Strahlenwirkung auf Kristallin:
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGEN
ZUSAMMENFASSUNG
1
3
1.
EINLEITUNG
7
1.1.
WIRKUNG
VON
STRAHLUNG
AUF
BIOLOGISCHE
OBJEKTE
7
1.2.
IONISIERENDE
STRAHLUNG
7
1.2.1.
DOSIS
UND
DOSISLEISTUNG
7
1.2.2.
STRAHLENCHEMIE
DES
WASSERS
8
1.2.3.
EINFLUSS
VON
SAUERSTOFF
8
1.2.4.
WIRKUNG
IONISIERENDER
STRAHLUNG
AUF
PROTEINE
9
1.2.5.
MODIFIKATION
DER
STRAHLENWIRKUNG
10
1.3.
UV-STRAHLUNG
13
1.3.1.
DEFINITION
DER
UV-STRAHLUNG
13
1.3.2.
UV-STRAHLUNG
UND
DOSIS
13
1.3.3.
WIRKUNG
VON
UV-STRAHLUNG
AUF
PROTEINE
13
1.3.4.
MODIFIKATION
DER
STRAHLENWIRKUNG
15
1.4.
DAS
AUGE
ALS
UNTERSUCHUNGSOBJEKT
16
1.4.1.
STRAHLENEXPOSITION
DES
AUGES
16
1.4.2.
ENTWICKLUNG
UND
AUFBAU
DER
AUGENLINSE
17
1.5.
KRISTALLINE
18
1.5.1.
CHARAKTERISIERUNG
DER
NATIVEN
KRISTALLINE
18
1.5.1.1.
ALPHA-KRISTALLINE
18
1.5.1.2.
BETA/GAMMA-KRISTAHINE
19
1.5.1.3.
TAXONSPEZIFISCHE
KRISTALLINE
20
1.5.2.
STRAHLENWIRKUNG
AUF
KRISTALLIN
20
1.5.2.1.
ROENTGENBESTRAHLUNG
20
1.5.2.2.
UV-BESTRAHLUNG
21
1.5.3.
ALTERUNG
DER
AUGENLINSE
UND
KATARAKTENTSTEHUNG
22
2.
PROBLEMSTELLUNG
25
3.
MATERIALIEN
UND
METHODEN
27
3.1.
MATERIALIEN
27
3.1.1.
PUFFER
27
3.1.2.
KRISTALLINE
27
3.1.3.
ADDITIVA
27
3.1.4.
MARKERPROTEINE
28
INHALTSVERZEICHNIS
II
3.1.5.
SONSTIGE
VERWENDETE
SUBSTANZEN
29
3.2.
GERAETE
29
3.3.
METHODEN
31
3.3.1.
ISOLIERUNG
UND
ANREICHERUNG
DER
KRISTALLINE
31
3.3.1.1.
LINSENAUFSCHLUSS
UND
GEWINNUNG
DES
KRISTAHIN-ROHEXTRAKTES
31
3.3.1.2.
CHROMATOGRAPHIE
31
3.3.1.3.
KONZENTRIERUNG
DER
KRISTALLINFRAKTIONEN
32
3.3.2.
ROENTGENBESTRAHLUNG
UND
DOSIMETRIE
32
3.3.3.
UV-BESTRAHLUNG
UND
DOSIMETRIE
34
3.3.4.
BEGASUNG
34
3.3.5.
SPEKTROSKOPISCHE
METHODEN
34
3.3.5.1.
UV-ABSORPTIONSSPEKTROSKOPIE
34
3.3.5.2.
INTRINSISCHE
FLUORESZENZ
35
3.3.5.3.
BITYROSIN-FLUORESZENZ
36
3.3.5.4.
EXTRINSISCHE
FLUORESZENZ
36
3.3.5.5.
CIRCULARDICHROISMUS
37
3.3.6.
SDS-ELEKTROPHORESE
38
3.3.7.
GROESSENAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE
39
3.3.8.
VISKOSIMETRIE
39
3.3.8.1.
BESTIMMUNG
DER
VISKOSITAET
39
3.3.8.2.
ABSCHAETZUNG
DES
MOLEKULARGEWICHTES
40
3.3.9.
ANALYTISCHE
ULTRAZENTRIFUGATION
40
3.3.9.1.
SEDIMENTATIONSKOEFFIZIENT
40
3.3.9.2.
MOLEKULARGEWICHT
41
3.3.10.
CHEMISCH-ANALYTISCHE
METHODEN
42
3.3.10.1.
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
42
3.3.10.2.
SH-GRUPPEN-BESTIMMUNG
42
3.3.10.3.
DISUIFIDBRUECKEN-BESTIMMUNG
43
3.3.10.4.
H2O
2-BSSTIMMUNG
45
3.3.11.
BESTIMMUNG
DES
BRECHUNGSINDEX
45
3.3.12.
QUANTIFIZIERUNG
DER
SCHUTZEFFEKTE
46
3.3.12.1.
SCHUTZEFFEKTE
46
3.3.12.2.
ALLGEMEINE
SCHUTZWIRKUNG
47
4.
ERGEBNISSE
48
4.1.
VORVERSUCHE
MIT
DEM
KRISTALLIN-ROHEXTRAKT
48
4.1.1
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
48
4.1.2
SDS-ELEKTROPHORESE
48
4.1.3.
VARIATION
DER
TEMPERATUR
49
4.1.4.
SH
UND
SS-GRUPPEN-BESTIMMUNG
49
INHALTSVERZEICHNIS
III
4.2.
ISOLIERUNG
UND
ANREICHERUNG
DER
KRISTALLINE
50
4.2.1.
GELFILTRATION
50
4.2.2.
KONZENTRIERUNG
UND
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
DER
ISOLIERTEN
KRISTALLINE
53
4.2.3.
SDS-ELEKTROPHORESE
53
4.2.4.
ISOLIERUNG
NACH
BESTRAHLUNG
DES
KRISTALLIN-ROHEXTRAKTES
54
4.3.
DOSIMETRIE
FUER
DIE
BESTRAHLUNGSVERSUCHE
55
4.4.
UNTERSUCHUNG
DER
WIRKUNG
VON
ROENTGENSTRAHLEN
UND
UV-LICHT
AUF
KRISTALLIN
MIT
VERSCHIEDENEN
METHODEN
56
4.4.1.
PH-WERT-BESTIMMUNG
56
4.4.2.
BESTIMMUNG
DER
LEITFAEHIGKEIT
56
4.4.3.
UV-ABSORPTIONSSPEKTROSKOPIE
56
4.4.3.1.
DOSISVARIATION
BEIM
KRISTAIIIN-ROHEXTRAKT
56
4.4.3.2.
DOSISVARIATION
BEI
EINZELNEN
KRISTAIIIN-SPEZIES
61
4.4.3.3.
VARIATION
DER
KONZENTRATION
BEIM
KRISTAIIIN-ROHEXTRAKT
65
4.4.4.
FLUORESZENZSPEKTROSKOPIE
67
4.4.4.1
DOSISVARIATION
BEIM
KRISTAIIIN-ROHEXTRAKT
67
4.4.4.2
DOSISVARIATION
BEI
EINZELNEN
KRISTALLIN-SPEZIES
71
4.4.4.3.
VARIATION
DER
KONZENTRATION
BEIM
KRISTAIIIN-ROHEXTRAKT
78
4.4.4.4.
BITYROSIN
BEIM
KRISTAIIIN-ROHEXTRAKT
79
4.4.4.5.
BESTIMMUNG
DER
HYDROPHOBEN
OBERFLAECHE
80
4.4.5
CIRCULARDICHROISMUS
83
4.4.6.
SDS-ELEKTROPHORESE
87
4.4.7.
GROESSENAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE
88
4.4.8.
BESTIMMUNG
DER
DICHTE
UND
DES
PARTIELLEN
SPEZIFISCHEN
VOLUMENS
89
4.4.9.
VISKOSIMETRIE
91
4.4.10.
ANALYTISCHE
ULTRAZENTRIFUGATION
93
4.4.10.1.
BESTIMMUNG
DES
SEDIMENTATIONSKOEFFIZIENTEN
93
4.4.10.2.
BESTIMMUNG
DES
MOLEKULARGEWICHTES
93
4.4.11.
SH
UND
SS-GRUPPEN-BESTIMMUNG
97
4.4.12.
H202-BESTIMMUNG
98
4.4.13.
BESTIMMUNG
DES
BRECHUNGSINDEX
98
4.5.
MODIFIKATION
DER
STRAHLENWIRKUNG
AUF
KRISTALLIN
100
4.5.1.
FRAKTIONIERTE
BESTRAHLUNG
BEIM
KRISTAIIIN-ROHEXTRAKT
100
4.5.2.
VARIATION
DER
BEGASUNGSBEDINGUNGEN
BEIM
KRISTAIIIN-ROHEXTRAKT
102
4.5.3.
BESTRAHLUNG
DES
KRISTALLIN-ROHEXTRAKTES
MIT
UND
OHNE
ALPHA-KRISTALLIN
104
4.5.4.
VARIATION
VERSCHIEDENER
ADDITIVA
BEIM
KRISTAIIIN-ROHEXTRAKT
106
INHALTSVERZEICHNIS
IV
4.5.4.1.
UV-ABSORPTIONSSPEKTROSKOPIE
106
4.5.4.2.
FLUORESZENZSPEKTROSKOPIE
111
4.5.4.3.
GROESSENAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE
115
4.5.5.
VARIATION
VERSCHIEDENER
ADDITIVA
BEI
DEN
EINZELNEN
KRISTALLIN-SPEZIES
119
4.5.6.
REPARATURVERSUCHE
AN
STRAHLENGESCHAEDIGTEM
KRISTALLIN
120
4.5.6.1.
UV-ABSORPTIONSSPEKTROSKOPIE
121
4.5.6.2.
SDS-EIEKTROPHORESE
123
4.5.7.
DENATURIERUNGSEXPERIMENTE
124
4.5.8.
UVA/B-BESTRAHLUNG
128
5.
DISKUSSION
DER
ERGEBNISSE
130
5.1.
ISOLIERUNG
UND
ANREICHERUNG
DER
KRISTALLINE
130
5.2.
STRAHLENEFFEKTE
AN
KRISTALLINEN
130
5.3.
MODIFIKATION
DER
STRAHLENWIRKUNG
134
5.4.
SCHLUSSFOLGERUNGEN
144
6.
LITERATURVERZEICHNIS
145 |
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