Freie Sauerstoffradikale im Reperfusionsschaden der Leber: Nachweis und Einflussmöglichkeiten
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1991
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LTSVER2EICHNIS
SEITE
1 EINLEITUNG 1
1.1 POSTISCHAEMISCHE GEWEBESCHAEDEN - REPERFUSIONSSCHAEDEN 1
1.2 FREIE SAUERSTOFFRADIKALE IM POSTISCHAEMISCHEN
REPERFUSIONSSCHAEDEN 2
1.3 RADIKALMEDIIERTER REPERFUSIONSSCHAEDEN IM LEBERGEWEBE ? 3
1.4 THEORETISCHE BEEINFLUSSUNG DES REPERFUSIONSSCHADENS 4
1.5 THERAPEUTISCHE ASPEKTE 4
1.6 FRAGESTELLUNG 5
2 MATERIAL UND METHODE 6
2.1 TIERE 6
2.1.1 HAEMOGLOBINFREIE RATTENLEBERPERFUSION 6
2.1.2 IN VIVO VERSUCHE ~ 7
2.2 GRUPPENZUTEILUNG, BIOMETRISCHE PLANUNG 10
2.3 BIOCHEMISCHE UNTERSUCHUNGEN 12
2.3.1 ALLGEMEINES 12
2.3.2 PROBENVORBEREITUNG 12
2.3.3 BESTIMMUNG VON GLUTATHION UND GLUTATHIONDISULFID
(HPLC) 14
2.3.4 BESTIMMUNG VON GLUTATHION UND GLUTATHIONDISULFID 14
(PHOTOMETRISCH)
2.3.5 BESTIMMUNG VON MALONDIALDEHYD (MDA) 16
2.3.6 BESTIMMUNG DER KONJUGIERTEN DIENE 16
2.3.7 BESTIMMUNG DER PURINE 17
2.3.8 BESTIMMUNG DER MYELOPEROXIDASE 17
2.3.9 BESTIMMUNG DER GLUTATHION (GSH-) PEROXIDASE 18
2.3.10 ELEKTRONEN-SPIN-RESONANZ (ESR) 18
2.3.11 BESTIMMUNG DER FREIEN FETTSAEUREN 19
2.3.12 BESTIMMUNG VON PROTEIN -19
2.3.13 BESTIMMUNG DER KATALASE-AKTIVITAET 20
2.3.14 BESTIMMUNG DER SUPEROXIDDISMUTASE-AKTIVITAET 21
2.4 HISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN 21
3 ERGEBNISSE 23
3.1 ERZEUGUNG EINES REPERFUSIONSSCHADENS 23
3.1.1 GLUTATHION 23
3.1.2 GLUTATHIONDISULFID 28
3.1.3 MALONDIALDEHYD 3 0
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3.1.4 KONJUGIERTE DIENE
3.1.5 PROTEIN
3.1.6 HISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN
3.2 ZUSAETZLICHE UNTERSUCHUNGEN ZUR EINGRENZUNG EINES
RADIKALBEDINGTEN REPERFUSIONSSCHADENS
3.2.1 GLUTATHION-PEROXIDASE
3.2.2 ENERGY CHARGE
3.2.3 ELEKTRONEN-SPIN-RESONANZ-SPEKTROSKOPIE
3.2.3.1 ELEKTRONEN-SPIN-RESONANZ IN KONTROLLTIEREN
3.2.3.2 ELEKTRONEN-SPIN-RESONANZ IN ISCHAEMIE UND REPERFUSION
3.2.4 FREIE FETTSAEUREN
3.3 EINGRENZUNG DES REPERFUSIONSSCHADENS DURCH
RADIKALFAENGER
3.3.1 GLUTATHION
3.3.2 GLUTATHIONDISULFID ~
3.3.3 MALONDIALDEHYD
3.3.4 KONJUGIERTE DIENE
3.3.5 MYELOPEROXIDASE
3.3.6 HISTOLOGIE
37
38
41
41
41
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59
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69
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4
4.1
4.1.1
4.1.2
4.1.3
4.1.4
4.1.5
4.1.6
4.1.7
4.1.8
4.2
4.2.1
4.2.2
4.2.3
4.3
DISKUSSION
PHYSIKALISCHE UND MOLEKULARE ENTSTEHUNGSMECHANISMEN
FREIER SAUERSTOFFRADIKALE IN DER REPERFUSION UND IHRE
FOLGEN
BEDEUTUNG VON METALLIONEN IN DER RADIKALENTSTEHUNG
ZELLULAERE SCHUTZMECHANISMEN
CHEMISCHE REAKTIVITAET FREIER SAUERSTOFFRADIKALE IN
BIOLOGISCHEN SYSTEMEN
FOLGEN DER RADIKALENTSTEHUNG - LIPIDPEROXIDATION
VERMEHRTE RADIKALENTSTEHUNG IN DER POSTISCHAEMISCHEN
REPERFUSION - KONVERSION XANTHINDEHYDROGENASE IN
XANTHINOXIDASE _
KONVERSION XDH - XO AUCH IM LEBERGEWEBE ?
RADIKALPRODUKTION IN AKTIVIERTEN LEUKOCYTEN UND
MAKROPHAGEN
ANDERE POTENTIELLE ENTSTEHUNGSMECHANISMEN
SCAVENGER DER FREIEN SAUERSTOFFRADIKALE
ALLOPURINOL
SUPEROXIDDISMUTASE / CATALASE
DESFEROXAMIN ALS METALLCHELATBILDNER
SCAVENGER IM REPERFUSIONSSCHADEN DER LEBER - EIGENE
ERGEBNISSE
81
81
82
84
85
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90
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92
92
93
93
4.3.1 RELEVANZ DES TIERMODELLS 94
4.3.2 STUDIENDESIGN ZUR ERZIELUNG EINES REPERFUSIONSSCHADENS 95
4.3.3 NACHWEIS FREIER RADIKALE DURCH ELEKTRONEN-SPIN-
RESONANZ 96
4.3.3.1 VORAUSSETZUNGEN 97
4.3.3.2 NACHWEIS DER RADIKALE MIT PBN ALS SPINFAENGER 98
4.3.3.3 ESR-NACHWEIS DER RADIKALE IM ZEITVERLAUF DER
' REPERFUSION - 99
4.3.4 INITIIERUNG DER LIPIDPEROXIDAFION - FREIE RADIKALE 100
4.3.4.1 NACHWEISMETHODEN DER LIPIDPEROXIDATION 100
4.3.4.2 MALONDIALDEHYD 101
4.3.4.3 KONJUGIERTE DIENE 101
4.3.5 FREIE FETTSAEUREN - MARKER DER LIPIDPEROXIDATION 102
4.3.6 ZELLULAERE SCHUTZMECHANISMEN 103
4.3.7 GLUTATHION IN LEBERISCHAEMIE UND -REPERFUSION 104
4.3.8 BEEINFLUSSUNG DES REPERFUSIONSSCHADENS DURCH
SCAVENGER 108
4.4 HISTOLOGISCHE BESTAETIGUNG DES REPERFUSIONSSCHADENS -
GRUNDLAGE FUER EINE ERWEITERUNG BISHERIGER HYPOTHESEN 109
4.4.1 KONVERSION VON XANTHINDEHYDROGENASE IN XANTHINOXIDASE
ALS URSACHE DES REPERFUSIONSSCHADENS DER LEBER ? 110
4.4.2 OH- - MEDUERTER REPERFUSIONSSCHADEN DER LEBER -
BEDEUTUNG DER METALL - (EISEN) - IONEN 111
4.5 KLINISCHE WERTIGKEIT DER THERAPIE EINES
REPERFUSIONSSCHADENS 113
5 ZUSAMMENFASSUNG 115
6 LITERATURVERZEICHNIS 119
7 ANERKENNUNG UND DANK 146 |
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