Sezernierter PAI-2 und zelloberflächenassoziiertes Plasminogenaktivator-System bei HaCaT-Zellen:
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1994
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Beschreibung: | Heidelberg, Univ., Diss., 1995 (Nicht für den Austausch) |
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INHALTSVERZEICHNIS:
1 EINLEITUNG.1
1.1 DIE KOMPONENTEN DES PLASMINOGENAKTIVATORSYSTEMS.3
1.1.1 PLASMINOGEN UND PLASMIN.3
1.1.2
AL
ANTIPLASMIN.4
1.1.3 UROKINASETYP-PLASMINOGENAKTIVATOR (UPA).5
1.1.4 GEWEBETYP-PLASMINOGENAKTIVATOR (TPA).6
1.1.5 PLASMINOGENAKTIVATOR-INHIBITOR 1 (PAI-1).7
1.1.6 PLASMINOGENAKTIVATOR-INHIBITOR 2 (PAI-2).7
1.2 DIE ZELLINIE HACAT.8
1.3 ZIELSETZUNG DER ARBEIT.9
2 MATERIAL UND METHODEN.10
2.1 MATERIAL.10
2.1.1 ANTIGENE. 10
2.1.2 ANTIKOERPER.10
2.1.3 SPEZIELLE REAGENTIEN UND CHEMIKALIEN.11
2.1.4 MATERIALIEN.12
2.1.5 GERAETE.12
2.1.6 PUFFER UND LOESUNGEN.12
2.1.6.1 ELISA.12
2.1.6.2 DURCHFLUSSZYTOMETRIE.13
2.1.6.3 CHROMOGENE TESTS.13
2.1.6.4 SAEUREBEHANDLUNG.13
2.1.6.5 METHYLENBLAU-ZELLFAERBUNG.13
2.1.6.6 ZELLKULTUR.14
2.2 METHODEN.14
2.2.1 ELISA.14
2.2.2 ZELL-ELISA.15
2.2.3 DURCHFLUSSZYTOMETRIE.15
2.2.4 CHROMOGENE TESTS.16
2.2.4.1 DIREKTER CHROMOGENER TEST.17
2.2.4.2 INDIREKTER CHROMOGENER TEST. 17
2.2.4.3 CHROMOGENE TESTS AUF DER ZELLOBERFLAECHE.17
2.2.5 METHYLENBLAU-ZELLFAERBUNG.18
2.2.6 PROTEINBESTIMMUNG.19
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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2.2.7 ZELLKULTUR.
19
2.2.7.1 GEWINNUNG VON STANDARDUEBERSTAENDEN.19
2.2.7.2 GEWINNUNG VON UEBERSTAENDEN IN GEGENWART VON VERSCHIEDENEN
ARZNEIMITTELN.20
2
.
2.13 VERWENDUNG DER ZELLEN FUER ANALYSEN DER ZELLOBERFLAECHE.20
3 ERGEBNISSE.21
3.1 CHARAKTERISIERUNG DES PAI-2-ELISA.21
3.1.1 SPEZIFITAET DES VERWENDETEN MONOKLONALEN ANTIKOERPERS.21
3.1.2 SENSITIVITAET, PRAEZISION, REPRODUZIERBARKEIT UND RICHTIGKEIT.23
3.2 PAI-2-KONZENTRATION IN SERUMFREIEN KULTURUEBERSTAENDEN VERSCHIEDENER
HACAT-ZELLVARIANTEN.27
3.2.1 HACAT-ZELLEN.^.27
3.2.2 HACAT
RAS-ZELLEN.28
3.2.3 EINFLUSS VON PHARMAKA AUF DIE PAI-2-FREISETZUNG DURCH HACAT 42-
ZELLEN.31
3.3 CHARAKTERISIERUNG DES ZELL- BZW. ZELLOBERFLAECHENASSOZIIERTEN
PLASMINOGENAKTIVATOR-SYSTEMS VERSCHIEDENER HACAT-VARIANTEN.33
3.3.1 ZELL-ELISA UND DURCHFLUSSZYTOMETRIE.33
3.3.2 DAS ZELLOBERFLAECHENASSOZIIERTE PLASMINOGENAKTIVATOR-SYSTEM AM
BEISPIEL DER HACAT 46-ZELLINIE.38
3.3.2.1 ABHAENGIGKEIT DER PLASMINOGENAKTIVATOR-AKTIVITAET VON DER
ZELLDICHTE BEI
UNTERSCHIEDLICHER KULTIVIERUNGSDAUER.39
3.3.2.2 REGULATION DER PLASMINOGENAKTIVATOR-AKTIVITAET AUFZELLEN
DURCH PAI-1 UND PAI-2.41
3.3.2.3 SATURIERUNG DES UPA-REZEPTORS DURCH (ENDOGENEN) UPA.44
3.3.2.4 AKTIVITAETSSTEIGERUNG VON UPA DURCH BINDUNG AN DIE
ZELLOBERFLAECHE.47
3.3.2.5 PHOSPHOLIPASE C-SENSITIVITAET DES UPA-REZEPTORS.48
3.4 VERGLEICH DER MALIGNEN ZELLINIE HARAS II-4/8 MIT NORMALEN
HACAT-ZEUEN.49
3.4.1 ANTEIL VON UPA BZW. TPA AN DER PLASMINOGENAKTIVATOR-AKTIVITAET IN
KULTURUEBERSTAENDEN UND AUFZELLEN.49
3.4.2 ABHAENGIGKEIT DER ZELLOBERFLAECHENASSOZIIERTEN PLASMINOGENAKTIVATOR-
AKTIVITAET VON DER ZELLDICHTE BEI HARAS II-4/8-ZELLEN IM VERGLEICH ZU
HACAT-46-ZELLEN.52
3.4.3 INHIBITION DER PLASMINOGENAKTIVATOR-AKTIVITAET IN HARAS
II-4/8-KULTUR
UEBERSTAENDEN UND AUF HARAS II-4/8-ZELLEN DURCH PAI-1 UND PAI-2.53
4 DISKUSSION.59
4.1 ETABLIERUNG DES PAI-2-ELISA.59
4.2 PAI-2 BEI KULTIVIERTEN KERATINOZYTEN UND IN DER EPIDERMIS.60
4.3 DAS ZELLOBERFLAECHENASSOZIIERTE PLASMINOGENAKTIVATOR-SYSTEM.62
4.4 VERGLEICH DES PLASMINOGENAKTIVATOR-SYSTEMS
DER MALIGNEN HARAS II-4/8-ZELLEN MIT DEM NORMALER HACAT-ZELLEN.65
5 ZUSAMMENFASSUNG.68
6 LITERATUR.
69
6.1 EIGENE VEROEFFENTLICHUNGEN.78
7 DANKSAGUNG.79
8 LEBENSLAUF.80 |
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