Transplazentare Übertragung von Retroviren bei der Maus:
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| Format: | Book |
| Language: | German |
| Published: |
Weilheim
Ingera-Verl.
1996
|
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| Item Description: | Zugl.: Hohenheim, Univ., Diss., 1996 |
| Physical Description: | 90 S. Ill. : graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
1
1
EINLEITUNG
3
2
SCHRIFTTUM
4
2.1
RETROVIREN
4
2.2
MORPHOLOGIE
VON
RETROVIREN
4
2.3
KLASSIFIZIERUNG
VON
RETROVIREN
6
2.4
REPLIKATIONSZYKLUS
VON
C-TYP
RETROVIREN
7
2.5
PATHOGENESE
9
2.6
MURINE
LEUKAEMIE
VIREN
(MULV)
9
2.7
UEBERTRAGUNG
VON
MURINEN
LEUKAEMIE
VIREN
(MULV)
11
2.8
VIRUSINDUZIERENDE
AGENTIEN
12
2.8.1
DEXAMETHASON
UND
VIRUSINDUKTION
13
3
MATERIAL
UND
METHODEN
15
3.1
MATERIAL
15
3.1.1
CHEMIKALIEN,
REAGENTIEN
UND
HERSTELLER
15
3.1.2
VERSUCHSTIERE
17
3.1.3
VERWENDETE
ZELLINIEN
17
3.2
METHODEN
17
3.2.1
ZELLKULTIVIERUNG
17
3.2.2
ERSTELLEN
VON
PRIMAERKULTUREN
18
3.2.3
PASSAGIEREN
VON
ZELLEN
18
3.2.4
EINFRIEREN
VON
ZELLEN
18
3.2.5
AUFTAUEN
VON
ZELLEN
19
3.2.6
BESTIMMUNG
DER
ZELLZAHL
3.2.7
UNTERSUCHUNG
AUF
MYKOPLASMEN-KONTAMINATION
19
3.2.8
VIRUSNACHWEIS
IN
DER
ZELLKULTUR
DURCH
INDIREKTE
19
IMMUNPEROXIDASE
FAERBUNG
(IPF)
19
3.2.9
VIRUSNACHWEIS
IM
BLUT
MITTELS
INDIREKTER
IMMUNPEROXIDASE
20
FAERBUNG
(IPF)
3.2.10
BESTIMMUNG
DES
VIRUSTITERS
ZELLFREIER
UEBERSTAENDE
ZUR
21
INFEKTION
VON
MAEUSEN
MITTELS
INDIREKTER
IMMUNPEROXIDASE
FAERBUNG
(IPF)
SEITE
3.3
EMBRYOTRANSFER-VERFAHREN
BEI
DER
MAUS
21
3.3.1
BEREITSTELLUNG
VON
EMBRYO-EMPFAENGER-WEIBCHEN
21
3.3.2
SUPEROVULATION
VON
EMBRYO-SPENDER-WEIBCHEN
21
3.3.3
ENTNAHME
VON
2-ZELL-EMBRYONEN
22
3.3.4
EINSATZ
VON
FERTILEN
MAENNCHEN
23
3.3.5
VASEKTOMIERUNG
VON
MAENNCHEN
23
3.3.6
NARKOTISIERUNG
VON
MAEUSEN
BEIM
EMBRYOTRANSFER
24
3.3.7
TRANSFER
VON
2-ZELL-EMBRYONEN
24
3.3.8
ENTNAHME
VON
FETEN
ZUR
DNA
UND
RNA-ANALYSE
24
3.3.9
ENTNAHME
VON
BLUT
UND
SCHWANZBIOPSIEN
25
3.4
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
25
3.4.1
ISOLIERUNG
GENOMISCHER
DNA
AUS
GEWEBE
25
3.4.2
RESTRIKTIONSVERDAU
VON
GENOMISCHER
DNA
26
3.4.3
FAELLUNG
DER
DNA
26
3.4.4
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
DNA
26
3.4.5
DNA
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
26
3.4.6
FIXIERUNG
DER
DNA
AUF
NITROZELLULOSEMEMBRANEN
(SOUTHERN
BLOT)
27
3.4.7
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DNA
28
3.4.8
DNA
SOUTHERN-HYBRIDISIERUNG
28
3.4.9
ISOLIERUNG
VON
RNA
AUS
GEWEBE
29
3.4.10
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
RNA
29
3.4.11
RNA
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
29
3.4.12
FIXIERUNG
DER
RNA
AUF
NITROZELLULOSEMEMBRAN
(NORTHERN
BLOT)
30
3.4.13
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
RNA
30
3.4.14
NORTHERN-HYBRIDISIERUNG
DER
RNA-PROBEN
30
3.4.15
POLYMERASE
CHAIN
REAKTION
(PCR)
31
3.4.16
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
VON
PCR
PRODUKTEN
UND
IHRE
FIXIERUNG
AUF
NITROZELLULOSEMEMBRAN
32
3.4.17
RADIOAKTIVE
ENDMARKIERUNG
DER
OLIGONUKLEOTID-SONDE
32
3.4.18
SOUTHERN-HYBRIDISIERUNG
DER
PCR-PRODUKTE
33
3.4.19
ISOLIERUNG
VON
PROTEINEN
AUS
GEWEBE
34
3.4.20
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
PROTEINEN
34
3.4.21
PROTEIN
GEL-ELEKTROPHORESE
34
3.4.22
FIXIERUNG
DER
PROTEINE
AUF
NITROZELLULOSEMEMBRANEN
(WESTERN
BLOT)
35
3.4.23
ANTIGEN-NACHWEIS
AUF
WESTERN
BLOT
36
3.4.24
COMPUTER
PROGRAMME
37
SEITE
4
ERGEBNISSE
38
4.1
EXPRESSION
VON
PROVIRUS
IN
EMBRYOFIBROBLASTEN-ZELLKULTUREN
38
4.1.1
EXPRESSION
ECOTROPER
PROVIREN
IN
EMBRYOFIBROBLASTEN
ZELLKULTUREN
VON
AKR-MAEUSEFETEN
38
4.1.2
EXPRESSION
XENOTROPER
PROVIREN
AUS
EMBRYOFIBROBLASTEN
ZELLKULTUREN
VON
AKR
MAEUSEFETEN
40
4.2
INDUKTION
DER
PROVIRUS-EXPRESSION
41
4.2.1
VIRUSINDUKTION
IN
AKR-ZELLKULTUREN
GERINGER
PASSAGENZAHL
MIT
DEXAMETHASON
41
4.2.2
VIRUSINDUKTION
IN
AKR-ZELLKULTUREN
HOHER
PASSAGENZAHL
MIT
DEXAMETHASON
42
4.3
VERLAUF
DER
VIRUSINFEKTION
NACH
POSTNATALER
INFEKTION
KUENFTIGER
LEIHMUETTER
43
4.3.1
VIRUSTITER
AKV-INFIZIERTER
SWR/J-WEIBCHEN
43
4.3.2
INFEKTIOSITAET
VON
BLUTPROBEN
INFIZIERTER
MAEUSE
44
4.3.3
INFEKTIOSITAET
VON
AKV
IN
ZELLFREIEM
ZELLKULTUR-UEBERSTAND
45
4.4
INFEKTION
VON
MAEUSE-MAENNCHEN
DURCH
VIRAEMISCHE
WEIBCHEN
BEIM
DECKAKT
46
4.5
NACHWEIS
DER
VIRUSINFEKTION
IM
FETUS
47
4.5.1
QUALITATIVE
KONTROLLE
DER
DNA
NACH
DER
ISOLATION
AUS
SWR/J
FETEN
47
4.5.2
NACHWEISGRENZE
DER
PCR
48
4.5.3
UNTERSUCHUNG
VON
SWR/J-FETEN
AUF
PROVIRUSINTEGRATION
MIT
DER
PCR-METHODE
49
4.5.4
UNTERSUCHUNG
DER
PROVIRUSINTEGRATION
VON
SWR/J-FETEN
AUS
AKV-INFIZIERTEN
AMMEN
MIT
DEM
SOUTHERN
BLOT
VERFAHREN
51
4.5.5
VIRUSINFEKTION
VON
SWR/J-EMBRYONEN
IN
AKR/J-LEIHMUETTEM
53
4.6
ANZAHL
DER
PROVIRUSINTEGRATIONEN
IN
INFIZIERTEN
SWR/J-FETEN
AUS
AKR/J
UND
AKV-INFIZIERTEN
SWR/J-LEIHMUETTEM
54
4.7
VIRUSEXPRESSION
IN
INFIZIERTEN
MAEUSEFETEN
55
4.7.1
UNTERSUCHUNG
VON
SWR/J-FETEN
AUF
VIRUSEXPRESSION
MIT
DER
NORTHERN
BLOT
ANALYSE
55
4.7.2
EXPRESSION
VIRALER
PROTEINE
IN
INFIZIERTEN
SWR/J-FETEN
AUS
AKV-INFIZIERTEN
SWR/J
LEIHMUETTEM
56
4.7.3
EXPRESSION
VIRALER
PROTEINE
IN
INFIZIERTEN
SWR/J-FETEN
AUS
AKR/J
LEIHMUETTEM
57
4.8
EMBRYONALER
FRUEHTOD
UND
VIRUSINFEKTIONEN
DES
TRANSFERIERTEN
EMBRYOS
DURCH
DIE
LEIHMUTTER
57
4.9
HAEUFIGKEIT
VON
EMBRYONALEM
FRUEHTOD
IN
MAEUSEFETEN
59
4.9.1
NATUERLICHES
AUFTRETEN
VON
EMBRYONALEM
FRUEHTOD
59
4.9.2
AUFTRETEN
VON
EMBRYONALEM
FRUEHTOD
NACH
DEM
TRANSFER
VON
62
SEITE
EMBRYONEN
IN
NICHT-VIRAEMISCHE
AMMEN
4.9.3
AUFTRETEN
VON
EMBRYONALEM
FRUEHTOD
NACH
DEM
TRANSFER
VON
EMBRYONEN
IN
VIRAEMISCHE
AMMEN
63
4.10
EINFLUSS
DES
VIRUSTITERS
DER
LEIHMUETTER
AUF
DAS
AUFTRETEN
VON
EMBRYONALEN
FRUEHTOD
64
4.11
PATHOGENITAET
VON
AKV-INFIZIERTEN
SWR/J
MAEUSEN
66
5
DISKUSSION
66
5.1
INDUKTION
DER
VIRUSEXPRESSION
ZUR
STEIGERUNG
DER
HAEUFIGKEIT
VON
VIRUS-NEUINTEGRATIONEN
66
5.2
NACHWEIS
FUER
NEU
ERWORBENE
PROVIREN
IM
GENOM
DER
MAUS
67
5.3
NACHWEIS
VERFAHREN
DER
VIRUSEXPRESSION
68
5.4
UEBERTRAGUNG
VON
RETROVIREN
BEIM
EMBRYOTRANSFER
DER
MAUS
69
5.5
UEBERTRAGUNG
VON
RETROVIREN
DURCH
VERPAARUNG
70
5.6
EINFLUSS
VERSCHIEDENER
FAKTOREN
AUF
DIE
TRANSPLAZENTALE
UEBERTRAGUNG
71
5.7
VIRUSINFEKTION
UND
EMBRYONALENTWICKLUNG
76
6
ZUSAMMENFASSUNG
79
7
SUMMARY
80
8
LITERATUR
81
DANKSAGUNG
LEBENSLAUF |
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