Der immunhistochemische Nachweis von Östrogen- und Progesteronrezeptoren an Paraffinschnitten von Mammakarzinomgeweben:
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1
EINLEITUNG
1.1
BIOLOGISCHE
GRUNDLAGEN
1
1.2
REZEPTORMESSUNG
BEIM
MAMMAKARZINOM
1
1.2.1
BIOCHEMISCHE
METHODEN
DER
REZEPTORMESSUNG
2
1.2.2
IMMUNHISTOCHEMISCHER
REZEPTORNACHWEIS
AM
GEFRIERSCHNITT
3
1.2.3
IMMUNHISTOCHEMISCHER
REZEPTOMACHWEIS
AM
PARAFFINSCHNITT
4
1.3
ZIELE
DER
VORLIEGENDEN
ARBEIT
6
2
MATERIAL
UND
METHODEN
7
2.1
REAGENZIEN
UND
ANTIKOERPER
7
2.2
PUFFER
UND
LOESUNGEN
8
2.3
VORBEHANDLUNG
DER
OBJEKTTRAEGER
9
2.4
GEWEBE
UND
HISTOLOGISCHE
SCHNITTE
9
2.4.1
MAMMAKARZINOMGEWEBE
9
2.4.2
AUFARBEITUNG
DER
GEWEBEPROBEN
9
2.4.3
GEFRIERSCHNITTE
10
2.4.4
PARAFFINSCHNITTE
11
2.5
UEBERSICHTSFARBUNG
(H.E.-FAERBUNG)
11
2.6
PRINZIP
DER
IMMUNHISTOCHEMISCHEN
REZEPTORFAERBUNG
11
2.7
IMMUNHISTOCHEMISCHER
OESTROGEN
UND
PROGESTERONREZEPTOMACHWEIS
(ER-ICA
UND
PR-ICA)
12
2.7.1
OESTROGENREZEPTORNACHWEIS
AM
GEFRIERSCHNITT
(E-CRYO)
12
2.7.2
OSTROGENREZEPTOMACHWEIS
AM
PARAFFINSCHNITT
(E-PARAFF)
13
2.7.3
PROGESTERONREZEPTOMACHWEIS
AM
GEFRIERSCHNITT
(P-CRYO)
14
2.7.4
PROGESTERONREZEPTOMACHWEIS
AM
PARAFFINSCHNITT
(P-PARAFF)
14
2.8
AUSWERTUNG
15
2.8.1
BEWERTUNG
DER
H
E.-SCHNITTE
15
2.8.2
QUANTITATIVE
BEWERTUNG
DER
IMMUNHISTOCHEMISCHEN
REZEPTORFAERBUNG
15
2.9
BIOCHEMISCHE
REZEPTORMESSUNG
16
2.9
1
HERSTELLUNG
DES
ZYTOSOLS
17
2.9.2
"DEXTRAN-COATED
CHARCOL"-ASSAY
(DCC)
17
2.9.3
"ENZYM-IMMUNO"-ASSAY
(EIA)
17
2.10
STATISTISCHE
PARAMETER
ZUR
CHARAKTERISIERUNG
DER
MESSMETHODEN
18
2.10.1
SENSITIVITAET
19
2.10.2
SPEZIFITAET
19
2
10
3
POSITIVER
VORHERSAGEWERT
19
2.10.4
NEGATIVER
VORHERSAGEWERT
19
2.10.5
UEBEREINSTIMMUNG
19
2.10.6
RANGKORRELATIONSKOEFFIZIENT
NACH
SPEARMAN
(R)
20
2.10.7
KAPPA-STATISTIK
(
K
)
20
3
ERGEBNISSE
21
3.1
METHODISCHE
VORARBEITEN
ZUM
IMMUNHISTOCHEMISCHEN
OESTROGENREZEPTOR
NACHWEIS
AM
PARAFFINSCHNITT
21
3.1.1
FAERBUNG
MIT
DER
PAP-METHODE
21
3.1.2
VORBEHANDLUNG
DER
SCHNITTE
MIT
ENZYMEN
21
3.1.3
''ANBACKEN"
DER
SCHNITTE
22
3.1.4
ZWEI
FAERBEZYKLEN
22
3.1.5
NACHWEIS
MIT
DEM
STREPTAVIDIN-BIOTIN-SYSTEM
(ABC-SYSTEM)
22
3.1.6
OPTIMIERUNG
DER
ABC-METHODE
AN
PRONASE-BEHANDELTEN
PARAFFIN
SCHNITTEN
23
3.1.7
VERDUENNUNG
DES
KONTROLL-ANTIKOERPERS
24
3.2
METHODISCHE
VORARBEITEN
ZUM
NACHWEIS
DES
PROGESTERONREZEPTORS
AM
PARAFFINSCHNITT
24
3.2.1
IMMUNHISTOCHEMISCHER
PR-NACHWEIS
AM
PARAFFINEINGEBETTETEN
SCHNELL
SCHNITTMATERIAL
24
3.2.2
PRONASEBEHANDLUNG
UND
PAP
BZW.
ABC-SYSTEM
25
3.2.3
DAS
"KEM-AUSLAUF
PHAENOMEN"
BEI
ZUVOR
GEFRORENEN
UND
AUFGETAUTEN
GEWEBEN
27
3.2.4
IMMUNHISTOCHEMISCHER
PR-NACHWEIS
AN
PRIMAER
IN
PARAFFIN
EINGE
BETTETEM
MATERIAL
27
3.2.5
ABC-SYSTEM
UND
PRONASEBEHANDLUNG
BEIM
PR-NACHWEIS
29
3.3
BEWERTUNG
DER
IMMUNHISTOCHEMISCHEN
ERGEBNISSE
30
3.3
1
VERGLEICH
UNTERSCHIEDLICHER
SCORE-SYSTEME
30
3.3.2
KLASSENEINTEILUNG
DES
ER-STATUS
31
3.3.3
KLASSENEINTEILUNG
DES
PR-STATUS
31
3.4
ERGEBNISSE
DES
OESTROGENREZEPTOMACHWEISES
32
3.4.1
ERGEBNISSE
DER
EINZELNEN
METHODEN
32
3.4.2
VERGLEICH
DER
ERGEBNISSE
VON
E-CRYO
UND
E-EIA
33
3.4.3
VERGLEICH
VON
E-PARAFF
UND
E-EIA
35
3.4.4
VERGLEICH
ZWISCHEN
GEFRIER
UND
PARAFFINSCHNITTEN
(E-CRYO
BZW.
E-PARAFF)
37
3.4.5
VERGLEICH
DER
DREI
METHODEN
(E-EIA,
E-CRYO
UND
E-PARAFF)
38
3.4.6
VERGLEICH
DES
LIGANDENBINDUNGSASSAY
(E-DCC)
MIT
DEN
UEBRIGEN
METHODEN
40
3.4.7
ABHAENGIGKEIT
DER
SENSITIVITAET
DES
E-DCC
VOM
ALTER
DER
PATIENTIN
42
3.4.8
ZUSAMMENFASSENDE
BEWERTUNG
DER
ERGEBNISSE
DES
ER-NACHWEISES
43
3.5
ERGEBNISSE
DES
PROGESTERONREZEPTOMACHWEISES
45
3.5.1
ERGEBNISSE
DER
EINZELNEN
METHODEN
45
3.5.2
VERGLEICH
DER
BIOCHEMISCHEN
METHODEN
(P-DCC/P-EIA)
46
3.5.3
VERGLEICH
DES
P-CRYO
MIT
DEN
BIOCHEMISCHEN
METHODEN
(P-EIA,
P-DCC)
46
3.5.4
VERGLEICH
DES
P-PARAFF
MIT
DEN
BIOCHEMISCHEN
METHODEN
(P-EIA,
P-DCC)
48
3.5.5
VERGLEICH
ZWISCHEN
PARAFFIN
UND
GEFRIERSCHNITTEN
(P-PARAFLZP-CRYO)
50
3
5.6
ZUSAMMENFASSENDE
BEWERTUNG
DER
ERGEBNISSE
DES
PR-NACHWEISES
50
3.6
"REZEPTORSTATUS''
BEI
GEMEINSAMER
BETRACHTUNG
DES
ER
UND
PR-STATUS
52
3.6.1
BEWERTUNGSSCHEMA
52
3.6.2
VERGLEICH
DES
MIT
DEN
EINZELNEN
METHODEN
ERMITTELTEN
REZEPTORSTATUS
53
3.6.3
ZUSAMMENFASSUNG
ZUM
REZEPTORSTATUS-ERGEBNIS
DER
EINZELNEN
METHODEN
59
4
DISKUSSION
61
4.1
REZEPTORMESSUNG
BEI
MAMMAKARZINOMEN,
WARUM?
61
4.2
CHARAKTERISIERUNG
DER
METHODEN
ZUM
REZEPTOMACHWEIS
62
4.2.1
BIOCHEMISCHE
METHODEN
62
4.2.2
LIGANDENBINDUNGSASSAY
(DCC)
63
4.2.3
IMMUNHISTOCHEMISCHE
METHODEN
63
4.2
4
AUSWERTUNG
DER
IMMUNHISTOCHEMISCHEN
REZEPTORFAERBUNG
64
4.2.5
IMMUNHISTOCHEMISCHER
REZEPTOMACHWEIS
AN
GEFRIERSCHNITTEN
64
4.2
6
IMMUNHISTOCHEMISCHER
REZEPTOMACHWEIS
AN
PARAFFINSCHNITTEN
65
4.2.7
OESTROGENREZEPTORNACHWEIS
AM
PARAFFINSCHNITT
65
4.2.8
PROGESTERONREZEPTORNACHWEIS
AM
PARAFFINSCHNITT
66
4.3
DARSTELLUNG
UND
VERGLEICH
DER
ERGEBNISSE
DER
VIER
METHODEN
67
4.3.1
PROBLEM
DER
REFERENZMETHODE
UND
KAPPA-STATISTIK
67
4.3.2
PROBLEM
DER
SCHWELLENWERTE
67
4.4
ERGEBNISSE
DES
OESTROGENREZEPTOMACHWEISES
69
4
4.1
EIGENE
ERGEBNISSE
69
4.4
2
VERGLEICH
MIT
DER
LITERATUR
69
4.5
ERGEBNISSE
DES
PROGESTERONREZEPTOMACHWEISES
73
4.5.1
EIGENE
ERGEBNISSE
73
4.5.2
VERGLEICH
MIT
DER
LITERATUR
73
4.6
VERGLEICH
DER
PROGNOSTISCHEN
UND
THERAPEUTISCHEN
AUSSAGEN
DER
METHODEN
75
4.7
ABSCHLIESSENDE
BEWERTUNG
DES
ER-UND
PR-NACHWEISES
AM
PARAFFINSCHNITT
75
4.8
AUSBLICK
76
5
ZUSAMMENFASSUNG
77
6
LITERATURVERZEICHNIS
79
7
ANHANG
85
ABBILDUNGEN
85
TAB.
I
-
III
87 |
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