZELLTYP DER RETINA S
1.3.1. ELEKTROPHYSIOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN DER MUELLERZELLE 7
1.3.2. DER BEITRAG DER MUELLERZELLE ZUR K
+-HOMOEOSTASE IN DER RETINA 8
1.4. ABLEITUNG DER EIGENEN AUFGABENSTELLUNG 11
2. MATERIAL UND METHODEN 12
2.1. GEWEBEMATERIAL UND PRAEPARATIONSTECHNIKEN 12
2.2. LOESUNGEN 13
2.2.1. VERWENDETE CHEMIKALIEN UND IHRE HERKUNFT 13
2.2.2. ZUSAMMENSETZUNG DER LOESUNGEN 15
2.3. ELEKTROPHYSIOLOGISCHE METHODEN ~ 16
2.3.1. DAS PRINZIP DER PATCH-CLAMP-TECHNIK 16
2.3.2. DER AUFBAU DES MESSPLATZES 18
2.3.3. DIE HERSTELLUNG DER ELEKTRODEN 20
2.3.4. ABLAUF DER ELEKTROPHYSIOLOGISCHEN MESSUNGEN 20
2.3.4.1. MESSUNGEN AN ISOLIERTEN NETZHAEUTEN (WHOLEMOUNT-PRAEPARATE) 20
2.3.4.2. MESSUNGEN AN ENZYMATISCH ISOLIERTEN ZELLEN 21
2.3.4.3. ERFASSUNG ELEKTROPHYSIOLOGISCHER GROESSEN 22
2.4. MESSUNG DER EXTRAZELLULAEREN K
+-KONZENTRATION IN DER NETZHAUT
MIT IONENSENSITIVEN MIKROELEKTRODEN 24
2.5. MIKROFLUORIMETRISCHE MESSUNGEN DES GLUTATHIONGEHALTS
IN ISOLIERTEN MUELLERZELLEN 25
2.6. STATISTISCHE AUSWERTUNG 27
3. ERGEBNISSE 28
3.1. ELEKTROPHYSIOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN
UND MESSUNG DER EXTRAZELLULAEREN KALIUMIONENKONZENTRATION 28
3.1.1. MESSUNGEN AN WHOLEMOUNT-PRAEPARATEN 28
3.1.1.1. IDENTIFIZIERUNG DER ZELLEN IN DER ISOLIERTEN RETINA 28
3.1.1.2. ELEKTROPHYSIOLOGISCHE DATEN 29
3.1.1.2.1. MESSUNGEN UNTER KONTROLLBEDINGUNGEN 30
3.1.1.2.2. BLOCKIERUNG DER K
+-STROEME 31
3.1.1.2.3. EINFLUSS VON GLUTAMAT UND GLUTAMATANALOGA AUF
MEMBRANEIGENSCHAFTEN 34
3.1.1.2.4. EINFLUSS DER EXTRAZELLULAEREN K
+- KONZENTRATION
AUF MEMBRANEIGENSCHAFTEN 39
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3.2.
3.2.1.
3.2.2.
4.
4.1.
4.2.
4.2.1.
4.2.2.
4.2.3.
MESSUNG VON AENDERUNGEN DER EXTRAZELLULAEREN K
+-KONZENTRATION
MIT IONENSENSITIVEN MIKROELEKTRODEN
MESSUNGEN AN ISOLIERTEN ZELLEN
MESSUNGEN IM WHOLE-CELL-MODUS
MESSUNGEN UNTER KONTROLLBEDINGUNGEN
BLOCKIERUNG DER K
+-STROEME
EINFLUSS DER EXTRAZELLULAEREN K+-KONZENTRATION
AUF MEMBRANLEITFAEHIGKEIT UND MEMBRANPOTENTIAL
EINFLUSS VON GLUTAMAT UND GLUTAMATANALOGA
AUF DIE MEMBRANLEITFAEHIGKEIT
CHARAKTERISIERUNG DES NA+/GLUTAMAT-TRANSPORTERS
ABHAENGIGKEIT VOM MEMBRANPOTENTIAL
ABHAENGIGKEIT VON DER EXTRAZELLULAEREN GLUTAMATKONZENTRATION
IONALE ABHAENGIGKEITEN
EFFEKTE VON GLUTAMATANALOGA
LOKALE GLUTAMATAPPLIKATION
VERGLEICHENDE UNTERSUCHUNGEN AN GESUNDEM UND PATHOLOGISCHEM
HUMANEM MATERIAL
MESSUNGEN IM CELL-ATTACHED- UND INSIDE-OUT-MODUS
MESSUNG EINES MAKROSKOPISCHEN AUSSTROMS MIT DEN EIGENSCHAFTEN
EINES DELAYED-RECTIFIER-STROMS BEI VERWENDUNG VON PHYSIOLOGISCHEN
K
+-KONZENTRATIONEN
MESSUNG VON EINWAERTS REKTIFIZIERENDEN EINZELKANAELEN
BEI VERWENDUNG VON HOHEN EXTRAZELLULAEREN K+-KONZENTRATIONEN
MIKROFLUORIMETRISCHE MESSUNG DES INTRAZELLULAEREN GLUTATHIONGEHALTS
BEEINFLUSSUNG DES INTRAZELLULAEREN GLUTATHIONGEHALTS
DURCH EXTRAZELLULAERE GABE VON GLUTAMAT UND CYSTIN
BEEINFLUSSUNG DES INTRAZELLULAEREN GLUTATHIONGEHALTS
DURCH APPLIKATION VON GLUTAMATANALOGA
DISKUSSION
ALLGEMEINE ELEKTROPHYSIOLOGISCHE EIGENSCHAFTEN
VON WHOLEMOUNT-PRAEPARATEN UND ISOLIERTEN ZELLEN
ELEKTROPHYSIOLOGISCHE CHARAKTERISIERUNG VON IONENKANAELEN
DER MUELLERZELLMEMBRAN
AUSWERTUNG DER EXPERIMENTE IM WHOLE-CELL-MODUS
AUSWERTUNG DER EXPERIMENTE IM CELL-ATTACHED- UND INSIDE-OUT-MODUS
MESSUNGEN AN HUMANEN MUELLERZELLEN
4.3. WIRKUNG VON GLUTAMAT UND GLUTAMATANALOGA
IM WHOLEMOUNT-PRAEPARAT 98
4.4. WIRKUNG VON GLUTAMAT UND GLUTAMATANALOGA AN ISOLIERTEN ZELLEN.
DER HOCHAFFINE NAVGLUTAMAT-TRANSPORTER 100
4.4.1. WIRKUNG VON GLUTAMAT UND GLUTAMATANALOGA AUF DIE K
+-LEITFAEHIGKEIT 101
4.4.2. CHARAKTERISIERUNG DES NAVGLUTAMAT-TRANSPORTERS AN MUELLERZELLEN
DES MEERSCHWEINCHENS 102
4.4.2.1. ABHAENGIGKEIT DES NAVGLUTAMAT-TRANSPORTERS VON VERSCHIEDENEN
IONEN 102
4.4.2.2. VERGLEICH DES NAVGLUTAMAT-TRANSPORTERS DER MEERSCHWEINCHEN-
MUELLERZELLE MIT KLONIERTEN GLUTAMATTRANSPORTEM 106
4.4.2.3. HEMMUNG DES NAVGLUTAMAT-TRANSPORTERS DURCH GLUTAMATANALOGA.
WIRKUNG DES GLIOTOXINS A-AMINOADIPINSAEURE 107
4.4.2.4. EXPERIMENTE ZUR LOKALEN GLUTAMATAPPLIKATION 109
4.5. BEEINFLUSSUNG DES GLUTATHIONGEHALTES VON ISOLIERTEN MUELLERZELLEN
109
4.5.1. GLUTATHION IM NERVENSYSTEM 109
4.5.2. EINFLUSS VON CYSTIN UND GLUTAMAT AUF DEN GLUTATHIONGEHALT 110
4.5.3. EINFLUSS EINER HEMMUNG DER GLUTAMATAUFNAHME
AUF DEN GLUTATHIONGEHALT 113
5. ZUSAMMENFASSUNG 117
6. LITERATURVERZEICHNIS 119 |
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