Isolierung und Charakterisierung eines Laktose- und Galaktose-spezifischen Lektins von Patienten mit Morbus Crohn:
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| Published: |
1996
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1
1.1.
LEKTINE
2
1.2.
MORBUS
CROHN
4
2.
FRAGESTELLUNG
7
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
8
3.1.
MATERIAL
8
3.1.1.
RESEKTIONSPRAEPARATE
8
3.1.2.
BIOPSIEGEWEBE
9
3.1.3.
WEITERE
MATERIALIEN
UND
REAGENZIEN
11
3.2.
ISOLIERUNG
12
3.2.1.
OP-RESEKTAT
13
3.2.2.
ACETONPULVERISIERUNG
13
3.2.3.
EXTRAKTION
14
3.2.3.1.
SALZEXTRAKTION
14
3.2.3.2.
DETERGENZEXTRAKTION
15
3.2.3.3.
EXTRAKTANREICHERUNG
15
3.2.4.
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
15
3.2.4.1.
SEPHAROSE-4B-SAEUREAKTIVIERUNG
16
3.2.4.2.
CHROMATOGRAPHIE
17
3.2.5.
PROTEINNACHWEIS
NACH
BRADFORD
19
3.2.6.
ABSCHLIESSENDE
AUFBEREITUNG
19
3.3.
CHARAKTERISIERUNG
20
3.3.1.
HAEMAGGLUTINATION
20
3.3.1.1.
ALLGEMEINE
GRUNDLAGEN
20
3.3.1.2.
SPEZIELLES
21
3.3.1.3.
DURCHFUEHRUNG
22
3.3.2.
IMMUNDIFFUSION
23
3.3.2.1.
ALLGEMEINE
GRUNDLAGEN
23
3.3.2
2.
SPEZIELLES
23
3.3.2.3.
DURCHFUEHRUNG
25
3.3.3.
IMMUNELEKTROPHORESE
26
3.3.3.1.
ALLGEMEINE
GRUNDLAGEN
26
3.3.3
2.
SPEZIELLES
26
3.3
3.3.
DURCHFUEHRUNG
27
3.3.4.
FLUORESZENZMARKIERUNG
DER
LEKTINE
UND
RINDERLUNGEN
ANFAERBUNG
28
3.3.4.1.
ALLGEMEINE
GRUNDLAGEN
UND
SPEZIELLES
28
3.3.4.2.
DURCHFUEHRUNG
29
3.3.5.
IMMUNFLUORESZENZ
MIT
NEOGLYKOPROTEINEN
30
3.3.5.1.
ALLGEMEINE
GRUNDLAGEN
UND
SPEZIELLES
30
3.3.5.2.
DURCHFUEHRUNG
31
4.
ERGEBNISSE
33
4.1.
LEKTINISOLIERUNG
33
4.1.1.
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
BRADFORD
33
4.1.2.
STANDARDKURVE
36
4.2.
LEKTINCHARAKTERISIERUNG
38
4.2.1.
HAEMAGGLUTINATION
38
4.2.2.
IMMUNDIFFUSION
UND
IMMUNELEKTROPHORESE
41
4.2.3.
IMMUNHISTOCHEMIE
43
4.3.
LEKTINLOKALISIERUNG
45
5.
DISKUSSION
50
5.1.
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
50
5.1.1.
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
50
5.1.2.
HAEMAGGLUTINATION
51
5.1.3.
IMMUNDIFFUSION
UND
IMMUNELEKTROPHORESE
52
5.1.4.
IMMUNHISTOCHEMIE
53
5.1.4.1.
RINDERLUNGENANFAERBUNG
MIT
LEKTINEN
54
5.1.4.2.
IMMUNFLUORESZENZ
MIT
NEOGLYKOPROTEINEN
AN
DARMGEWEBE
VON
MORBUS
CROHN-PATIENTEN
54
5.2.
DISKUSSION
WEITERFUEHRENDER
UNTERSUCHUNGEN
56
5.3.
DISKUSSION
IM
ZUSAMMENHANG
57
6.
ZUSAMMENFASSUNG
65
7.
LITERATURVERZEICHNIS
67 |
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