Echovirus 12 und Rhodanin: Untersuchungen zur Wechselwirkung eines Picornavirus mit einer antiviralen Substanz
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1996
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
I
ABKUERZUNGEN
III
1.
EINLEITUNG
1
1.1
KLASSIFIZIERUNG
UND
STRUKTUR
VON
ECHOVIREN
1
1.2
DIE
REPLIKATION
VON
PICORNAVIREN
3
1.3
ANTIPICOMAVIRALE
SUBSTANZEN
7
1.4
ZIEL
DER
ARBEIT
10
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
11
2.1
MATERIAL
11
2.1.1
REAGENZIEN
11
2.1.2
ZELLEN
UND
MEDIEN
11
2.1.3
VIREN
11
2.1.4
BAKTERIEN
12
2.1.5
PLASMIDE
12
2.1.6
OLIGONUKLEOTIDE
12
2.2
METHODEN
15
2.2.1
ZELLKULTUR
15
2.2.2
VIRUSANZUCHT
UND
REINIGUNG
15
2.2.3
BESTIMMUNG
DES
VIRUSTITERS
16
2.2.3.1
PLAQUETEST
16
2.2.3.2
ENDVERDUENNUNGSMETHODE
-
BESTIMMUNG
DER
TCID^
NACH
REED
UND
MUENCHLOE
2.2.4
REINIGUNG
VON
VIRUSPROTEINEN
17
2.2.5
REINIGUNG
DER
VIRUS-RNA
17
2.2.6
CDNA-SYNTHESE
17
2.2.7
SEQUENZIERUNG
VON
DNA
UND
RNA
18
2.2.8
PRAEPARATION
VON
DNA
18
2.2.9
POLYMERASEKETTENREAKTION
(PCR)
18
2.2.10
IN
VITRO
TRANSKRIPTION
19
2.2.11
TRANSFEKTIONSEXPERIMENTE
19
2.2.12
NEUTRALISATIONSTEST
19
INHALT
2.2.13
RHODANIN-SENSITIVITAETSTEST
20
2.2.14
ANALYSE
DER
ADSORPTION
REKOMBINANTER
VIREN
20
2.2.15
ANALYSE
DES
YYUNCOATING
"
REKOMBINANTER
VIREN
20
2.2.16
HITZEINAKTIVIERUNGSEXPERIMENTE
21
3.
ERGEBNISSE
22
3.1
MOLEKULARBIOLOGISCHE
ANALYSE
VON
ECHOVIRUS
12
22
3.1.1
REINIGUNG
DER
KAPSIDPROTEINE
UND
BESTIMMUNG
DER
PROTEASESCHNITTSTELLEN
IN
DER
PI-REGION
22
3.1.2
ECHOVIRUS
TYP
12
WILDTYP
RNA-PRAEPARATION,
CDNA-SYNTHESE
UND
SEQUENZIERUNG
23
3.1.3
KONSTRUKTION
EINES
KOMPLETTEN
VIRUSGENOMS
UND
EINES
INFEKTIOESEN
KLONS
VON
ECHOVIRUS
12
WT
24
3.1.4
SEQUENZIERUNG
UND
KLONIERUNG
DER
RHODANINRESISTENTEN
VARIANTE
27
3.1.5
INFEKTIOESE
KLONE
MIT
YYRES
"
-MUTATIONEN
29
3.1.6
SEQUENZIERUNG
UND
KLONIERUNG
DER
RHODANINABHAENGIGEN
VARIANTE
32
3.1.7
INFEKTIOESE
KLONE
MIT
YYDEP
"
-MUTATIONEN
33
3.2
UNTERSUCHUNGEN
DER
BIOLOGISCHEN
EIGENSCHAFTEN
DER
REKOMBINANTEN
VIREN
34
3.2.1
RHODANIN-SENSITIVITAETSTESTS
34
3.2.1.1
DAS
REKOMBINANTE
WILDTYPVIRUS
,JE12
WT
"
34
3.2.1.2
DIE
REKOMBINANTEN
VIREN
DER
RESISTENTEN
VARIANTE
35
3.2.1.3
DIE
REKOMBINANTEN
VIREN
DER
ABHAENGIGEN
VARIANTE
39
3.2.2
ADSORPTION
UND
UNCOATING
REKOMBINANTER
VIREN
40
3.2.3
HITZEINAKTIVIERUNGSEXPERIMENTE
42
3.2.3.1
ECHOVIRUS
12
UND
DAS
REKOMBINANTE
WILDTYPVIRUS
42
3.2.3.2
HITZEINAKTIVIERUNG
VON
ECHOVIRUS
12
VARIANTEN
43
4.
DISKUSSION
45
5.
ZUSAMMENFASSUNG
54
6.
ANHANG
55
6.1
ANHANG
1
55
6.2
ANHANG
2
59
7.
LITERATUR
61 |
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