Untersuchungen über pflanzliche Abwehrreaktionen bei der Interaktion von Claviceps purpurea (Fr.) Tul. mit Secale cereale L.: licht- und elektronenmikroskopische sowie biochemische Analysen
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1996
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INHALTSVERZEICHNIS
TEIL
I
SEITE
A
EINLEITUNG
1
1
DER
MUTTERKOMPILZ
CLAVICEPS
PURPUREA
1
2
PFLANZLICHE
ABWEHRSTRATEGIEN
5
3
PHENOLISCHE
VERBINDUNGEN
UND
DER
PHENYLPROPANOIDSTOFFWECHSEL
8
4
ZIELE
DER
ARBEIT
13
S
MATERIAL
UND
METHODEN
15
1
MATERIAL
15
1.1
SECALE
CEREALE
15
1.2
CLAVICEPS
PURPUREA
15
2
ANZUCHT
UND
KULTURBEDINGUNGEN
15
2.1
SECALE
CEREALE
15
2.2
CLAVICEPS
PURPUREA
15
3
INOKULATION
15
3.1
ENTWICKLUNG
EINER
INFEKTIONSMETHODE
15
3.2
STANDARDMETHODE
DER
INOKULATION
16
4
MAKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNGEN
16
5
LICHTMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNGEN
16
5.1
HERSTELLUNG
VON
HANDSCHNITTEN
16
5.2
HERSTELLUNG
VON
GEFRIERSCHNITTEN
16
5.3
HERSTELLUNG
VON
SEMIDUENNSCHNITTEN
17
5.3.1
PRAEPARATION
DER
OBJEKTE
17
5.3.2
CHEMISCHE
FIXIERUNG
18
5.3.3
ENTWAESSERUNG
18
5.3.4
EINBETTUNG
18
5.3.5
MIKROTOMIE
20
5.3.6
BESCHICHTUNG
VON
OBJEKTTRAEGERN
20
5.3.7
FAERBUNGEN
UND
NACHWEISREAKTIONEN
21
5.3.8
MIKROSKOPIE
UND
PHOTOGRAPHIE
21
6
ELEKTRONENMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNGEN
22
6.1
HERSTELLUNG
VON
ULTRADUNNSCHNITTEN
22
6.1.1
PRAEPARATION
DER
OBJEKTE
22
6.1.2
CHEMISCHE
FIXIERUNG
22
6.1.3
ENTWAESSERUNG
22
6.1.4
EINBETTUNG
22
6.1.5
MIKROTOMIE
23
6.1.6
BEFILMEN
VON
NETZEN
24
6.1.7
KONTRASTIERUNGEN
UND
NACHWEISREAKTIONEN
24
6.1.8
MIKROSKOPIE
UND
PHOTOGRAPHIE
25
INHALTSVERZEICHNIS
7
ALLGEMEINE
FAERBUNGEN
UND
CYTOCHEMISCHE
NACHWEISE
25
FUER
DIE
LICHTMIKROSKOPIE
7.1
VITALFAERBUNGEN
25
7.1.1
NEUTRALROT
25
7.1.2
FLUORESCEINDIACETAT
(FDA)
25
7.2
NACHWEIS
VON
NEUTRALEN
KOHLENHYDRATEN
26
7.2.1
PERJODSAEURE-SCHIFF
(PAS)
26
7.2.2
CALCOFLUOR
WHITE
ST
28
7.2.3
CHLORZINKJOD
29
7.2.4
RESORCINBLAU
29
7.2.5
ANILINBLAU
30
7.2.6
JODJODKALIUM
31
7.2.7
FLUORESCEINISOTHIOCYANAT-GEKOPPELTES
WHEAT-GERM-AGGLUTININ
(FITC-WGA)
-
31
7.3
NACHWEIS
VON
SAUREN
KOHLENHYDRATEN
32
7.3.1
RUTHENIUMROT
32
7.3.2
TOLUIDINBLAU
O
32
7.3.3
METHYLENBLAU
33
7.4
NACHWEIS
VON
PROTEINEN
34
7.4.1
COOMASSIE
BRILLIANT
BLUE
34
7.4.2
AMIDOSCHWARZ
34
7.5
NACHWEIS
VON
LIPIDEN
UND
LIPOPHILEN
SUBSTANZEN
34
7.5.1
SUDAN
IV
34
7.5.2
SUDANSCHWARZ
35
7.5.3
NILBLAU
35
7.5.4
TOLUIDINBLAU
PH
11,1
35
7.6
NACHWEIS
VON
CALCIUM
BZW.
CALCIUMOXALAT
35
7.6.1
NACHWEIS
MIT
SILBEMITRAT
UND
WASSERSTOFFPEROXID
35
7.6.2
NACHWEIS
MIT
GLYOXAL-BIS-(2-HYDROXYANIL)
(GBAH)
36
7.7
NACHWEIS
VON
PHOSPHAT
36
7.7.1
'
EXTRAKTION
VON
POLYPHOSPHATEN
MIT
KALTER
TRICHLORESSIGSAEURE
36
7.7.2
NACHWEIS
VON
POLYPHOSPHATEN
MIT
AMMONIUMMOLYBDAEN
36
7.8
NACHWEIS
VON
PHENOLISCHEN
VERBINDUNGEN
37
7.8.1
EIGENFLUORESZENZ
IM
UV-BEREICH
37
7.8.2
TOLUIDINBLAU
0
37
7.8.3
TETRAZOTIERTES
O-DIANISIDIN
37
7.8.4
FAST
RED
GG
37
7.8.5
EISEN(III)-CHLORID
38
7.8.6
EISEN(III)-SULFAT
38
7.8.7
SAEUREFUCHSIN
38
7.9
NACHWEIS
VON
LIGNIN
BZW.
LIGNINKOMPONENTEN
39
7.9.1
PHLOROGLUCIN/HCL
39
7.9.2
RESORCINBLAU/HCL
39
7.9.3
SAFRANIN-ASTRABLAU
39
7.9.4
KALIUMPERMANGANAT/HCL/NHJ
(MAEULE-TEST)
40
7.9.5
MARKIERUNG
MIT
ANTI-P-CUMARSAEURE-ANTIKOERPEM
40
INHALTSVERZEICHNIS
7.10
NACHWEIS
VON
AKTIVEN
PEROXIDASEN
(DAB-NACHWEIS)
41
7.11
NACHWEIS
VON
AKTIVEN
PHENOL-OXIDASEN
(DOPA-NACHWEIS)
45
7.12
NACHWEIS
VON
SUBSTRATEN
VON
PEROXIDASEN
46
7.13
MARKIERUNG
MIT
ANTI-CHALKON-SYNTHASE-ANTIKOERPEM
47
8
KONTRASTIERUNGEN
UND
CYTOCHEMISCHE
NACHWEISE
FUER
DIE
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
48
8.1
KONTRASTIERUNG
MIT
URANYLACETAT
UND
BLEICITRAT
48
8.2
KONTRASTIERUNG
MIT
KALIUMPERMANGANAT
48
8.3
KONTRASTIERUNG
MIT
OSMIUMTETROXID
49
8.4
PEIJODSAEURE-SILBERPROTEINAT
(PATAG)
-NACHWEIS
49
8.5
NACHWEIS
VON
AKTIVEN
PEROXIDASEN
(DAB-NACHWEIS)
51
8.6
NACHWEIS
VON
AKTIVEN
PHENOL-OXIDASEN
(DOPA-NACHWEIS)
51
9
EXTRAKTION
UND
CHARAKTERISIERUNG
PHENOLISCHER
VERBINDUNGEN
AUS
ROGGENFRUCHTKNOTEN
51
9.1
AUFARBEITUNG
DER
PROBEN
UND
EXTRAKTION
51
9.2
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHISCHE
UNTERSUCHUNGEN
52
9.3
HPLC-ANALYSEN
53
10
BEHANDLUNG
VON
ROGGENPFLANZEN
MIT
DEN
PAL-INHIBITOREN
L-AOPP
UND
AOA
54
ERGEBNI
SS
E
55
1
INFEKTIONSVERLAUF
55
2
MORPHOLOGIE
UND
VITALITAET
DER
PILZHYPHEN
58
2.1
VERSCHIEDENE
HYPHENTYPEN
58
2.1.1
IM
FRUCHTKNOTENGEWEBE
WACHSENDE
HYPHEN
AUS
FRUEHEN
INFEKTIONSSTADIEN
58
2.1.2
HYPHEN
IM
BEREICH
DER
FRUCHTKNOTENOBERFLAECHE
58
2.1.3
HYPHEN
IM
BEREICH
DER
DAUERHAFTEN
WIRT-PARASIT-GRENZE
61
2.1.4
SPHACELIALE
HYPHEN
62
2.1.5
SKLEROTIALE
HYPHEN
63
2.1.6
HYPHEN
AUS
AXENISCHER
KULTUR
63
2.2
HISTOCHEMISCHE
UNTERSUCHUNGEN
ZUM
AUFBAU
DER
ZELLWAENDE
67
2.2.1
CHITIN-GEHALT
67
2.2.2
6-1
,3-GLUCAN-GEHALT
68
2.3
VITALITAET
69
3
NACHWEIS
VERSCHIEDENER
SUBSTANZEN
IM
INTERAKTIONSBEREICH
70
3.1
CALLOSE
70
3.2
CALCIUMOXALAT
70
3.3
PHENOLISCHE
VERBINDUNGEN
71
INHALTSVERZEICHNIS
4
NACHWEIS
PHENOLISCHER
VERBINDUNGEN
72
4.
1
CYTOCHEMISCHE
NACHWEISE
VON
PHENOLEN
72
4.1.1
FARBREAKTIONEN
UND
KONTRASTSEIGENSCHAFTEN
72
4.1.2
LOKALISATION
DER
PHENOLE
75
4.2
BIOCHEMISCHE
NACHWEISE
VON
PHENOLEN
82
4.2.1
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHISCHE
UNTERSUCHUNGEN
82
4.2.2
HPLC-ANALYSEN
84
5
WACHSTUNISVERHALTEN
VON
CLAVICTPS
IN
DEN
PHENOLREICHEN
86
GEWEBSBEREICHEN
5.1
BASISBEREICHE
DER
GRIFFELAESTE
86
5.2
BASISBEREICHE
DER
STAUBBLAETTER
87
5.3
EPIDERMIS
87
5.4
APIKALER
BEREICH
DES
PERIKARPS
89
5.5
SAMENANLAGE
89
5.6
WIRT-PARASIT-GRENZE
89
6
NACHWEIS
VERSCHIEDENER
ENZYME
BZW.
IHRER
POTENTIELLEN SUBSTRATE
91
IN
DEN
INTERAKTIONSBEREICHEN
6.1
PEROXIDASEN
91
6.2
PHENOL-OXIDASEN
95
6.3
CHALKON-SYNTHASE
99
6.4
POTENTIELLE
SUBSTRATE
VON
PEROXIDASEN
100
7
EINFLUSS
DER
PAL-HENUNSTOFFE
AUF
DAS
INTERAKTIONSYSTEM
102
7.1
ENTWICKLUNG
DER
ROGGENAEHREN
102
7.2
VORKOMMEN
VON
PHENOLEN
103
7.2.1
NICHT
WANDASSOZIIERTE
PHENOLE
103
7.2.2
WANDGEBUNDENE
BZW.
WANDASSOZIIERTE
PHENOLE
104
7.3
INFEKTIONSVERHALTEN
VON
CLAVICEPS
NACH
HEMMSTOFFBEHANDLUNG
105
B
DIS
K
USSIO
N
107
1
INFEKTIONSVERLAUF
107
2
INDUKTION
PFLANZLICHER
REAKTIONEN
NACH EINER
INFEKTION
109
2.1
VORKOMMEN
VON
CALLOSE
109
2.2
VORKOMMEN
VON
CALCIUMOXALAT
111
2.3
VORKOMMEN
VON
PHENOLISCHEN
VERBINDUNGEN
114
3
NAEHERE
CHARAKTERISIERUNG
DER
NACHGEWIESENEN
PHENOLE
119
3.1
CYTOCHEMISCHE
UNTERSUCHUNGEN
119
3.2
BIOCHEMISCHE
UNTERSUCHUNGEN
122
INHALTSVERZEICHNIS
4
NACHWEIS
VON
ENZYMEN
DES
PHENOLSTOFFWECHSELS
BZW.
VON
IHREN
POTENTIELLEN
SUBSTRATEN
127
4.1
POTENTIELLE
SUBSTRATE
VON
PEROXIDASEN
127
4.2
PFLANZLICHE
PEROXIDASEN
128
4.3
PFLANZLICHE
PHENOL-OXIDASEN
131
4.4
PILZLICHE
PEROXIDASEN
BZW.
PHENOL-OXIDASEN
133
4.5
CHALKON-SYNTHASE
136
5
BEDEUTUNG
DER
PHENOLE
IM
INTERAKTIONSSYSTEM
137
5.1
UNTERSCHIEDE
IN
DER
HYPHENMORPHOLOGIE
137
5.2
ABNAHME
DER
VITALITAET
DER
HYPHEN
IN
PHENOLREICHEN
GEWEBSBEREICHEN
140
5.3
WACHSTUMSVERHALTEN
VON
CLAVICEPS
IN
PHENOLREICHEN
GEWEBSBEREICHEN
143
5.4
MOEGLICHE
WIRKUNGSWEISE
PHENOLISCHER
VERBINDUNGEN
IM
INTERAKTIONS
SYSTEM
149
5.5
OFFENE
FRAGEN
151
E
ZUSAMMENFASSUNG
153
E
LITERATURVERZEICHNIS
157
G
ANHANG
177
1
ABKUERZUNGEN
177
2
CHEMIKALIEN
UND
HILFSMITTEL
178
3
GERAETE
180
TEIL
II
ABBILDUNGEN |
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