Lipide und Lipidumsetzungen im Stammholz von Robinia pseudoacacia L. während der Kernholzbildung:
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INHALTSVERZEICHNIS
I
VERZEICHNIS
DER
ABBILDUNGEN
V
VERZEICHNIS
DER
TABELLEN
VI
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
VII
NOMENKLATUR
DER
FETTSAEUREN
VIII
1.
EINLEITUNG
1
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
8
2.1
ENTNAHME
UND
AUFARBEITUNG DER
PROBEN
8
2.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
RADIALEN
LIPIDVERTEILUNG
9
2.2.1
EXTRAKTION
DER
LIPIDE
9
2.2.2
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHISCHE
AUFTRENNUNG
UND
IDENTIFIZIERUNG
DER
EINZELNEN
LIPIDKLASSEN
10
2.2.3
ISOLIERUNG
DER
LIPIDFIAKTIONEN
AUS
DEM
SILICAGEL/WIEDERFINDUNGSRATE
11
2.2.4
QUANTITATIVE
ANALYSE
DER
LIPIDE
13
2.2.4.1
FETTSAEUREN
13
2.2.4.2
DI-ZTRIGLYCERIDE
UND
FREIES
GLYCEROL
15
2.2.4.3
FREIE
STEROLE
17
2.2.4.4
STEROLESTER
19
2.2.4.5
PHOSPHOLIPIDE
20
2.3
LIPOLYTISCHE
AKTIVITAETEN
22
2.3.1
BESTIMMUNG
DES
GESAMTPROTEINGEHALTES
22
2.3.2
EXTRAKTION
DER
ENZYME
23
2.3.2.1
HERSTELLUNG
DES
ROHEXTRAKTES
23
2.3.2.2
KONZENTRIERUNG
DURCH
ULTRAFILTRATION
23
2.3.3
QUANTIFIZIERUNG
DER
ENZYMUMSAETZE
24
2.3.3.1
NITROPHENYLPAIMITATSPALTUNG
24
2.3.3.2
TRIACYLGLYCEROL-ACYLHYDROLASE
(LIPASE)
25
2.3.3.2.1
OPTIMIERUNG
DER
VERSUCHSBEDINGUNGEN
25
2.3.3.2.1.1
HERSTELLUNG
DES
ENZYMKONZENTRATS
26
2.3.3.2.1.2
ENZYMATISCHE
HYDROLYSE
-
OPTIMIERUNG
DER
REAKTIONS
BEDINGUNGEN
26
2.3.3.2.2
BESTIMMUNG
DER
ENZYMAKTIVITAET
30
2.3.3.3
PHOSPHOLIPASE
A
31
2.3.3.3.1
OPTIMIERUNG
DER
VERSUCHSBEDINGUNGEN
31
2.3.3.3.1.1
EXTRAKTION
UND
KONZENTRIERUNG
31
2.3.3.3.
1.2
ENZYMATISCHE
HYDROLYSE
OPTIMIERUNG
DER
REAKTIONS
BEDINGUNGEN
32
23.3.3.2
BESTIMMUNG
DER
ENZYMAKTIVITAET
35
2.3.3.4
PHOSPHOLIPASE
C
36
2.3.3.4.
1
OPTIMIERUNG
DER
VERSUCHSBEDINGUNGEN
36
2.3.3.4.1.1
HERSTELLUNG
DES
ENZYMKONZENTRATS
37
2.3.3.4.
1.2
ENZYMATISCHE
HYDROLYSE
-
OPTIMIERUNG
DER
REAKTIONS
BEDINGUNGEN
37
2.3.3.4.2
BESTIMMUNG
DER
ENZYMAKTIVITAET
40
2.3.3.S
PHOSPHOLIPASE
D
41
2.3.3.5.1
OPTIMIERUNG
DER
VERSUCHSBEDINGUNGEN
41
2.3.3.5.1.1
EXTRAKTION
UND
KONZENTRIERUNG
DER
PROTEINE
41
2.3.3.5.1.2
ENZYMATISCHE
HYDROLYSE
-
OPTIMIERUNG
DER
REAKTIONS
BEDINGUNGEN
42
2.3.3.5.2
BESTIMMUNG
DER
ENZYMAKTIVITAET
45
2.3.3.6
LIPOXYGENASE
46
2.3.3.6.1
ENZYMEXTRAKTION
46
2.3.3.6.2
HERSTELLUNG
DER
SUBSTRATLOESUNGEN
47
2.3.3.6.3
MESSUNGEN
MIT
DER
SAUERSTOFFELEKTRODE
47
2.3.3.6.4
CHEMILUMINESZENZMESSUNG
48
2.3.3.6.5
SPEKTROPHOTOMETRISCHE
QUANTIFIZIERUNG
DES
ENZYMUMSATZES
49
2.4
LISTE
DER
VERWENDETEN
CHEMIKALIEN
51
2.5
AUSWERTUNG
UND
STATISTIK
54
2.6
DISKUSSION
DER
METHODEN
55
3.
ERGEBNISSE
66
3.1
DIE
RADIALE
LIPIDVERTEILUNG
66
3.1.1
FREIE
FETTSAEUREN
67
3.1.1.1
DIE
GESAMTGEHALTE
IM
RADIALGRADIENTEN
67
3.1.1.2
ZUSAMMENSETZUNG
DER
FREIEN
FETTSAEUREN
68
3.1.1.3
MITTLERE
KETTENLAENGE
UND
SAETTIGUNGSGRAD
69
3.1.2
DI
BZW.
TRIACYLGLYCEROLE
UND
FREIES
GLYCEROL
71
3.1.2.1
GESAMTGEHALTE
AN
FREIEM
GLYCEROL
IM
RADIALGRADIENTEN
71
3.1.2.2
GESAMTGEHALTE
AN
DI
BZW.
TRIGLYCERIDEN
IM
RADIALGRADIENTEN
71
3.1.2.3
FETTSAEUREZUSAMMENSETZUNG
DER
DIGLYCERIDE
72
3.1.2.4
MITTLERE
KETTENLAENGE
UND
SAETTIGUNGSGRAD
IN
DEN
FETTSAEUREN
DER
DIGLYCERIDE
73
3.1.2.5
FETTSAEUREZUSAMMENSETZUNG
DER
TRIGLYCERIDE
74
3.1.2.6
MITTLERE
KETTENLAENGE
UND
SAETTIGUNGSGRAD
IN
DEN
FETTSAEUREN
DER
TRIGLYCERIDE
73
3.1.3
FREIE
STEROLE
UND
STEROLESTER
77
3.1.3.1
DIE
GESAMTGEHALTE
IM
RADIALGRADIENTEN
77
3.1.3.2
ZUSAMMENSETZUNG
DER
STEROLKOMPONETEN
IN
DEN
FREIEN
STEROLEN
77
3.1.3.3
ZUSAMMENSETZUNG
DER
STEROLKOMPONENTEN
IN
DEN
STEROLESTEM
79
3.1.3.4
ZUSAMMENSETZUNG
DER
IN
DEN
STEROLESTEM
GEBUNDENEN
FETTSAEUREN
80
3.1.3.5
MITTLERE
KETTENLAENGE
UND
SAETTIGUNGSGRAD
IN
DEN
FETTSAEUREN
DER
STEROLESTER
81
3.1.4
PHOSPHOLIPIDE
83
3.1.4.1
DIE
GESAMTGEHALTE
IM
RADIALGRADIENTEN
83
3.1.4.2
ZUSAMMENSETZUNG
DER
PHOSPHOLIPIDKOMPONENTEN
83
3.1.4.3
ZUSAMMENSETZUNG
DER
MIT
DEN
PHOSPHOLIPIDEN
VERESTERTEN
FETTSAEUREN
86
3.1.4.4
MITTLERE
KETTENLAENGE UND
SAETTIGUNGSGRAD
IN
DEN
FETTSAEUREN
DER
PHOSPHOLIPIDE
87
3.2
LIPOLYTISCHE
AKTIVITAETEN
88
3.2.1
DER
GESAMTPROTEINGEHALT
88
3.2.2
DIE
NITROPHENYLPALMITATSPALTUNG
89
3.2.3
AKTIVITAET
DER
TRIACYLGLYCEROL-ACYLHYDROLASE
(LIPASE)
90
3.2.4
AKTIVITAETEN
DER
PHOSPHOLIPASE
A
91
3.2.3
AKTIVITAET
DER
PHOSPHOLIPASE
C
94
3.2.6
AKTIVITAET
DER
PHOSPHOLIPASE
D
93
3.2.7
AKTIVITAET
DER
LIPOXYGENASE
96
4.
DISKUSSION
97
4.1
QUANTITATIVE
VERTEILUNG
DER
SPEICHERLIPIDE
97
4.2
QUANTITATIVE
UND
QUALITATIVE
VERTEILUNG
DER
STRUKTURLIPIDE 100
4.2.1
PHOSPHOLIPIDE
100
4.2.2
STEROLKOMPONENTEN
103
4.3
RADIALGRADIENTEN
FREIER
UND
VERESTERTER
FETTSAEUREN
107
4.4
LIPASEAKTIVITAET
UND
ABBAU
DER
SPEICHERLIPIDE
110
4.5
DIE
ROLLE
VON
PHOSPHOLIPASEN
UND
LIPOXYGENASE
BEI
DER
MEMBRANALEN
SENESZENZ
112
4.6
DIE
PHOSPHOLIPASEN
UND
IHRE
BEDEUTUNG
FUER
DIE
BEREITSTELLUNG
BIO
AKTIVER
MOLEKUELE
115
5.
ZUSAMMENFASSUNG
119
6.
LITERATURVERZEICHNIS
121 |
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